根据植物有效成分的提取等相关知识回答下列问题

Ⅰ：胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：

（1）筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用___________或平板划线法接种。所用培养基从功能上分属于____________。

（2）培养酵母菌R时，在提供四种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物对Ph、________________以及氧气的要求

（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好____________以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用 _________方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是____________

（4）纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素，鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为       。

Ⅱ：植物芳香油提取的最常用方法是___________ ，向收集到的乳浊液中中加入氯化钠有利于________，分离的油层中还需加入__________吸水

牛奶富含矿物质和满足人体生长发育所需的全部氨基酸，消化率高达98％。长期饮用牛奶有利于增强体质，但牛奶也是多种病菌的传播载体。下图是牛奶消毒及细菌检测实验的过程图。请回答下列相关问题：

（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本步骤是___________________________________，

（2）培养基中的蛋白胨为细菌的生长提供的营养物质主要有________（填两个），对培养基常采用________法进行灭菌。

（3）步骤①称为________消毒法，步骤②是________。

（4）步骤③纯化细菌的接种方法是________。除此方法外还有一种纯化的方法是______________，微生物培养过程中，为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿________培养。

（5）将接种后的培养基放入________中培养，36h后取出，统计3个平板上的菌落数分别是87、83和85。经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是________个／mL。

已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

(1)显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用__________(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。

(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以________为碳源的固体培养基进行培养，培养基灭菌采用的最适方法是____________   法。

(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用________________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用______________法进行计数。

(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg，则上述三个温度中，______ ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕________ ℃设计后续实验。

选考题：【生物——选修1：生物技术与实践】

细菌荚膜的观察是微生物形态结构观察的基本内容之一。硅酸盐细菌在无氮培养基、钾细菌培养基及硅酸盐细菌培养基上均能生长，形成较厚的荚膜。下表1为无氮培养基的配方，表2是每种培养基上每个稀释度的菌落数及菌落直径的情况。请回答下列问题：

（1）根据无氮培养基的配方可知，从物理性质上看该培养基属于_____________培养基；从  功能上看，该培养基属于_____________培养基，理由是__________________________。

（2）常见的培养基用___________________灭菌。

（3）为统计硅酸盐细菌的数目，应采用_____________法进行接种，该方法的所有操作都应在_____________附近进行。

（4）进行上述实验的同时也设置了空白对照，若空白对照的培养基中_____________，说明培养基灭菌合格。根据表2中的数据可以得出，用_____________培养基筛选硅酸盐细菌的效果最好。

（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过___________除去其中的固体杂质。

（2）筛选乳酸菌A的操作中，对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。

（3）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）实验的主要步骤如图所示。请分析回答问题：

（1）培养基中加入化合物A的目的是筛选______，这种培养基属于____________培养基。

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的____________，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是____________。

（3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量____________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量__________。(两空均填“增加”或“减少”)

（4）某同学计划统计污水池中目的菌的总数，他选用10^－4、10^-5、10^－6稀释液进行涂布平板，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是________________，此对照实验的目的是证明培养基制备过程中________________。

某生物兴趣小组为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示。请分析回答问题：

(1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入         指示剂，细菌合成的        将尿素分解为         ，pH升高，使指示剂变为红色。

(2)培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌，这种培养基属于        培养基。

(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的        和       ，实验中需要振荡培养，原因是                                      。

(4)下图是利用            法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。通常还可以           方法分离到一个细胞繁殖形成的菌落。

(5)关于图中的操作方法和结果，叙述正确的是             。

 A．操作时要将接种环放在火焰上灼烧灭菌

 B．划线操作须在火焰旁进行

 C．多次划线后培养才可以分离到一个细胞繁殖形成的菌落

 D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸杆生产燃料酒精的大致流程为：

 (1)玉米秸杆经预处理后，应该选用_________酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。这种酶由_____酶、_____酶和__________酶组成。

 (2)从以下哪些微生物中可以提取上述预处理所需的酶 （    ）

A.酿制果醋的醋酸菌   B.生长在腐木上的霉菌 

C.制作酸奶的乳酸菌   D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌    

(3)若从土壤中分离产生这种酶的微生物，培养基中的碳源为___________。 

(4)发酵阶段需要的菌种是__________，在产生酒精时要控制的必要条件是_________、________。发酵产生酒精的反应式为_____________________。    

高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性．研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示．

      （1）②过程所使用的接种方法是 ______ 法．①和②步骤中,下列选项需要用到的是      (填序号，多选)。

    ①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水

      （2）从用途上来说，Ⅰ号培养基属于 ______ 培养基，从物理状态上来说，Ⅱ号培养基属于固体培养基，配制时应加入 ______ 作为凝固剂．

      （3）Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是 ______ ；一般对配制的培养基采用 ______ 法灭菌．

      （4）部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放淀粉酶分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈；应挑出透明圈 ______ （大或小）的菌落，接种到Ⅱ号培养基．

      （5）写出两点避免杂菌污染的措施①                   ②        。