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            • 1. 已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。
              Ⅰ号培养基:在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5g/L)。
              Ⅱ号培养基:氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(15g/L)。
              Ⅲ号培养基:氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(45g/L)。
              回答下列问题。
              (1)在Ⅰ号培养基中,为微生物提供氮源的是______。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是______。
              (2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中,培养一段时间后,不能降解X的细菌比例会______,其原因是______。
              (3)Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基,若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数,接种时,应采用的方法是______。
              (4)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X代谢为丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供______和______。
            • 2. 筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后,若细菌能分解淀粉,培养平板经稀碘液处理,会出现以菌落为中心的透明圈(如图),实验结果见下表。
              菌种 菌落直径:C(mm) 透明圈直径:H(mm) H/C
              细菌Ⅰ 5.1 11.2 2.2
              细菌Ⅱ 8.1 13.0 1.6
              有关本实验的叙述,错误的是(  )
              A.培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质
              B.筛选分解淀粉的细菌时,菌液应稀释后涂布
              C.以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外
              D.H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异
            • 3. 回答下列与细菌培养相关的问题。
              (1)在细菌培养时,培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是______(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH,其原因是______。硝化细菌在没有碳源的培养基上______(填“能够”或“不能”)生长,原因是______。
              (2)用平板培养细菌时一般需要将平板______(填“倒置”或“正置”)。
              (3)单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,原因是______。
              (4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过______处理,这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。
            • 4. 下列关于微生物实验操作的叙述,错误的是(  )
              A.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌
              B.接种前后,接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧
              C.接种后的培养皿要倒置,以防培养污染
              D.菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基
            • 5.
              在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
              回答下列问题:
              (1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具 ______ (填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
              (2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是 ______ 。
              (3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能 ______ 。在照射前,适量喷洒 ______ ,可强化消毒效果。
              (4)水厂供应的自来水通常是经过 ______ (填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。
              (5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是 ______ 。
            • 6.
              某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用.回答下列问题:
              (1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生 ______ .能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是 ______ .但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是 ______ (打出两点即可).
              (2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择 ______ (填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是 ______
              (3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有 ______ (答出两点即可).
            • 7.
              苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害.小明同学准备依据图1操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株.请回答下列问题:

              (1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有 ______ .
              (2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐 ______ .以达到富集酚降解菌的目的.若图1平板中菌落过于密集,应进一步 ______ ,以便于菌落计数与分离.制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加 ______ .
              (3)图2为连续划线法示意图,在图中 ______  (填图中序号)区域更易获得单菌落.

              (4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量.先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为 ______ .
              管号 1 2 3 4 5 6
              苯酚浓度(mg/L) 1
              如果废水为50mg/L 苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释 ______  (填序号:①5   ②10   ③20)倍后,再进行比色.
            • 8. 有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境,研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解、分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示.

              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、______四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是______.
              (2)与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加生长素和______,这些植物激素一般需要事先单独配制成______保存备用.
              (3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是______,划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落,造成划线无菌落可能的操作失误有______.
              (4)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液作图乙所示实验,该实验的假设是______,该实验设计是否合理?为什么?______.
            • 9. (11分)I.为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题: (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是____________________;然后,将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。

              (2)在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_____________________________。

              II.有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。 

              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、______四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是_________________________。

              (2)与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加生长素和________,这些植物激素一般需要事先单独配制成________保存备用。

              (3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________。

              (4)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是________________________,该实验设计是否合理?为什么?______________________。

            • 10. 回答下列有关微生物和酶工程的问题.
              枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶,后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值,且已大规模产业化应用.
              (1)在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时,培养基营养成分应包括水和______(用序号组合回答).
              ①淀粉  ②蛋白质   ③生长因子  ④葡萄糖   ⑤无机盐
              为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株,将分别浸过不同菌株(a~e)的分泌物提取液及无菌水(f) 的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面;在37℃恒温箱中放置2~3天,结果如图1.

              (2)大规模产业化首选的菌株是______;菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是______.
              图2显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据,即酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其酶活性.在该蛋白酶的工业化生产过程中,通常需对发酵液在60~70℃保温一定时间,再制备酶制剂.
              (3)在60~70℃保温一定时间的作用是______.
              A.诱导蛋白酶的热稳定性
              B.有利于发挥蛋白酶的最佳活性
              C.裂解枯草芽孢杆菌细胞
              D.大幅度降低发酵液中其他酶的活性
              (4)枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为______(选择正确的序号并排序).
              ①过滤   ②干燥   ③破碎   ④浓缩.
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