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            • 1. (每空2分,共18分)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题:

              (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以 ________________为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于___________培养基。

              (2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,这两种方法的共性都是将_______________________________________,从而能在培养基表面_______________________________________。

              (3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力_________。

              (4)通常情况下,在微生物培养过程中实验室常用___________法对培养皿等进行灭菌、____________________法对培养基进行灭菌。无菌技术要求实验操作应在酒精灯                __________附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。

              (5)实验室培养微生物过程中,对于不再使用的菌液或培养基要经过_______处理后,才能进行清洗。

            • 2.

              (每空2分,16分)根据课本所学回答下列问题。

              (1)在大肠杆菌培养过程中,要添加的营养成分主要是_________、___________和__________等条件。

              (2)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的_________。 

              (3)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。 

              (4)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是:将____________的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基____________。

              (5)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。 

            • 3. 某些农作物秸秆富含纤维素,纤维素经过水解可以形成葡萄糖,葡萄糖再经过发酵可以生产酒精.如图是利用农作物秸秆生产酒精的大致流程,请回答下列问题:

              (1)纤维素分解菌能合成纤维素酶,纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少含有三种组分,其中前两种酶使纤维素分解成    ,第三种酶将它分解成葡萄糖.
              (2)图中发酵阶段常用的菌种是酵母菌,在酒精发酵时一般将温度控制在    ℃,方程式可表示为    ,发酵后是否有酒精产生可以用    来检验.
            • 4. (2016•大庆一模)纤维素为白色、无气味的纤维状结构物质,不溶于水,也不溶于一般有机溶剂,而纤维素分解菌能够产生纤维素酶分解纤维素.下表为鉴别纤维素分解菌的培养基配方,如图为培养菌落的染色结果,根据以下设问,回答相关问题:
              CMC-Na酵母膏KH2PO4琼脂土豆汁
              5g~10g1g0.25g15g100mL
              (1)由配方表可知,培养微生物通常需要        、水、无机盐和生长因子五类成分.从土壤中分离纤维素分解菌,最好选择在富含    的环境中采集土样.
              (2)纤维素分解菌可分泌纤维素酶,其为一种复合酶,至少包括三种组分,即    酶、Cx酶和    酶.
              (3)参考图,在筛选纤维素分解菌的过程中,通常用    染色法,这种方法可通过是否产生    来对纤维素分解菌进行初步筛选,因该染料并不和纤维素水解后的    和葡萄糖发生颜色反应.
              (4)某研究小组培养纤维素分解菌,接种时应通过    法,才可得到右图所示结果.若已知2菌落中为淀粉分解菌,而1和3两种菌为纤维素分解菌或色素分解菌.请你设计一个简便的方法来鉴别1和3.
                  
            • 5. 纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,下列是关于分离土壤中能够分解纤维素的微生物的相关问题,请回答:
              (1)自然界中纤维素含量最高的天然产物是    .某些微生物能分解纤维素,因为他们能产生纤维素酶,纤维素酶至少包括三种组分,即    
              (2)实验室中筛选微生物的原理是    .筛选纤维素分解菌应先将从土壤中获得的微生物,在以纤维素为唯一碳源的    (填“固体”或“液体”)培养基上进行选择培养,选择培养的目的是    
              (3)用刚果红染色法对分离出的微生物进行筛选,刚果红可以与纤维素形成    ,当纤维素被纤维素酶分解后,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的    .从培养基的用途上分类,刚果红培养基属于    培养基.
            • 6. 有些微生物能合成纤维素酶,通过对这些微生物的研究,使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精,用纤维素酶处理服装面料等.研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物.分析回答问题:
              (1)培养基中加入的化合物A是    ,为微生物的生长提供    ,这种培养基属于    培养基.
              (2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物,向培养基中加入    
              (3)在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前,可用液体培养基培养,增加微生物的浓度.若获得纯净的菌株,常采用平板划线的方法进行接种,此过程所用的接种工具是    ,操作时采用    灭菌的方法;还可用    方法操作.
              (4)实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉,这样做的目的是    
            • 7. 某生物兴趣小组打算进一步探究纤维素分解菌的作用,请帮助完成相关实验设计:
              (1)问题:纤维素分解菌能否分解淀粉呢?
              (2)假设:    
              (3)实验步骤
              ①配制两份相同的含淀粉的且适合纤维素分解菌生长的液体培养基.
              ②向其中一组培养基    ,另一组不做处理.
              ③将上述两组培养基置于相同且适宜条件下培养一段时间.
              ④向两组培养基中分别滴加3滴碘液,观察颜色变化.
              (4)实验结论:
              ①若    ,则假设成立.
              ②若    ,则假设不成立.
            • 8. 某研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到以葡萄糖为碳源的培养基中,在适宜条件下连续培养多代,然后取样分析其中存在的新菌株.请回答下列问题:
              (1)用于培养JA122大肠杆菌的培养基中除了葡萄糖作为碳源外,还应该含有 ,要观察JA122大肠杆菌的菌落特征,则需在以上培养基中加入 .
              (2)若要对JA122大肠杆菌计数,接种方法为 , 接种时接种工具要 后再使用.
              (3)样品中共发现CV101、CV103、CV116三种新菌株,均能在以葡萄糖为碳源的培养基上生长.
              ①鉴定CV101、CV103、CV116是新菌株的依据是菌落 
              ②对三种菌株的代谢差异进行分析发现,CV103对葡萄糖吸收率最高,代谢终产物是醋酸盐.进一步研究表明,CV101可以在经灭菌处理后的培养过CV103的培养基中生长,据此作出的推测是: .
              ③某同学设计了以下实验来验证以上推测.
              第1步:配制以 为唯一碳源的培养基;
              第2步:将CV101和CV103菌株分别接种到新配制的培养基中培养一段时间,并观察记录菌株的生长情况.
              预期实验结果及可得出的结论: .
            • 9. 将醋酸菌突变体中与耐酸有关的ALDH基因导入优良醋酸菌中,选育出高发酵速率、耐酸的醋酸菌,用于果醋生产.
              请分析回答下列问题:

              (1)对含有ALDH基因的DNA与质粒用同种限制酶切割后,通过  酶连接形成重组质粒. 为获得耐酸的醋酸菌,用 法接种于含高浓度醋酸的培养基进行筛选.将筛选  纯化的菌种用 的方法长期保存.
              (2)图1表示温度尧乙醇浓度对该醋酸菌产酸量的影响.
              ①醋酸菌能将乙醇转变为 ,再将其转变为醋酸.
              ②研究不同酒精浓度下的最高产酸量时,最好把温度控制为 ℃,如温度过高,醋酸菌代谢缓慢甚至死亡,原因是 
              ③酒精发酵后通过出料口检测酒精浓度,将发酵液中酒精浓度调节到  左右,才接种醋酸菌,较高的酒精浓度会使产酸量下降,不适宜接种,原因是 .
              (3)为检测发酵过程中醋酸菌数量,将1mL发酵液稀释100倍后,分别取0.1mL稀释菌液均匀 涂布在4个平板上曰经适当培养后,4个平板上的菌落数分别为24、139、140、141,据此可得出每毫升发酵液中的活菌数为 个/mL.
            • 10. 反刍动物,如牛和山羊,具有特殊的器官﹣﹣瘤胃,在瘤胃中含有多种微生物,其中许多微生物能以尿素作唯一氮源.以下示意图是从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物流程.

              (1)进行①过程的目的是 ;②过程所使用的接种方法是 .用该接种方法对微生物进行计数时,统计的菌落数往往比活菌的实际数目 ,原因是 
              (2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于  培养基,制备该培养基的步骤是:计算→  →灭菌→倒平板.由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌,接触空气后会死亡,因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备Ⅰ号培养基外,还要提供  的条件.
              (3)酶对化学反应的催化效率称为酶活性,图示的酶活性的高低可用 中 的减少量来表示.
              (4)萃取胡萝卜素的过程应避免明火加热,采用水浴加热的原因是 
              (5)如果要对具有优良性状的植物进行大规模种植可采用方法,在对外植体进行接种前,需要进行制备MS 固体培养基和 两项工作.培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值  (填“高”或“低”)时,有利于芽的分化.
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