微生物与基因工程:
以下是以大肠杆菌为材料的实验.下表是大肠杆菌培养基的配方.
成分 | 蛋白胨 | 牛肉膏 | NaCl | 蒸馏水 | pH |
含量 | 10g | 5g | 10g | 1000ml | 7.0 |
(1)表中各项成分中,能承担生长因子作用的是 ______ 能提供氮源的是 ______
利用转基因技术可以生产出更多廉价的胰岛素.如图为转基因实验过程示意图,其中中数字表示相应过程.
天然大肠杆菌质粒一般含有lacZ基因而不含氨苄青霉素抗性基因;人工合成的大肠杆菌puc118质粒中含有lacZ基因外,还含有含氨苄青霉素抗性基因.
若lacZ基因完整,便可表达出β-半乳糖苷酶,β-半乳糖苷酶能将培养基中含有的IPTG和X-gal水解成蓝色,形成蓝色菌落圈;若lacZ基因中插入了外源基因,带有puc118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶,将形成白色菌落.此实验方法可以用于鉴别转基因实验是否获得成功.
(2)目的基因是 ______
(3)过程①②一般需要能产生 ______ 的限制性内切酶;过程③④需要 ______ 酶
(4)用于目的基因受体的大肠杆菌质粒应选择不含氨苄青霉素抗性基因,原因是 ______
(5)图中的培养基中除含有大肠杆菌必需营养成分外,还应加入 ______ 等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌.
(6)将上述处理后的大肠杆菌置于图中培养皿内培养,为保证获得单个菌落,常用的接种方法是 ______
(7)以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒.培养一段时间后出现三种类型:菌落处有蓝色、菌落处有白色、菌落不能生长.
成功导入重组质粒的菌落圈的表现是 ______
那些在培养基中不能生长的原因是 ______ .