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            • 1.

              酵母菌是中学生物实验的常用材料,也是很多发酵食品制作必需的菌种。请回答下列问题:

              (1)酵母菌便于用来研究细胞呼吸的不同方式,原因是            

              (2)如果需要从含有酵母菌、醋酸菌、青霉菌、毛霉等的土壤中分离到较纯的酵母菌,步骤如下:在采集到的土壤中加入           ,搅拌、过滤得到土壤浸出液,取少许土壤浸出液涂布到培养基表面,置于            条件下进行选择培养。

              (3)实验室中制作固定化酵母细胞,配制海藻酸钠溶液时,为了防止海藻酸钠焦糊,最好采用            加热。如果海藻酸钠溶液浓度过低,则制得的凝胶珠颜色偏           ,固定的酵母菌数目偏            

              (4)实验室中用血细胞计数板对培养液中酵母菌进行计数时,为了减少实验误差,采取的措施有            (答两点)。

            • 2.

              酵母菌是高中生物实验中常用的实验材料。以下是某生物兴趣小组以酵母菌为材料开展的相关实验研究装置,请回答以下相关问题:

              (1)选用A、B、C装置探究酵母菌有氧呼吸方式时的装置顺序是       (用字母和箭头表示)。

              (2)利用E装置探究酵母菌呼吸类型,若在实验过程中液滴向左移,(不考虑环境因素的影响)则说明此装置中酵母菌肯定发生了         呼吸。

              (3)选用D装置探究酵母菌种群数量的变化规律。

              ①用D装置培养酵母菌时,通常将橡皮塞换为棉花塞,目的是           

              ②培养后期稀释100倍后按照五点取样法计数,血球计数板(规格为1 mm×1 mm×0.1 mm)的五个中方格中共有酵母菌120个。同时兴趣小组同学取一定量培养液用台盼蓝对酵母进行染色,并取样多次镜检获得结果如下:

               

              第一次

              第二次

              第三次

              未染色酵母菌

              20

              17

              23

              蓝色酵母菌

              4

              3

              5

                 

              则培养液中活酵母菌的密度为              个/mL。

              (4)F是固定化酵母菌的实验装置,F装置中的X溶液是           。制备形成的凝胶珠通常还需置于无菌水中进行清洗,目的是            

              (5)G是利用固定的酵母菌进行发酵的装置,其中的葡萄糖除了作为酵母菌发酵的原料以外,还具有        作用。

            • 3.

              实验人员从环境中分离获得白腐菌,以白腐菌的菌丝或孢子制得固定化白腐菌凝胶颗粒,各取25个两种凝胶颗粒分别处理50 mL染料废水,实验结果如下图1。进一步研究不同数量的凝胶颗粒处理50 mL染料废水结果如图2。据图分析回答:


                                          图1                                                             图2

              (1)从野外采集白腐菌前,先向待采集土壤喷洒适量的染料废水的目的是________。某同学在进行白腐菌分离纯化实验时,划线某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落。造成第一条划线无菌落可能的操作失误是________。将收集到的菌丝或者孢子加入到适量的海藻酸钠溶液中混匀,抽取5 mL混合液,滴加到CaCl2溶液中,该过程中CaCl2溶液的作用是________。

              (2)现要处理100 L皮革生产过程中产生的染料废水。从实验结果分析,应选用________凝胶颗粒,添加________个凝胶颗粒后,保持________天以上,以达到最好的净化效果。

              (3)与向染料废水中直接接种白腐菌相比,在工业生产中使用固定化白腐菌凝胶颗粒的优点主要是________________________________________________________________________。

            • 4.         是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术.细胞个大,多采用    固定化;酶分子很小,更适合采用    和物理吸附法固定化.
            • 5. 为了探索海藻酸钠固定化对绿球藻生长的影响,以及固定化藻对含Zn2+污水的净化作用,科研人员用筛选到的一株绿球藻进行试验,流程及结果如下.请回答下列问题:

              (1)实验中的海藻酸钠作用是    ,CaCl2的作用是    
              (2)为洗去凝胶球上残余的CaCl2和其他污染物,并保持绿球藻活性,宜采用    洗涤.图1中1.0%海藻酸钠组培养24h后,移去凝胶球,溶液呈绿色,原因是    
              (3)为探索固定化藻对含Zn2+污水的净化作用,映选用浓度为    海藻酸钠制备凝胶球.
              (4)图2中空白凝胶球组Zn2+浓度下降的原因是    .结合图1和图2分析,固定化藻的实验组24~48h间Zn2+浓度下降速度较快的主要原因是    ;72~96h间Zn2+浓度下降速度较慢的原因有    
            • 6. 回答下列有关微生物工程的问题.
              乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,具有重要应用价值.乳糖酶的制备及固定化步骤如下:

              (1)表的培养液pH均为7.0,若要筛选微生物L,则不能选择表中的    培养液.(多选)
              培养液乳糖乳糖酶NaNO2牛肉膏K2 HP0KClMgS4O•7H2OFeS04
              A25g/L///1g/L0.5g/L1g/L0.01g/L
              B//3g/L/1g/L0.5g/L1g/L0.01g/L
              C25g/L1ug/L/3g/L1g/L0.5g/L1g/L0.01g/L
              D25g/L/3g/L/1g/L0.5g/L1g/L0.01g/L
              (2)为了获得能产乳糖酶的微生物L的单菌落,可采用    法将初筛菌液接种在固体培养基上.
              (3)扩大培养微生物L时,通过增加营养物质的比例    (可以/不可以)提高种群密度,分析说明原因    
              (4)在乳糖酶提取纯化的过程中,应及时检测    .将酶固定化后,则有利于酶的    

              (5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4在不同温度和pH条件下进行发酵,测得发酵液中酶活性的结果见图,推测菌株    更适合用于发酵,理由是    
            • 7. 如图是制备固定化酵母细胞实验步骤图解,请据图回答:
              酵母细胞活化→配制CaCl2溶液→配置海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞
              (1)在    状态下,微生物处于休眠状态.活化就是让处于休眠状态的微生物恢复    
                  状态.活化前应选择足够大的容器,因为酵母细胞活化时    
              (2)影响实验成败的关键步骤是    
              (3)如果海藻酸钠浓度过低,形成凝胶珠包埋酵母细胞数目    
              (4)观察形成凝胶珠的颜色和形状,如果颜色过浅,说明    
              如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,说明    
              (5)制备固定化酶不宜用包埋法,为什么?    
            • 8. 乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,具有重要应用价值.乳糖酶的制备及固定化步骤如下:

              (1)筛选产乳糖酶的微生物L时,宜用 作为培养基中的唯一碳源.培养基中琼脂的作用是  . 从功能上讲,这种培养基属于 
              (2)培养微生物L前,宜采用 方法对接种环进行灭菌.
              (3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小.在相同条件下,带电荷相同的蛋白质电泳速度越快,说明其分子量越 .
              (4)乳糖酶宜采用化学结合法(共价键结合法)进行固定化,可通过检测固定化乳糖酶的 确定其应用价值.除化学结合法外,酶的固定化方法还包括 、 、离子吸附法及交联法等.
            • 9. 樱桃番茄富含多种天然有机酸、人体必需氨基酸、维生素和多种矿物质,是酿造保健酒的好原料。为了研究固定化酵母的发酵效果,某研究小组进行了两个实验,实验结果分别如下图1和图2所示。请回答下列问题:

              (1)发酵前,需要在樱桃番茄汁中添加适量白砂糖主要目的是      。 主发酵结束后,需将上层酒液转移到另一灭菌容器中进行后发酵,为了防止醋酸菌污染,加入容器中液体的量应      (填“注满”、“2/3”或填“1/3”),以保证果酒品质。

              (2)图1是固定化酵母发酵与游离酵母发酵的对比结果,从图中可以看出,两者发酵速率相近,但发酵前期游离发酵比固定发酵产生的酒精量多,主要原因是      ;后期游离酵母发酵速度减慢,除了底物浓度降低外,还可能是因为      

              (3)为探究固定化酵母重复使用的效果,对固定化酵母进行了2次连续的重复发酵实验,图2是实验的结果,试分析在第2次发酵前期,酵母降糖速度明显加快的原因      。实验结果说明固定化细胞具有      的优点。

              (4)为分离纯化优良酵母菌品种,采用平板划线法进行如下操作,排序最合理的是      (图可以重复使用)。

                 

              ①        ②            ③          ④

            • 10. 生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗.科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如图)

              (1)用于生产物柴油的植物没不易挥发,宜选用 ______ ______ 方法从油料作物中提取.
              (2)筛选产脂酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供 ______ ,培养基灭菌采用的最适方法是 ______ 法.
              (3)测定培养液中微生物数量,可选用 ______ 法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测 ______ ,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用 ______ 技术使脂肪能够重复使用.
              (4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的 ______ 技术.
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