固定化产酯酵母可以利用酱油中的部分糖产生酒精和乙酸乙酯等呈味物质，提高了低盐固态工艺酱油的品质。下面是科研人员的试验过程和结果：

  试验步骤：

    ①将冰箱中4℃保存的菌种接种在麦芽汁培养基中，30℃恒温培养3d。

    ②称取一定量的海藻酸钠加入水中，加热溶化，配成3%的海藻酸钠溶液。

    ③将溶化好的海藻酸钠溶液放置一段时间后，加入产酯酵母，进行充分搅拌，混合均匀。

    ④用lOmL的针筒吸取混合液滴于4%的氯化钙溶液中，形成凝胶珠。待凝胶珠在氯化钙溶液中浸泡30min后取出，用蒸馏水冲洗3次，备用。

    ⑤配制不同葡萄糖添加量的酱油，分别加入等量的固定化产酯酵母，在适宜条件下发酵一 段时间后，测定酱油中酒精和乙酸乙酯的含量。

实验结果:

  请回答：

 (1)步骤①的目的是______。麦芽汁培养基能为产酯酵母提供水、_______、_______和无机盐等。步骤②中加热的方法是_______________。

  (2)步骤③中需将溶化好的海藻酸钠溶液放置一段时间，其目的是_____________________________ 。

  (3)该试验结果表明________________________________________________________ 。

  (4)在传统酱油生产过程中，需向发酵液中添加一定量的食盐。若添加量过低，会________；若添加量过高，会________ 。

图1图2

(1) 实验中的海藻酸钠作用是_____,CaCl₂的作用是_。 

(2) 为洗去凝胶球上残余的CaCl₂和其他污染物,并保持绿球藻活性,宜采用____洗涤。图1 中1.0%海藻酸钠组培养24 h 后,移去凝胶球,溶液呈绿色,原因是________________。 

(3) 为探索固定化藻对含Zn²⁺污水的净化作用,应选用浓度为____海藻酸钠制备凝胶球。 

(4) 图2中空白凝胶球组Zn²⁺浓度下降的原因是______。结合图1和图2分析,固定化藻的实验组2448h间Zn²⁺浓度下降速度较快的主要原因是______________;7296h间Zn²⁺浓度下降速度较慢的原因有___________________。 

玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用___________法或____法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的__________催化。PCR技术一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______和_______三步。

【生物－选修1：生物技术实践】

现在大力提倡无纸化办公，但是每年仍然不可避免的产生了大量废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。下图是工业上利用微生物将纤维素

（1）上述工作流程中①环节需要的微生物大多分布在＿＿＿＿＿＿的环境中。在分离分解纤维素的微生物时，土壤取样后，通过选择培养可以＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，在筛选①环节需要的微生物时，可采用＿＿＿＿＿＿（方法），通过＿＿＿＿＿＿直接对微生物进行筛选。

（2）可利用＿＿＿＿＿＿技术，使②中的酶能够重复利用。

（3）生产中可以满足④环节的常见菌种是＿＿＿＿＿＿，④过程要注意对接种器材进行＿＿＿＿＿＿。为了确保⑤环节成功，后期要注意发酵装置＿＿＿＿＿＿。

【生物——选修1：生物技术实践】

某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。

请回答：

(1)图中用KMnO₄溶液浸泡苹果的目的是________。黑曲霉提取液中含有的________可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过________方式将酶固定化，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去________。

(2)实验中，操作流程A和B的先后顺序为________。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是________。要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的________混合，如果出现________现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调________。

(3)实验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被________使用。

某生物兴趣小组以酵母菌为材料开展了相关实验，装置如下，请回答以下问题：

(1)酵母菌是一种单细胞真菌，在有氧和无氧的条件下都能生存，属于           菌。图中选用A、B、C装置探究酵母菌有氧呼吸方式时的装置顺序是                       。(用字母和箭头表示)

(2)利用E装置探究酵母菌呼吸类型，若在实验过程中液滴向左移，(不考虑环境因素的影响)则说明此装置中酵母菌肯定发生了                  呼吸。

(3)选用D装置探究酵母菌种群数量的变化规律。

①用D装置培养酵母菌时，通常将橡皮塞换为棉花塞，目的是_______________      _。

②培养后期稀释100倍后按照五点取样法计数，血球计数板(规格为1mm×1mm×0.1 mm)的五个中方格中共有酵母菌120个。同时兴趣小组同学取一定量培养液用台盼蓝对酵母进行染色，并取样多次镜检获得结果如下：

则培养液中活酵母菌的密度为________个/毫升。

(4)F是固定化酵母菌的实验装置，F装置中的X溶液是________。制备形成的凝胶球通常还需置于无菌水中进行清洗，目的是________________。

(5)G是利用固定的酵母菌进行发酵的装置，其中的葡萄糖除了作为酵母菌发酵的原料以外，还具有____________________________作用。

(1) 海藻酸钠能作为固定载体的特点是  ▲  ，在联合固定果胶酶和酵母菌之前，对海藻酸钠所作的操作是配制一定浓度的海藻酸钠溶液，用  ▲  的方法溶化海藻酸钠，然后再  ▲  。

(2)果胶酶在果汁生产中具有重要的作用，把果胶酶和酵母菌固定在一起生产红葡萄酒的重要意义在于  ▲  。

(3)果胶酶通常先与戊二醛交联，然后与活化的酵母菌一起用海藻酸钠包埋固定，这是因为  ▲  。

(4) 在初级发酵时一般温度控制在  ▲  ，在发酵过程中，尤其要随时监控和调整发酵罐中的温度和pH，使其在适宜的范围内波动，其主要目的是  ▲  。

回答下列（一）、（二）小题：

(一）请回答与“固定化酶”实验有关的问题：

（1）—淀粉酶可以通过培养枯草杆菌来生产，         是筛选高表达量菌株的最简便方法之一。筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用          培养基进行扩大培养。

(2)利用物理或化学的方法将—淀粉酶固定后，成为     且又有酶活性的制剂。若用吸附法固定时，在装柱后需要用     缓慢冲洗，直至流出液不使淀粉-碘混合液发生      为止。

(3)将淀粉溶液以一定流速从反应柱上端滴入，再在下端接取少量流出液进行KI-I₂颜色测试，结果不呈现红色。对此现象的解释错误的是        

  A.反应柱中没有—淀粉酶被固定      B.流速过快淀粉未被水解    

  C.接取的流出液是蒸馏水              D.流速过慢淀粉被水解成葡萄糖

(二）欲利用基因工程技术将人胰岛素基因转入到小鼠基因组中，以期利用小鼠生产出人胰岛素，请回答：

(1)若用逆转录的方法获得人胰岛素基因，则需要从人体相应的       细胞中提取mRNA，获得的人胰岛素基因经过相应处理后，再利用显微注射技术将其注入到受体细胞中，下列最不适合作为受体细胞的是        

 A.受精卵     B.胚胎干细胞     C.第一次卵裂形成的细胞    D.第三次卵裂形成的细胞

(2)为获得更多的受体细胞，可先对成年雌鼠注射激素进行         处理,将获得的卵母细胞培养成熟，与经        处理的精子结合形成受精卵后再进行后期操作。

(3)导入胰岛素基因的受体细胞还需借助        、        等技术才能成为转基因小鼠。