东湖绿道二期已向市民开放，我市某中学学生模拟公司课外兴趣小组为了调查东湖的水质状况，在东湖白马驿站区域取样后测定了水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。请回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时问，这样做的目的是__________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为________。如果该小组实验组平板上菌落平均数为39个／平板，而空白对照组的一个平板上出现了2个菌落，这种结果说明在此次调查中培养基出现了________现象。如果将37（即39－2）个／平板作为本组菌落数的平均值，你觉得该做法_____（填“可行”或“不可行”）。

（2）若想确定平板上的菌落是否有大肠杆菌，一般在培养基中加入伊红美蓝，该培养基从功能上划分属于________________培养基。

（3）该小组经讨论决定采用平板划线法分离水样中的细菌，在第二次及以后的划线操作时，应从______开始划线，这样做的目的是________。

（4）如下图A和B中,_____表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。采用该计数方法结果往往较实际值偏_______（填“高”或“低”）原因是________________。

（5）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________________的利用率。

下表是培养某微生物的培养基的配方，请回答下列问题：

(1)培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、________和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是____________________。培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行________处理。

(2)在配制培养基时，除考虑营养条件外，还要考虑________、____________和渗透压等条件。

(3)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)；操作者的双手需进行清洗和________；空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质________，还能损伤DNA的结构。

(4)分离纯化微生物最常使用的接种方法是__________和________________。

I．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：

(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____________________；然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。

(2)在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_____________________________。

(3)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、______、_______四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_________________________。

（4)纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌

落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________。

（5）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是________________________，该实验设计是否合理？为什么？___________。

（6）若要统计培养液中活菌的数目，则应采用_______________法进行接种。

胡萝卜素是一种常用的食用色素，可从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：

（1）筛选酵母菌R时，需要用到___________（功能）培养基。若该培养基属于固体培养基，则通常含有的凝固剂是___________。

（2）培养酵母菌R时，温度一般控制在_____________。采用_____________法接种时需先灼烧接种环，接种过程需要在酒精灯火焰附近进行。

（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素过程中，干燥时应控制好__________________，以防止胡萝卜素分解；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是________________。

（4）提取的胡萝卜素可通过_____________法进行鉴定。

某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析完成下列问题：

（1）培养基中加入化合物A的目的是筛选            ，这种培养基属于      培养基。

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的       ，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是             。

（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是                    。

（4）转为固体培养时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是      ，操作时采用          灭菌的方法。

（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是                  。

苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。请回答下列问题。

(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入________作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基________(A.影响;B.不影响)细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用________法。

(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于________;使用________法可以在⑥上获得单菌落。

(3)采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养? ______________________。

(4)实验过程中如何防止其他微生物的污染?__________________________。

分析有关资料，回答问题。

I.下表是某培养基的配方。

（1）将幽门螺杆菌接种到pH适宜的该培养基中，最常用的接种方法有__________和稀释涂布平板法。然后置于37℃下培养一段时间后，在该培养基中幽门螺杆菌的数目比刚接种时少，主要原因是____________________________。

（2）纯化细菌时使用的培养基一般用_____________法灭菌，_________________（填“可”或“不可”）用加入抗生素的方法防止杂菌感染。

（3）某小组采用平板划线法分离该细菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是____________________________________________。

II.下列是提取胡萝卜素的操作，请回答有关的问题：

（4）工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，_____________（填“需要”或“不需要”）将新鲜的岩藻干燥。

（5）现有乙醇和乙酸乙脂两种溶剂，应选用其中的________作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是____________________________________________。

Ⅲ.   下图表示利用小鼠胚胎干细胞(ES细胞)做的两项研究，请分析回答下列问题。

(2)a过程构建基因表达载体所使用的工具酶有______________________________，将基因表达载体导入ES细胞的方法是______________。

(3)完成c、d过程的胚胎工程技术分别是________________、_________________。

(4)正常情况下癌细胞的产生是__________导致的；用特定癌细胞的抗原刺激B淋巴细胞，再与骨髓瘤细胞融合后获得________________，与抗癌药物结合制成“生物导弹”，从而定向杀死小鼠癌症模型体内的癌细胞。