土壤中的纤维素分解菌能合成纤维素酶，从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程如下

(1)纤维素酶包括_____________________。

(2)题干中第二个步骤是______________，目的是_______________。该步骤要使用液体培养基进行振荡培养, 振荡培养的作用是            （答出1点）

(3)第三步骤梯度稀释后，用________________（接种工具）将菌种接种到培养基的表面。

(4)将适量的_________染料滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围出现__________则说明此种菌能够分解纤维素，从平板中挑取实验效果明显的目的菌株。

(5)如果我们要长期保存纤维素分解菌，可以采用____________方法保存。

在白酒发酵的窖池中，培养液的pH≤4.5后，酵母菌的代谢活动逐渐受到抑制，甚至停止发酵。耐酸性酵母菌能在pH≤3.5的环境下继续表现出较强发酵能力，适宜作白酒发酵生产用菌种。为选育适合白酒生产的耐酸性强的酵母菌，研究者进行实验。

（1）酵母菌的呼吸作用类型是________。在发酵过程中，窖池中培养液的pH会逐渐下降，原因是___________________________。

（2）取适量窖底泥、酒糟和黄浆水，分别溶于10 mL________中，再各取1 mL上清液接入10 mL麦芽汁培养基中培养，2天后分别接种到不同酸碱度的麦芽汁培养基上，培养结果见下表。

注：“+”越多表示菌体长得越好，“—”表示几乎不生长。

（3）在pH≤3.5的环境下，仍可检测到少量耐酸性酵母菌生长，这些菌株是________形成的。

（4）从pH为________的培养基中获得菌种，可通过________法接种到培养基上，进行纯化培养。

（5）实验获得了三个耐酸性强的酵母菌菌株，特点如下表。

依据菌株特点，研究者认为C菌株更适合作为白酒发酵菌株，作出这一判断的理由是_____________________________。

分离筛选降解纤维素能力强的微生物，对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有重要意义。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、KCl、酵母膏以及水解酪素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。请回答下列问题：

(1)培养基中加入的化合物A是________。本实验将样品稀释涂布到鉴别培养基之前要进行选择培养，目的是______________________。

(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入________溶液，等培养基上长出菌落后，能产生纤维素酶的菌落周围会出现________。

(3)为在培养基表面形成单个菌落，若以接种环为工具，则用________法进行接种。若用稀释涂布平板法进行接种，在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是________________________________________________________________________。

(4)用三种菌株对秸秆进行处理，并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定(结果如图)。

据图分析可知，三种菌株对________的降解作用最强。与第5天结果相比，第10天秸秆各组分中________的降解率变化最大。

(1)要从土壤中筛选出能高效分解PVA的细菌，应采用以______________作为唯一碳源的选择培养基，实验中还应设置对照组。将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显______________ (填“多于”或“少于”)选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

(2)要测定土壤稀释液中微生物的数目．可在显微镜下用______________计数板直接计数。若将100 mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释10⁴倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100 mL原菌液中有PVA分解菌_________个，该方法的测量值与实际值相比一般会___________(填“偏大”“偏小”或“相等”)。

(3)要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入______________，用于鉴别PVA分解菌。要比较不同菌株降解PVA能力的大小，用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株．一定时间后，通过测定______________来确定不同菌株降解PVA能力的大小。

请回答下列有关微生物及其技术的问题。

 (1)进行酒精发酵的酵母菌与醋酸发酵的醋酸菌在结构上最大的区别是__________________，在代谢方式上的区别是__________________________。

苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题：

（1）酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K₂HPO₄、MgSO₄、苯酚和水，其中可作为碳源的有________________。

（2）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐____________，

以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步_____________，以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加_____________。

（3）下图为连续划线法示意图，在图中__________（填图中序号）区域更易获得单菌落。

（4）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为________________。

如果废水为50mg／L苯酚溶液，降解后约有21％的苯酚残留，则需将残留液稀释_____________（填序号：①5②10③20）倍后，再进行比色。

【生物—选修1 生物技术实践专题】蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值。某同学为筛选产蛋白酶的高产菌株，做了如下实验步骤（配制了下列培养基，在适宜条件下培养）：

（1）为实现筛选目的，步骤Ⅰ所使用的培养基配方中，应去除________并加入高浓度的________。

（2）步骤Ⅲ应挑取图A中________处的菌落，本步骤的目的是________。

（3）图B是该蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性。在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60－70℃保温一定时间的，其作用是________。

某科研兴趣小组欲对土壤中分解尿素的细菌进行分离纯化和计数，请帮助完成实验。

（1）实验原理：分解尿素的细菌由于含有       ，可将           而使周围环境的pH上升，在以       为唯一氮源的培养基中加入       指示剂，对其进行分离、鉴别；通过平板上的菌落数可以推测样品中的活菌数。

（2）实验简要步骤：

①土壤取样并制备培养基：用                 法对培养基进行灭菌。

②分离纯化该细菌：用稀释涂布平板法进行接种，首先需对土壤滤液进行           ，再分别取土壤滤液0.1mL涂布在每一平板上。

③培养、观察与计数。   

（3）有同学发现，稀释倍数为10⁴ 的5个平板上，长出的菌落数分别为9、147、150、153和360，则每升土壤样液中的细菌数量为       个。

（4）某些同学想将分离出的目的菌在－20℃长期保存，菌液中常需要加入一定量的________（填化学物质，1分）。

图1表示微生物实验室培养中的部分操作。请分析回答：

                                                     图1

(1)步骤①的后一步的正确操作应是将平板______________，这样可以防止______________。

(2)步骤②→③之间需要进行的正确操作应是____________________________。

(3)甲同学按步骤④进行操作，据图分析，采用的接种方法称为__________，其操作的两处不当之处分别是________、________。在老师的指导下，该同学按正确的方法重新操作，接种后应在        做好标记。则经培养后菌落的分布情况最可能是下图中的__________。

(4)乙同学尝试采用不同于甲同学的接种方法进行实验，其中一个平板经培养后的菌落分布如图2所示，推测该同学接种时可能的操作失误是____________。

 图2