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            • 1. 长木蜂有在蜂巢内储存蜂粮(主要是长木蜂咀嚼过的花粉)的习性,其储存的蜂粮在蜂室中能长期保存不变质。研究人员为筛选出蜂粮中具有抑菌作用的微生物,开展实验如下:
              (1)配置培养基。称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl等营养物质,再加入                    和适量的水,配置牛肉膏蛋白胨培养基,其中可提供碳源的有                 。另配置适于乳酸菌生长的MRS培养基。
              (2)系列稀释操作。将一批盛有9mL水的试管作               处理:从三个蜂巢采集 蜂粮各lg,分别加入含有9mL水的试管中混匀,再进行梯度稀释处理。在此过程中,为使菌液与水混合均匀,可将移液管上的橡皮头(洗耳球)                           ;移液管不能重复使用的原因除了需要避免混合上一个稀释浓度的残留液会使稀释不准确外,还有原因是                 

              (3)涂布、培养和计数。将各稀释浓度的试管,分别吸取O.lmL,在两种培养 基上涂布均匀,并在适宜条件下培养。根据菌落的                   (至少写出三项) 等特征初步判断微生物的种类。若在牛肉膏蛋白胨培养基上最多发现有51种微生物生长,在MRS培养基上最多有17种微生物生长,则实际蜂粮中的微生物种类                  (填“可能”或“不可能”)大于68种。

            • 2.

              .请回答下列与大肠杆菌有关的问题。

              (1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于____它的同化作用类型是____。

              (2)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

              成分

              含量

              蛋白胨

              10.0g

              乳糖

              5.0g

              蔗糖

              5.0g

              K2HPO4

              2.0g

              显色剂

              0.2g

              琼脂

              12.0g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000ml

              根据用途划分该培养基属于______ (选择、鉴别)培养基。该培养基中的碳源是_____。

              (3)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行____ (消毒、灭菌)操作者的双手需要进行清洗和_______。静止空气中的细茵可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能_______。培养大肠杆菌时,常用的接种方法是平板划线法和__________________。通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培弃基应采用的检测方法是______________ 。若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。

              (4)以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________

              A、制作果酒     B、由果酒制作果醋    C、制作泡菜    D、制作腐乳

              (5)利用培养基不仅可以分离培养微生物,也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中,也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作,原因是_________

            • 3. 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从赤峰市克旗热泉(出口水温达87℃)中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示。请回答下列问题:


              (1)Ⅰ号培养基中应加入     ,以便挑选出能产生高温淀粉酶的嗜热菌。从Ⅰ号培养基中挑选     菌落接种到Ⅱ号培养基中。

              (2)②过程所使用的接种方法是      。如果不经过①过程,直接将采集的样品进行接种培养,可能出现的结果是      

              (3)Ⅰ、Ⅱ号培养基中接种菌种后,应该置于     的恒温培养箱中培养,培养皿要倒置的原因是     

              (4)在高温淀粉酶运用到工业生产前,需对该酶的最佳温度范围进行测定。下图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性,由此得到的数据为酶的热稳定性数据,如曲线②。根据实验结果分析:80℃并不是该酶使用的最佳温度,原因      。曲线②35℃数据点是在     ℃时测得的。

            • 4.

              自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离出这种酵母菌,操作如下:


              (1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作,待平板冷凝后要将平板倒置的主要原因是___________,获得纯净培养物的关键是________________。


              (2)纯化菌株时,用接种环在第二次及以后划线时,总是从上次的末端开始划线,这样做的目的是__________________________。


              (3)若要检测土样中的酵母菌数量,应采用___________法,该方法测得的细菌数一般比实际结果要低,原因是________________________;统计菌落数目时选取菌落数稳定时的记录作为结果,这样可以防止____________________ ;在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间,这样做的目的是_______________。


              (4)若想获得纤维素分解菌,常用的筛选方法是_______,即通过是否产生_______来筛选,在稀释涂布平板之前常通过选择培养来___________ 。

            • 5. (每空2分,共18分)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题:

              (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以 ________________为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于___________培养基。

              (2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,这两种方法的共性都是将_______________________________________,从而能在培养基表面_______________________________________。

              (3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力_________。

              (4)通常情况下,在微生物培养过程中实验室常用___________法对培养皿等进行灭菌、____________________法对培养基进行灭菌。无菌技术要求实验操作应在酒精灯                __________附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。

              (5)实验室培养微生物过程中,对于不再使用的菌液或培养基要经过_______处理后,才能进行清洗。

            • 6.

              羧甲基纤维素钠(CMC)是常用的食品添加剂,不能被人体消化吸收,因此通常被认为是安全的食品添加剂.研究者用含1.0%CMC无菌水作为饮用水,连续饲喂实验小鼠12周,测定小鼠体重,结果如图1、图2所示.

              (1)图1所示实验中的对照处理是 ______ .图1结果显示,食用CMC能够 ______ .综合图1、图2结果,通过比较 ______ ,说明CMC的这种作用依赖于小鼠消化道内的各种微生物.
              (2)有人提出:小鼠摄入的CMC改变了其肠道内各种微生物的比例.为检验上述推测,研究者设计了如下实验:
              ①搜集 ______ (填图中分组编号)小鼠粪便制成悬浮液涂布于 ______ 上(填下列选项前的序号).
              a.以CMC为碳源的液体培养基   b.全营养液体培养基
              c.以CMC为碳源的固体培养基         d.全营养固体培养基
              ②接种后置于 ______ (填“无氧”或“有氧”)条件下培养,通过观察 ______ 以初步鉴定小鼠消化道中的微生物类群.
              ③统计比较 ______ ,以确定推测是否成立.
              (3)为进一步研究“小鼠体重变化是否由CMC引起的小鼠消化道内各种微生物比例改变所致”,研究者设计了粪便移植实验,并检测了被移植小鼠体重的变化.请将下列选项填入下表中(选填选项前的符号),完成实验方案.

              a.普通小鼠                    b.无菌小鼠
              c.饲喂含CMC无菌水12周的普通小鼠   d.饲喂无菌水12周的普通小鼠
              e.含1.0%CMC的无菌水           f.无菌水(不含CMC)

            • 7.

              从家庭少量制作到工厂大规模生产,人类利用微生物发酵酿酒的历史很悠久。虽然酵母菌对酒精有一定的耐受性,但在发酵过程中,产生的酒精达到一定浓度时,会对酵母产生毒性,抑制其生长和发酵,从而影响酒精产量。因此,工业化的生产需要选育酒精耐受性强的高产酵母。请回答下列相关问题。

              (1)家庭酿制米酒时,将米饭与酒曲混合装坛约2/3空间后加盖。向坛盖边沿的水槽中注满水,使坛子密封。开始时坛盖边沿的水中无气泡冒出,一段时间后才有气泡缓慢冒出,这是因为坛中微生物细胞内先后进行了____________和____________。

              (2)某工厂使用普通酵母菌种酿制米酒,醪液中酒精体积分数较低,至多为7%~9 %。现尝试从该米酒醪液中获得酒精耐受型酵母(耐受12%~16%酒精)。

                 第一步:取醪液,接种于经过____________灭菌,且必须含有____________的酵母培养液中,在适温下培养一段时间。

              第二步:取____________,接种于酵母培养基固体培养基上培养。待长出菌落后,挑取具有典型酵母菌菌落特征的单菌落,通过____________法,进一步纯化。

              (3)若要鉴定选出的酒精耐受型酵母是否高产,请简要写出实验设计思路:

                  _______________________________________________________________________。

            • 8. 纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,下列是关于分离土壤中能够分解纤维素的微生物的相关问题,请回答:
              (1)自然界中纤维素含量最高的天然产物是    .某些微生物能分解纤维素,因为他们能产生纤维素酶,纤维素酶至少包括三种组分,即    
              (2)实验室中筛选微生物的原理是    .筛选纤维素分解菌应先将从土壤中获得的微生物,在以纤维素为唯一碳源的    (填“固体”或“液体”)培养基上进行选择培养,选择培养的目的是    
              (3)用刚果红染色法对分离出的微生物进行筛选,刚果红可以与纤维素形成    ,当纤维素被纤维素酶分解后,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的    .从培养基的用途上分类,刚果红培养基属于    培养基.
            • 9. 植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解,回答下列问题:
              (1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶.其中的葡萄糖苷酶可将    分解成    
              (2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成    色复合物.用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的    
              (3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
              酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液
              培养基甲++++-++
              培养基乙+++-+++
              注:“+”表示有,“-”表示无.
              据表判断,培养基甲    (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是    ;培养基乙    (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是    
            • 10.

              请回答下列有关微生物的一些问题。

              (1)微生物的消毒和灭菌:在微生物培养中,对培养基常用               法进行灭菌;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,原因是紫外线能使              变性,还能损伤DNA的结构。如果要检测培养基灭菌是否彻底,可以采用的方法是                       观察培养基上是否有菌落产生。

              (2)微生物的应用:在葡萄酒的自然发酵过程中,运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精,请写出该过程的化学反应式:                    。在果醋制作时,运用醋酸菌在          和糖源充足时,将葡萄糖分解成醋酸。

              (3)微生物的鉴定:为检测尿素分解菌的存在与否,在以尿素为唯一氮源的         (填“选择”或“鉴别”)培养基中加入         指示剂,如果存在尿素分解菌,则指示剂将变          色。

              (4)微生物的接种:微生物的接种方法很多,最常见的是                      

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