[生物——选修1：生物技术实践]

   某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题：

（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了________和________。除此之外，培养基还必须含有基本成分是________和________。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是________。

（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。

（4）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐________细菌，这种培养基被称为________。

【生物一选修1：生物技术实践】

 泡菜是四川人非常喜爱的家常小菜，新鲜的泡菜滤液中含有乳酸菌，可作为实验材料分离纯化乳酸菌。回答下列问题：

 (1)泡菜腌制一段时间后，泡菜坛中的盐水和蔬菜逐渐变酸，原因是                            。腌制过程中，要注意控制腌制的                 等条件，以防止亚硝酸盐的含量过高。

 (2)分离纯化乳酸菌时，需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，这样做的目的是                                          。稀释后的泡菜滤液可用        法使菌液均匀接种在培养基表面，接种的全过程都应在           附近进行。

 (3)固体培养基会因加入适量碳酸钙后而不透明，但乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。纯化乳酸菌时应该挑取生长在平板          （选填表面或中下层）且周围出现                的菌落进一步分离。

[生物——选修1：生物技术实践]该模块暂不命题。

[生物——选修1生物技术实践]

请回答下列与微生物培养相关的问题：

（1）土壤中具有分解尿素的细菌，此类细菌能产生________酶，该酶能将尿素分解成____________。

（2）某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000ml，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中能分解尿素的细菌？__________（填“能”或“不能”），原因是____________

（3）某小组采用平板划线法分离某样品的细菌时，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是_______________________________。使用稀释涂布平板法检测土样中细菌含量时，在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养一段时间，这样做的目的是___________。

（4）在分离尿素分解菌的实验中，大部分同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而有一个同学从培养基上筛选出大约150个菌落，这种实验结果差异产生的原因可能是______________、_____________。

请回答下列与大肠杆菌有关的问题：

（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于            ；它的同化作用类型是           。

（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

根据用途划分该培养基属于         培养基（选择、鉴别）。该培养基中的碳源是             ，氮源是               。

（3）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是              和               。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行             。

（4）现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释10³稀释度。各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为           。

（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是                                            。

（6）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是____________。

A．制作果酒        B．制作果醋    C．制作泡菜         D．制作腐乳

牛的食物主要是草茎类，其中含有大量的纤维素。牛胃内的微生物，在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性的作用。回答下列问题：

（1）纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，组成纤维素的单体为________。牛胃中某些微生物能够产生纤维素酶，这种酶是一种复合酶，其中的________能使纤维素分解成纤维二糖。

（2）实验室培养牛胃内的微生物，分离得到高纯度纤维素分解菌的关键环节是________。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在________附近进行；倒平板用的培养皿需要保持干燥，可以采用________法进行灭菌。

（3）为了从牛胃的食糜中分离出纤维素分解菌，配制的选择培养基要以________作为唯一碳源。筛选纤维素分解菌时，常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是________。在涂布平板时滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，原因是________。

下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

（1）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是_______________，因此需对培养基和培养皿进行_______，操作者的双手需要进行清洗和消毒。

（2）根据用途划分，该培养基属于_______培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中__________换成尿素，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成__________。

（3）若要统计大肠杆菌活菌数目，常用的方法是____________。统计结果往往比实际值偏___。原因是___________________________________。

金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起食物中毒、肺炎、肠炎等。某研究小组的同学用所学的微生物的实验室培养的方法进行“变质牛奶中金黄色葡萄球菌的分离和计数实验”，部分实验处理和结果如下图。（注:培养皿旁的数字代表菌落数目；实验室条件满足金黄色葡萄球菌的生长繁殖；实验操作规范；实验过程严格做好各项防护防扩散等工作）

请回答相关问题

（1）在实验室培养微生物，获得纯净培养物的关键是                    。

（2）据图，研究小组采用的是_______法分离和计数金黄色葡萄球菌。由样品到4号试管的操作中，第一步，将分别盛有9mL生理盐水的4支试管______，并编号1—4号；第二步，用移液管从样品中吸取1mL牛奶，注入1号试管中，充分摇匀；第三步，重复第二步骤操作，以此类推，4号试管的稀释倍数是_____。

（3）资料显示，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10%—15%NaCL的肉汤中生长;本实验可配制含10%氯化钠的培养基，使之成为_______培养基，以利金黄色葡萄球菌的生长，抑制或阻止其他微生物的生长

（4）通过观察菌落特征可区分不同种类微生物，这些特征包括菌落的________、     、     和     等方面；在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，以保证计数结果准确。据图可得出1mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为_____。

【生物—选修1：生物技术实践】

回答下列与微生物发酵、培养以及应用相关的问题：

(1)苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用 

              来检验。

(2)严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件不包括   。

 A.温度控制          B.溶氧控制        C．pH控制       D.酶的控制

(3)苹果酒在      的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是                  

(4)腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是           。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于           。

(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加               。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是                                             。

微生物连续培养时，一部分旧的培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜培养基流入以保证微生物对营养物质的需要。研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到葡萄糖含量受到限制的培养基中，连续培养多代，然后取样分析其中存在的新菌株。请回答下列问题：

（1）用于连续培养JA122大肠杆菌的培养基从物理性质看属于                  。培养基中除了含葡萄糖作为             外，还应该含有                            。

（2）样品中共发现CV101、CV103、CV116三种新菌株，产生新菌株的原因是由于JA122大肠杆菌发生了

                      导致的，产生三种不同类型的新菌株说明         。

（3）下图表示将CV101、CV103、CV116三种新菌株混合在一起培养的生长情况，三者之间互为竞争关系，并保持稳定生长水平，没有出现一种菌株生存而另外两种菌株灭绝的现象，说明它们已经具有了不同的适应能力，这是              的结果。

（4）对三种菌株的代谢差异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐。进一步研究表明，CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长，据此作出的推测是：                   。请设计并完成下列实验步骤，来验证你的观点。

①配制                    的固体培养基（A组);和不含碳源的固体培养基（B组）；

②将等量的适量稀释的CV101菌液分别接种到A、B培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况。实验过程应在          条件下进行。

③预期实验结果：                                               。