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            • 1． 当今社会大力提倡无纸化办公，但是每年仍然不可避免地产生大量废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新型能源-乙醇．如图是工业上利用微生物分解纤维素生产乙醇的基本操作流程．请回答相关问题：

              （1）图中①环节所需的微生物大多分布在富含    的土壤中，筛选该微生物的方法常用    ，为了筛选出较为“浓缩”的该种微生物，常用    （填“选择”或“鉴别”）培养基．
              （2）图中②环节获得的酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种成分，即C1酶、Cx酶和    ，前两种酶将纤维素分解成    ．
              （3）④过程要注意对接种器材进行    ，⑤环节利用的微生物是    ，在产生酒精的过程中发酵装置必须保持    ．
              难度：中等
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            • 2． 玉米（2N=20）是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油等产品．下面图甲表示玉米深加工流程，图乙表示为了获得玉米新品种常采用的一种育种方式，请回答下列问题．
              （1）玉米秸秆中的纤维素在纤维素酶的作用下最终被水解成葡萄糖才能供给酵母菌利用，纤维素酶是由3种组分组成的复合酶，其中的    可将纤维二糖分解成葡萄糖．纤维素分解菌能合成纤维素酶，人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌．分离纤维素分解菌常用的方法是    ；其实验流程是：土壤取样→选择培养→    →将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落．
              （2）使用选择培养基从土壤中分离纤维素分解菌，对培养基的要求是    ．如果还要对土壤中该类微生物进行计数，则接种方法是    ．
              （3）玉米胚芽油不易挥发，宜选用压榨法或    法从玉米胚芽中提取．
              （4）在育种过程中，若改变图乙‚过程所使用的培养基中的    ，则可能不会形成愈伤组织，而是形成胚状体．若愈伤组织没有形成根，但分化了芽，其原因可能是    ．
              难度：中等
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            • 3． 下列关于应用生物技术获得生物产品的过程，请回答下列问题：
              （1）酿酒时某同学尝试用罐头瓶制作果酒，在培养过程中，每隔12h左右将瓶盖拧松一次，此后再拧紧，这样做的主要目的，一是    ，二是避免氧气进入和杂菌污染．在酸性条件下，可用    来检测果酒发酵是否成功．如下图是采用纯化酵母菌培养的两种接种方法接种后培养的效果图．

              判断图A所用接种方法的依据是    ，图B的接种方法是    
              （2）大量扩增DNA时可用PCR技术，该技术利用了DNA的    原理，通过控制    来控制双链的解聚与结合．PCR扩增得到的DNA序列长度是固定的，原因是    ．
              （3）玫瑰在人们生活中具有多种用途．某同学在进行玫瑰组织培养时，可以选取生长旺盛的嫩枝做    ，并要进行    处理．
              （4）在玫瑰精油的提取实验中用    （方法）提取，收集的乳浊液水油分层，需向其中加入    ． 要除去分液得到的油层中的水分，还需向其中加入无水    ．
              难度：中等
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            • 4． 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性．研究者从热泉嗜热菌样品中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示：

              （1）进行①过程的目的是    ，②过程所使用的接种方法是    法．
              （2）从用途上来说，Ⅰ号培养基属于    培养基，配制时仅以    作为唯一碳源；从物理状态上来说，Ⅱ号培养基属于固体培养基，配制时应加入    作为凝固剂．
              （3）Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是    ．一般对配制的培养基采用    法灭菌．
              （4）培养一段时间后，应从Ⅰ号培养基上挑出    的菌落，接种到Ⅱ号培养基上．
              难度：中等
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            • 5． 有机化工原料氯苯不易降解，会污染环境，现欲从土壤中分离高效降解氯苯的微生物．回答下列问题：
              （1）为了获得能降解氯苯的微生物，可在被氯苯污染的土壤中取样，并应选用以    为碳源的培养液进行选择培养．除碳源外，培养液还应含有    、无机盐和蒸馏水等．
              （2）将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在1L含20mg氯苯的相同培养液中培养（其它营养物质充裕、条件适宜观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为33小时、15小时、46小时，则应选择微生物    作为菌种进行后续培养．
              （3）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可以在显微镜下用    直接计数，也可选用    法统计活菌数目，一般前者得到的结果    （填“＞”、“＜”、或“=”）后者．
              （4）对选定的菌种进行细胞学检测，发现它没有具膜的细胞器，则该菌种属于    （填“原核”或“真核”）生物，其产生的降解氯苯的酶蛋白是在     上合成．
              难度：中等
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            • 6． 纤维素酶在生物燃料制作、布料处理中起重要作用．目前，利用微生物提高纤维素酶产量是主要发展方向．如图1，用紫外线照射含有纤维素分解菌的土样，分离、培养，再检测各菌株的纤维素酶的产生量．请回答下列相关问题：

              （1）从自然界获取纤维素分解菌，采集土样时应选择    的环境．
              （2）紫外线照射的目的是    ，A0组未经紫外线处理，其作用是作为    
              （3）经高压灭菌锅灭菌的培养基，需要冷却后才能用来倒平板．常用于估计培养基已冷却到50℃左右的简便方法为    ．
              （4）上述培养皿中的培养基除含有水和无机盐、酵母膏、水解酪素、琼脂等外，还应有    ，目的是选择纤维素分解菌．
              （5）上述检测结果如图2所示．由图可知，    组酶活力与Ao组相同，最可能的原因是    ．
              （6）若用刚果红染色法比较纤维素分解菌产生纤维素酶的量的多少，可通过观察平板培养基上以纤维素分解菌为中心的透明环（如图3）来比较．其中与A1对应的是图中的    ．
              （7）若要保证上右图透明圈中均为单个细胞形成的菌落，操作要求是    ．
              难度：中等
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            • 7． 研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示．

              （1）柚皮易焦糊，宜采用    法提取柚皮精油，新鲜的橘皮要用    浸泡处理，该过程得到的糊状液体可通过    除去其中的固体杂质．
              （2）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供    ．电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度    ．
              （3）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈．可通过测定透明圈的    来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果．
              （4）橘皮油也可用萃取法来提取，原因是    ．分析图，提高萃取效果的方法是    、    ．
              难度：中等
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            • 8． 将醋酸菌突变体中与耐酸有关的ALDH基因导入优良醋酸菌中，选育出高发酵速率、耐酸的醋酸菌，用于果醋生产．
              请分析回答下列问题：

              （1）对含有ALDH基因的DNA与质粒用同种限制酶切割后，通过     酶连接形成重组质粒． 为获得耐酸的醋酸菌，用     法接种于含高浓度醋酸的培养基进行筛选．将筛选     纯化的菌种用 的方法长期保存．
              （2）图1表示温度尧乙醇浓度对该醋酸菌产酸量的影响．
              ①醋酸菌能将乙醇转变为    ，再将其转变为醋酸．
              ②研究不同酒精浓度下的最高产酸量时，最好把温度控制为    ℃，如温度过高，醋酸菌代谢缓慢甚至死亡，原因是    ．
              ③酒精发酵后通过出料口检测酒精浓度，将发酵液中酒精浓度调节到     左右     才接种醋酸菌，较高的酒精浓度会使产酸量下降，不适宜接种，原因是    ．
              （3）为检测发酵过程中醋酸菌数量，将1mL发酵液稀释100倍后，分别取0.1mL稀释菌液均匀 涂布在4个平板上曰经适当培养后，4个平板上的菌落数分别为24、139、140、141，据此可得出每毫升发酵液中的活菌数为    个/mL．
              难度：中等
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            • 9． 酿酒过程中若操作不慎，所酿的酒可能变酸．分析回答：
              （1）酿酒所需的微生物是    ，产生的酒精可以与     （试剂）发生显色反应．
              （2）在变酸的酒的表面观察到的菌膜是    在液面大量繁殖而形成的．若要对该菌进行初步分离纯化，比较便捷的操作是：采用    法（填“平板划线”或“稀释涂布平板”）把它们接种到    （填“固体”或“液体”）培养基上，经培养得到肉眼可见的    ．
              （3）实验室中常用    法对培养基及器皿进行灭菌．不同培养基的具体配方不同，但一般都含有水、    、    和无机盐．
              难度：较难
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            • 10． 1中含有链霉素，其它培养基中不含链霉素．请据实验回答：

              （1）将原始对链霉素敏感大肠杆菌K12菌种涂布在培养皿1的表面培养，接着通过右图“印章”将培养皿1中的菌群“印”在培养皿2、3上培养．“印章”位置保持不变．培养皿2、3根据其功能，分别称为    培养基、    培养基．
              （2）培养基3的A点处有菌落生长，将培养基2中相应的A点位置的菌落上挑出少量移入培养基4中．如图反复几次实验．请根据实验现象解释“微生物的突变是自发的还是环境因素导致的”：    ．
              （3）要分离出单个菌落，除了本实验中的涂布法外，还可以用    法．
              （4）上述不含链霉素培养基通常使用的是    ，下表是另一种培养基配方，该培养基具有    作用．
              成分KH2PO4Na2PO4MgSO4•7H2O葡萄糖尿素琼脂
              含量1.4g2.1g0.2g0.0g1.0g15.0g
              （5）现有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响，结果如下表所示．根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是    ．
              物质
              突变体              		培养基中加入的物质
              ABCDEF
              1---+-+
              2-+-+-+
              3-----+
              4-+++-+
              5++++-+
              难度：较难
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