（每空1分，共7分）生物技术在日常生活中应用非常广泛，请回答下列与生物技术有关的问题：

（1）消毒和灭菌是两个不同的概念。下列适用于消毒处理的是________。

①牛奶生产线②培养基③医用注射器④注射药物时的皮肤⑤接种环⑥手术刀

（2）在制备果酒过程中，发酵温度需要控制在________。利用葡萄糖制作果酒和果醋时，使用的微生物在结构上的不同点主要是________。

（3）实验室常采用________法来检测泡菜中亚硝酸盐的含量。亚硝酸盐在特定的条件下会转变成致癌物——_________，测定亚硝酸盐的含量时，需要在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐能与___________发生重氮化反应。

（4）农作物秸秆含有丰富的纤维素，纤维素要经过纤维素分解菌分解成葡萄糖，人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌，分离纤维素分解菌常用的方法是______________________。

(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用______________或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是______________________。

(2)培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供________和________。

(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和________以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用________方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是__________________。

(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为____________。

（1）亚硝酸盐在特定的条件下会转变成致癌物—— _________。

（2）倒平板时，要将冷凝后的平板倒置的原因是___________________________ 。

（3）统计微生物数目常用的两种方法是_________________和_________________。

一种广泛使用的除草剂（含氮有机物）在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液，用无菌吸管吸取1mL液样至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释10³稀释度．各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为 ______ ．
（2）要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从用途方面来看，上述培养皿中培养基的特点是 ______ ．
（3）接种技术的核心是 ______ ．在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步 ______ ，培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 ______ 或有氧条件抑制了这些细菌的生长．
（4）在培养基上形成的菌落中，无透明圈菌落利用的氮源主要是 ______ ，有透明圈菌落利用的氮源主要是 ______ ，据此可筛选出目的菌．实验结果如图显示的A～E五种菌株中， ______ 是最理想菌株．

I.[生物一选修1:生物技术实践]

酵母菌是生物科学研穷中一种重要的生物材料，请回答：

（1）酵母菌的新陈代谢类型是__________，其细胞内将葡萄糖分解为酒精的酶存在于__________。

（2）某同学尝试用新鲜葡萄制作葡萄酒、为验证发酵液中含有酒精，取2mL发酵液加入试管中，滴加O.5mL浓硫酸酸化的重铬酸钾溶液并轻轻震荡，观察到溶液变__________色，则证明发酵液中含酒精。

（3）研究者利用基因工程技术改造酵母菌，得到如下四种变异菌株：①菌株Ⅰ——不能合成纤维素酶，菌株Ⅱ——合成的纤维素酶不能分泌到细胞外，菌株Ⅲ——合成的纤维素酶能分泌到细胞外，菌株Ⅳ——合成的纤维素酶分泌并固定于细胞壁。

在以纤维素为唯一碳源的培莽基上能生长繁殖形成菌落的是菌株_______，若在培养基中加入_______，则菌落周围会出现透明圈。在利用纤维素生产酒精时，与菌株Ⅲ相比，菌株Ⅳ的纤维素酶的利用率高，因为______________________________________________________________。

（4）为研究发酵罐中酿酒酵母菌的生长情况，常要取样统计分析，并测定pH值。若某研究人员将样品的次序搞乱了，那么判断取样顺序的主要依据基__________（填“酵母菌的数量”或“发酵液的pH”）。

II.[生物一选修3:现代生物科技专题]

内皮抑素是一种效果良好的新型抗癌药物，由胶原XⅤⅢ（广泛存在于肝脏等组织中）降解产生。我国科学家研制成含转入内皮抑素基因双歧杆菌的口服液，口服后，双歧杆菌在肠道定植、繁殖，双歧杆菌死亡裂解后，其产生的内皮抑素活性片段被吞噬、转运到肿瘤组织发挥作用。回答下列问题：

（1）要利用逆转录的方法合成人内皮抑素基因，应从__________组织细胞中提取mRNA，与细胞中内皮抑素基因相比，这种方法合成的cDNA没有__________、启动子、终止子等。

（2）根据内皮抑素基因的脱氧核苷酸序列设计并合成引物，利用__________技术得到大量内皮抑素基因。

（3）临床上也有通过静脉注射内皮抑素基因重组腺病毒，使肿瘤生长受到抑制。在进入临床使用前需要进行目的基因的检测与鉴定：用胰蛋白酶将血管内皮组织___________，制成细胞悬液→转入

含_____________________等天然成分的培养液中培养得到大量血管内皮细胞→用重组腺病毒感染血管内皮细胞，若抗原—抗体杂交检测呈阳性并观察到细胞凋亡，则说明_________________。

（4）口服含转入内皮抑素基因双歧杆菌口服液、静脉注射内皮抑素基因重组腺病毒，两种方法都能使肿瘤生长受到抑制，其中属于体内基因治疗的是__________（填“第一种”或“第二种”）。

为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：

(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________；

(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是________________________________________________________________________。

(3)示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。

羧甲基纤维素钠（CMC）是常用的食品添加剂，不能被人体消化吸收，因此通常被认为是安全的食品添加剂．研究者用含1.0%CMC无菌水作为饮用水，连续饲喂实验小鼠12周，测定小鼠体重，结果如图1、图2所示．

（1）图1所示实验中的对照处理是 ______ ．图1结果显示，食用CMC能够 ______ ．综合图1、图2结果，通过比较 ______ ，说明CMC的这种作用依赖于小鼠消化道内的各种微生物．
（2）有人提出：小鼠摄入的CMC改变了其肠道内各种微生物的比例．为检验上述推测，研究者设计了如下实验：
①搜集 ______ （填图中分组编号）小鼠粪便制成悬浮液涂布于 ______ 上（填下列选项前的序号）．
a．以CMC为碳源的液体培养基   b．全营养液体培养基
c．以CMC为碳源的固体培养基         d．全营养固体培养基
②接种后置于 ______ （填“无氧”或“有氧”）条件下培养，通过观察 ______ 以初步鉴定小鼠消化道中的微生物类群．
③统计比较 ______ ，以确定推测是否成立．
（3）为进一步研究“小鼠体重变化是否由CMC引起的小鼠消化道内各种微生物比例改变所致”，研究者设计了粪便移植实验，并检测了被移植小鼠体重的变化．请将下列选项填入下表中（选填选项前的符号），完成实验方案．

a．普通小鼠                    b．无菌小鼠
c．饲喂含CMC无菌水12周的普通小鼠   d．饲喂无菌水12周的普通小鼠
e．含1.0%CMC的无菌水           f．无菌水（不含CMC）