为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每毫升水样中的活菌数为________。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。制备培养基前，培养皿最好通过________灭菌。操作时，接种环最好通过________灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是________________。

（3）示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种水样培养后得到的结果。

（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的________的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。

(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用______________或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是______________________。

(2)培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供________和________。

(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和________以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用________方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是__________________。

(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为____________。

皮肤作为人体最大的器官，拥有达1.8m²的表面积，其主要功能是作为物理屏障，保护机体免受外来生物或有毒物质的侵害。同时，皮肤也是人体与外界环境接触的部位，因此常驻有各类微生物，包括细菌、真菌和病毒等。通过微生物培养技术能了解我们皮肤表面的微生物分布情况。回答下列问题：

(1)微生物生长繁殖所需要的营养物质有碳源、水、_________、_________四大类。由于不同种类微生物的菌落特征表现不同，因此可以利用_________（填“固体”或“液体”）培养基来培养，通过观察菌落特征对微生物进行初步的鉴定和分类。

(2)有同学通过制备牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养附着在皮肤表面的细菌。制备该培养基的操作步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。在溶化之后、灭菌之前需要调节______；灭菌后，待培养基冷却至______℃左右时，在酒精灯火焰旁倒平板；待平板冷却凝固后，需要将平板____________。

(3)利用平板划线法分离纯化某细菌的操作中，使用________法对接种环进行灭菌。第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，目的是____________。

有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株．回答问题：

实验室通常需要对目的菌种进行纯化。回答以下关于微生物实验室培养的有关问题。

（1）获得纯净培养物的关键________________________。在无菌技术中，对操作者用酒精擦拭双手属于________，对金属用具、玻璃器皿、培养基等要进行灭菌，其中，培养基只能用__________灭菌。

(2)通常在某一环境中微生物有多种并混合在一起，若要对某种微生物进行纯化，最常用的方法是平板划线法和__________________。使用平板划线法时，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是______________________。

（3）制备培养基的操作步骤是_____________________。（用下列字母排序）

a．倒平板 b．计算     c．溶化      d．称量     e．灭菌

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养主要提供了 ________ 和______。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_____和水。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_______。

（3）在接种操作过程中，为防止杂菌污染，需对接种空间和操作者的衣着和手等进行________（消毒、灭菌）；该小组可采用 ________ 或 ________ (接种方法)检测水样中的细菌含量。在接种前，随机取若干灭菌后的空平板培养基先行培养了一段时间，这样做的目的是检测平板培养基_________是否合格；

（4）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于恒温培养箱中培养，温度设定在37℃。为明确培养基的灭菌效果和接种中无菌操作的是否规范，使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验。

（5）培养20小时后，观察到平板上有5种形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有____种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______。

（6）该小组将得到的某菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的_______的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高培养液中__________的利用率。

（7）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_______细菌。

（8）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施,请回答下列与检验饮用水有关的问题:

(1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,记录菌落数量,这种方法称为 。下面四种菌落分布图中,不可能是由该方法得到的是            。

(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组? 。为什么? 。

(3)如果各取0.1 mL已稀释10³倍的水样分别涂布到3个琼脂固体培养基的表面进行培养,培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57,则每升原水样中大肠杆菌数为 。

(4)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气,现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管,应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌?  。

根据从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤，回答有关问题：

(1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化.培养噬盐菌的菌样应从       环境采集。

(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其群落中的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温纤维素酶微生物的富集培养应选择____________的培养基，并在_____________条件下培养。

(3)接种前要对培养基进行______________________处理。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在__________________条件下进行。

(4)下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。获得图A效果的接种方法是__________，图B效果的接种方法是___________。一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是____________________________。

(5)如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是____________，应该保持___________________等不变(至少答两项)。

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以__________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和____________。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_________________。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_______和__________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯___________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

在农业用地中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物 )在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度一定，该除草剂的培养基不透明)。

(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行________处理。

(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，上述培养皿中培养基的特点是：固体培养基, _______________。若需要调节培养基pH，应该在各种成分都溶化后且分装________(填“前”或“后”)进行。对培养基进行灭菌，常采用的方法是________。

(3)培养后发现，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。