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            • 1.

              李斯特菌广泛存在于各类食品中,李斯特菌在李斯特菌显色培养基上培育时菌落会呈现蓝绿色。在目前发现的16种李斯特菌中单增李斯特菌是唯一对人有致病性的一种,与其他李斯特菌相比,单增李斯特菌还能合成并分泌磷脂水解酶,使培养基中的磷脂被分解而在单增李斯特菌菌落周围出现白色晕环。

              (1)与单增李斯特菌相比,其他李斯特菌不能合成并分泌磷脂水解酶的根本原因是_____________________。

              (2)现要检测某食品中是否含有其他李斯特菌和单增李斯特菌,进行了相关实验:

              ①将该食品样品加入经___________灭菌的李斯特菌选择培养液中培养,培养的目的是_________________。

              ②将经过培养的菌液接种到鉴定李斯特菌的培养基上,常用的接种方法有___________________。鉴定李斯特菌的培养与李斯特菌选择培养液相比,还需额外添加显色剂、__________和__________。

              ③将接种后的培养基置于适宜条件下进行培养。一段时间后若培养基上出现___________的菌落,则说明该食品中含有单增李斯特菌。

            • 2.

              [生物一一选修1:生物技术实践]

                  腐乳又称豆腐乳,是中国流传数千年的特色传统民间美食,因其口感好、营养高,闻起来臭、吃起来香而深受中国老百姓及东南亚地区人民的喜爱,是一道经久不衰的美味佳肴。请回答下列有关问题:

              (1)毛霉是腐乳发酵中起主要作用的微生物,是甶于其体内存在的_____ 酶可将豆腐中的大分子有机物分解为小分子有机物,从而提高其营养价值和风味。腐乳在制作时可通过____的措施来抑制微生物生长,从而防止腐乳腐败变质。

              (2) 毛霉与泡菜制作所需的微生物新陈代谢的区别是________。

              (3)以前家庭生产腐乳利用的是空气中的毛霉孢子,现在工厂生产需要优良的毛霉菌种,故此需要对毛霉进行分离。对毛霉进行分离的培养基中应含有的基本成分除了水、无机盐外,还应有____。为了将毛霉从细菌中分离出来,应在培养基中添加_______ ,对毛霉的接种常采用_________法,对培养的微生物可根据__________来判断是否为目的菌。

            • 3. 木聚糖酶系可以将半纤维素(一种多糖)转化为单细胞蛋白和其他有用物质。有些嗜热菌能产生耐热木聚糖酶,在食品工业上具有较高的潜在应用价值。现欲从温泉中分离能分解半纤维素的嗜热菌,并从中筛选木聚糖酶高产菌株,获得耐热木聚糖酶。回答下列问题:
              (1)实验中配制好的培养基灭菌通常使用______________________,牛奶常用巴氏消毒法,该方法的操作是_______________________________。 
              (2)取适量体积的样品涂布在富含__________且其为唯一碳源的固体培养基上,置于恒温培养箱中培养,菌落长出后,挑取单个菌落并进行一系列操作,然后在培养基上用__________法接种培养,进行菌株的__________。最后将得到的菌株接种到__________(填“固体”或“液体”)培养基中富集。 
              (3)将富集后的菌株接种于固体培养基上,待菌落长出后用0.1%的__________染色1h,再用1mol/LNaCl脱色。菌落周围会出现__________,筛选__________的菌落即为木聚糖酶高产菌株。
            • 4. 为了检测抗生素作用,需要做细菌耐药实验。
              (1)为了统计某治病菌活菌数,可用________________法将样本接种于固体培养基表面。该接种方法中的接种工具是________________。
              (2)为了检测致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A  ________________;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该病菌对抗生素B________________;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明________________;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的________________。
              (3)根据(2),抗生素________________抗菌效果最好。

              (4)人类经常使用抗生素,细菌抗药性不断增强是________________的结果。

            • 5.

              皮肤作为人体最大的器官,拥有达1.8m2的表面积,其主要功能是作为物理屏障,保护机体免受外来生物或有毒物质的侵害。同时,皮肤也是人体与外界环境接触的部位,因此常驻有各类微生物,包括细菌、真菌和病毒等。通过微生物培养技术能了解我们皮肤表面的微生物分布情况。回答下列问题:

              (1)微生物生长繁殖所需要的营养物质有碳源、水、_________、_________四大类。由于不同种类微生物的菌落特征表现不同,因此可以利用_________(填“固体”或“液体”)培养基来培养,通过观察菌落特征对微生物进行初步的鉴定和分类。

              (2)有同学通过制备牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养附着在皮肤表面的细菌。制备该培养基的操作步骤是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。在溶化之后、灭菌之前需要调节______;灭菌后,待培养基冷却至______℃左右时,在酒精灯火焰旁倒平板;待平板冷却凝固后,需要将平板____________。

              (3)利用平板划线法分离纯化某细菌的操作中,使用________法对接种环进行灭菌。第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始,目的是____________。

            • 6. 纤维素分解性细菌是能分解纤维素的细菌。这类细菌多见于腐植土中,下面是分离纤维素分解菌的实验流程。

              土壤取样→①→梯度稀释→接种到②→挑选产生透明圈的菌落

              (1)以上实验流程中①是_________,①过程中使用的培养基是___________(液体培养基、固体培养基);②是__________________。

              (2)过程②用到的培养基中加入了一种染料与______形成红色复合物,刚果红染色法有两种,一种是先培养__________,再加入刚果红进行颜色反应;另一种是在________加入刚果红。

              (3)菌落周围出现透明圈说明纤维素分解菌能分泌纤维素酶,该酶是一种复合酶至少包括_____________________,并最终把纤维素分解成______________。

              (4)某实验小组为了研究pH对纤维素分解菌产生的纤维素酶活性的影响,将纤维素分解菌分别接种在pH不同的刚果红—纤维素培养基中,通过观察出现透明圈的最早时间和24h后透明圈直径的大小来判断纤维素酶活性的高低,该实验小组设置了pH分别为6、7、8的三组实验进行观察,得到了如下的实验结果:

              pH

              出现透明圈的最早时间(h)

              24h后透明圈的直径(cm)

              6

              6

              4.42

              7

              10

              3.66

              8

              24

              1.33

              通过上述结果可知,该实验的自变量是_______,因变量是________和____________,纤维素分解菌更适合在偏_______(填“酸”、“碱”或“中”)性环境下生长。

              (5)纤维素酶的测定方法,一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的_________进行定量的测定。

            • 7.

              某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。

              (1)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养主要提供了 ________ 和______。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是_____和水。

              (2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是_______。

              (3)在接种操作过程中,为防止杂菌污染,需对接种空间和操作者的衣着和手等进行________(消毒、灭菌);该小组可采用 ________ 或 ________ (接种方法)检测水样中的细菌含量。在接种前,随机取若干灭菌后的空平板培养基先行培养了一段时间,这样做的目的是检测平板培养基_________是否合格;

              (4)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于恒温培养箱中培养,温度设定在37℃。为明确培养基的灭菌效果和接种中无菌操作的是否规范,使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验。

              (5)培养20小时后,观察到平板上有5种形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有____种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越_______。

              (6)该小组将得到的某菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液的_______的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触,提高培养液中__________的利用率。

              (7)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐_______细菌。

              (8)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。

            • 8. 根据所学知识,回答下列有关生物技术实践的问题:
              (1)葡萄酒的自然发酵过程中,菌种主要来自附着在______的野生酵母菌.如果要从中分离纯化酵母菌,最常用的接种方法是______和______.葡萄酒制作成功与否,经发酵后需用______来检测.若要制作葡萄醋,则需要在______条件下.
              (2)提取玫瑰花精油常采用______法,原理是利用______将其携带出来.
              (3)要鉴定分离得到的微生物,常需要借助生物化学的方法.如在以尿素为唯一碳源的培养基中加入______,可用来鉴定分解尿素的细菌;在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入______,可用来鉴定纤维素分解菌.
            • 9.
              有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染.某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株.回答问题:
              (1)无菌操作是微生物实验中重要的一项技术,下列常用的无菌操作中错误的是 ______ .
              A.用酒精擦拭双手
              B.用氯气消毒水源
              C.实验操作应在酒精灯火焰附近进行
              D.玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭
              (2)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以 ______ 为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于 ______ 培养基.
              (3)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即 ______ 和 ______ .
              (4)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力 ______ .
            • 10. 生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗.科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如图)

              (1)用于生产生物柴油的植物不易挥发,宜选用 ______ ______ 方法从油料作物中提取.
              (2)筛选产脂酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供 ______ ,培养基灭菌采用的最适方法是 ______ 法.
              (3)测定培养液中微生物数量,可选用 ______ 法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测 ______ ,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用 ______ 技术使脂肪能够重复使用.
              (4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的 ______ 技术.
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