8．
柴油是重要的染料油之一，也因泄露与不当排放等造成了严重的环境污染．科研人员从遭受柴油污染的土壤样品中取土样5克，加入含100mL培养基M的锥形瓶中，在30℃条件下震荡培养5天，取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基，按此步骤连续培养5次，分离获得醋酸钙不动杆菌DB（一种柴油降解菌）．利用该菌，科研人员进一步探索其降解柴油的最佳条件，获得实验结果如图．请回答下列问题：
（1）为获得醋酸钙不动杆菌DB，培养基M应以
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为唯一碳源，还要考虑无机盐的
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和比例．
（2）在实验过程中，科研人员30℃条件下震荡培养5天，取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基，按此步骤，连续培养5次的主要目的是
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．
（3）在分离醋酸钙不动杆菌DB操作时，在严格无菌条件下，采用
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（填接种方法）在制备好的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上进行接种，接种完，对接种环进行
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灭菌处理．培养一段时间后，观察、挑取平板上形态、大小和隆起度等一致的
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进行重复培养，直到分离出单一菌株．
（4）据图分析，某地区土壤发生柴油重度污染时，则可以将
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，并添加浓度为
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的表面活性剂，以利于提高对柴油的降解效果．
