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            • 1. 已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。
              Ⅰ号培养基:在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5g/L)。
              Ⅱ号培养基:氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(15g/L)。
              Ⅲ号培养基:氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(45g/L)。
              回答下列问题。
              (1)在Ⅰ号培养基中,为微生物提供氮源的是______。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是______。
              (2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中,培养一段时间后,不能降解X的细菌比例会______,其原因是______。
              (3)Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基,若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数,接种时,应采用的方法是______。
              (4)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X代谢为丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供______和______。
            • 2. 筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后,若细菌能分解淀粉,培养平板经稀碘液处理,会出现以菌落为中心的透明圈(如图),实验结果见下表。
              菌种 菌落直径:C(mm) 透明圈直径:H(mm) H/C
              细菌Ⅰ 5.1 11.2 2.2
              细菌Ⅱ 8.1 13.0 1.6
              有关本实验的叙述,错误的是(  )
              A.培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质
              B.筛选分解淀粉的细菌时,菌液应稀释后涂布
              C.以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外
              D.H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异
            • 3. (10分)为提高玉米产量,科学家在育种和栽培中进行研究。下图是关于玉米培养的过程,请回答:

              (1)玉米秸秆的主要成分是          ,酵母菌不能直接使用,要利用C1酶和CX酶分解成          后,再经            酶分解成葡萄糖才能供给酵母菌使用。

              (2)取茎尖进行组织培养,发育成植株D,取D的花药培养成幼苗,经秋水仙素处理后发育成为植株G。从细胞分裂方式上分析,E→F过程中进行了________分裂;从育种方式上分析,D→G属于____________育种。

              (3)D植株上的小孢子母细胞形成精子所经历的分裂方式是____________________。

              某个时期对离体刺激最敏感,一般来说在________期,花药培养成功率最高。

              (4)选取茎尖放入A瓶中培养,是因为__________________________________________。

              如果选取D植株茎的切段放入A瓶培养,首先要进行____________

              (5)C和F试管苗不能直接栽培到大田中,要进 行____________________________。

            • 4. (12分)[生物――生物技术实践]


              乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下:

              产乳糖酶微生物L的筛选 产乳糖酶微生物L的培养 乳糖酶的提取纯化 乳糖酶的固定化

              (1)筛选产乳糖酶的微生物L时,宜用          作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是            。从功能上讲,这种培养基属于              。 

              (2)培养微生物L前,宜采用            方法对接种环进行灭菌。 

              (3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下,带电荷相同的蛋白质电泳速度越快,说明其分子量越              。 

              (4)乳糖酶宜采用化学结合法(共价键结合法)进行固定化,可通过检测固定化乳糖酶的            确定其应用价值。除化学结合法外,酶的固定化方法还包括                             、离子吸附法及交联法等。

            • 5. 人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题:


              (1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是    (填序号)。

              ①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水

              (2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是                        

              (3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是          。 

              (4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见图)。图中降解圈大小与纤维素酶的      有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是    (填图中序号)。 

              (5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵,测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株    更适合用于人工瘤胃发酵,理由是                   。 

            • 6. 有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境,研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解、分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示.

              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、______四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是______.
              (2)与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加生长素和______,这些植物激素一般需要事先单独配制成______保存备用.
              (3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是______,划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落,造成划线无菌落可能的操作失误有______.
              (4)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液作图乙所示实验,该实验的假设是______,该实验设计是否合理?为什么?______.
            • 7. 生活在反刍动物胃内的纤维素分解菌,其新陈代谢类型是(    )
              A.自养需氧型       
              B.异养厌氧型     
              C.异养需氧型   
              D.自养厌氧型
            • 8. (12分)现有一种细菌M,能够合成某种酶,并能分泌到细胞外。为了研究其培养时间与细胞数、细胞外酶浓度和总酶浓度的变化关系,请根据以下提供的实验材料写出实验思路,并预测实验结果。


              实验材料:若干个培养瓶、培养液、细菌M

              (要求与说明:实验仅设一组;实验仪器、试剂、用具及操作不作具体要求;实验条件适宜)

              请回答:

              (1)实验思路:


              (2)预测实验结果(设计一个坐标系,并绘制预测的细胞数、细胞外酶浓度和总酶浓度的变化曲线):

               

               

               

               

               

              (3)测定总酶浓度时,应对细胞做 处理。 

            • 9. (11分)I.为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题: (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是____________________;然后,将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。

              (2)在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_____________________________。

              II.有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。 

              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、______四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是_________________________。

              (2)与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加生长素和________,这些植物激素一般需要事先单独配制成________保存备用。

              (3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________。

              (4)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是________________________,该实验设计是否合理?为什么?______________________。

            • 10. 回答下列有关微生物和酶工程的问题.
              枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶,后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值,且已大规模产业化应用.
              (1)在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时,培养基营养成分应包括水和______(用序号组合回答).
              ①淀粉  ②蛋白质   ③生长因子  ④葡萄糖   ⑤无机盐
              为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株,将分别浸过不同菌株(a~e)的分泌物提取液及无菌水(f) 的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面;在37℃恒温箱中放置2~3天,结果如图1.

              (2)大规模产业化首选的菌株是______;菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是______.
              图2显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据,即酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其酶活性.在该蛋白酶的工业化生产过程中,通常需对发酵液在60~70℃保温一定时间,再制备酶制剂.
              (3)在60~70℃保温一定时间的作用是______.
              A.诱导蛋白酶的热稳定性
              B.有利于发挥蛋白酶的最佳活性
              C.裂解枯草芽孢杆菌细胞
              D.大幅度降低发酵液中其他酶的活性
              (4)枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为______(选择正确的序号并排序).
              ①过滤   ②干燥   ③破碎   ④浓缩.
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