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            • 1.

              淀粉分解菌是能分解淀粉的一类微生物,在自然条件下,淀粉分解菌和其他各种细菌混杂生活在土壤中。某实验小组利用培养基将土壤中的淀粉分解菌筛选出来,回答下列问题:

              (1)将土壤中的淀粉分解菌筛选出来的培养基应添加_____________作为唯一的碳源,此外还需要添加的成分有________________。微生物的接种的方法很多,最常用的是________________和________________。

              (2)该实验小组将样液分别稀释了 10倍、 102 倍、 103 倍、 104 倍,然后将 102 倍、 103 倍、 104 倍的稀释液分别涂布在不同的平板上,若有三个平板均涂布了稀释倍数为 103 倍的稀释液 0.1 mL,分别形成了 68、 70 和 72个菌落,则原样液体中每升含有淀粉分解菌_____________个,该方法测量值一般比实际值___________,原因是________________________________  。

              (3)胡萝卜素化学性质比较稳定,易溶于有机溶剂,可采用萃取法提取。萃取过程中采用___________加热,因为______________________________________________________;

              萃取装置要在加热瓶口安装回流冷凝装置,其目的是___________________________________ 。

            • 2. 酵母菌是来源于自然界的菌种,它种类繁多、分布很广、繁殖极快。如何筛选、纯化、诱导对葡萄酒发酵有利的酵母菌种,是酿酒师们长期研究的课题。

              (1)像其他微生物一样,酵母需要适当的营养和合适的环境条件,培养时培养液中的营养物质主要有 ____________________等。(要求回答4种营养物质)

              (2)当酵母繁殖时,没有糖转化为酒精,此时酵母菌为 ________________呼吸.
              (3)从含有酵母菌、醋酸菌、蓝藻的培养液中分离出酵母菌,最简单的培养方法是:在 _____________并且 _______________条件下进行培养.
              (4)葡萄酒制作是否成功,发酵后需用 ____________来鉴定,在 ____________条件下,该物质与酒精反应呈现 ___________色。

              (5)为筛选和纯化酵母菌,根据用途应选用 __________________培养基,常用的接种方法 _______和 _________.扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数,取0.2mL样品,用固体培养基对其培养,最后统计了三个平板,菌落数分别是200、180、220.则样品中微生物的数量为 ______________个/mL.该统计结果 ____________(低于、高于)实际值。

            • 3.

              下表是培养某微生物的培养基的配方,请回答下列问题:

              试剂

              牛肉膏

              蛋白胨

              NaCl

              琼脂

              加水定容至

              用量

              5 g

              10 g

              5 g

              20 g

              1 000 mL

              (1)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有水、碳源、________和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是____________________。培养基配制完成以后,一般还要调节pH并对培养基进行________处理。
              (2)在配制培养基时,除考虑营养条件外,还要考虑________、____________和渗透压等条件。
              (3)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行________(填“消毒”或“灭菌”);操作者的双手需进行清洗和________;空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质________,还能损伤DNA的结构。

              (4)分离纯化微生物最常使用的接种方法是__________和________________。

              (5)在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是___________________________________________________________。
            • 4.

              东湖绿道二期已向市民开放,我市某中学学生模拟公司课外兴趣小组为了调查东湖的水质状况,在东湖白马驿站区域取样后测定了水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。请回答下列问题:

              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时问,这样做的目的是________________;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为________________。如果该小组实验组平板上菌落平均数为39个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了2个菌落,这种结果说明在此次调查中培养基出现了________________现象。如果将37(即39-2)个/平板作为本组菌落数的平均值,你觉得该做法________________(填“可行”或“不可行”)。

              (2)若想确定平板上的菌落是否有大肠杆菌,一般在培养基中加入伊红美蓝,该培养基从功能上划分属于________________培养基。

              (3)该小组经讨论决定采用平板划线法分离水样中的细菌,在第二次及以后的划线操作时,应从________________开始划线,这样做的目的是________________。

              (4)如下图A和B中,________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。采用该计数方法结果往往较实际值偏________,(填“高”或“低”)原因是________________。

              (5)该小组将得烈的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养,结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中________________的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高________________的利用率。

            • 5.

              欲从腐乳中分离出产蛋白酶活力高的毛霉菌株,设计了如下实验流程。回答下列问题:



              (1)毛霉属于__核生物,从生态系统的组成成分看,它属于________。在腐乳制作中,主要利用毛霉等微生物产生的_________________将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为小分子物质。

              (2)步骤②进行涂布前,需将孢子悬浮液进行梯度稀释,进行梯度稀释的目的是_______________。若进行10倍稀释,一般吸取lml悬浮液注入______中,混匀。

              (3)孟加拉红培养基常用于分离霉菌及酵母菌,在孟加拉红培养基中加入氯酶素可以抑制细菌的生长。从功能上看,孟加拉红培养基属于_______培养基。

              (4)毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈,在酪蛋白培养基中筛选到三个单菌落甲、乙、丙,其菌落直径分别为3.2cm、2.8cm、2.9cm,其菌落与透明圈一起的直径分别为3.7cm、3.5cm、3.3cm。应选择菌落______(填“甲”、“乙”、“丙”)作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。

            • 6.

              国家生活饮用水卫生标准规定:接种1 mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上,在37℃下经24 h培养,所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定,以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题:

              (1)用无菌三角瓶取水样前,取样器(玻璃制品)需使用_____________法灭菌。取水前的这种无菌操作的目的是____________________________。

              (2)牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后,需要冷却到50℃才能用来进行_________操作,冷凝后倒置培养。

              (3)该小组通过滤膜法测定细菌总数,将30 mL水样平均分成3份进行过滤,再将3份滤膜分别放在牛肉膏蛋白胨培养基上培养。在培养过程中,不同时间所观察到的平板上菌落特征的差异有____________(至少写出两点)。为保证可信度,应进行对照实验,对照组与实验组的区别之处是_________________ 。

              (4)在37℃下经24 h培养,结果如下表:

               

              平板1

              平板2

              平板3

              菌落数(个)

              370

              350

              380

              据上表结果判断,所取水样测定结果_____(填“符合”或“不符合”)饮用水的标准。

              (5)该小组若想检测水样中大肠杆菌的数目,可将滤膜放在含__________培养基上,计算培养基上______(颜色)菌落的数目。

            • 7.

              在日常生活中,一提到细菌、真菌及病毒这些微生物,人们往往首先想到它们的害处,其实,很多微生物对人类是有益的,它们与我们人类的关系非常密切,而且人类巳经应用微生物造福于我们的生活。请回答下列问题。

              (1)从自然界获得纯种酿酒酵母菌的基本程序:配制培养基→接种→培养→观察记录→纯化培养。

              ①采用平板划线法接种,开始接种时要灼烧接种环,目的是________________________。

              ②若葡萄汁中含有醋酸菌,在葡萄酒发酵旺盛时,醋酸菌能否将酒精转变成醋酸?____________________,原因是____________________。

              (2)在腐乳的制作过程中,有多种微生物参与了豆腐的发酵,其中起主要作用的是_____________。产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的_____________,_________可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

              (3)利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中选择出能分解纤维素的细菌,经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。土壤中富含各种微生物,将土壤浸出液接种到           培养基上,可得到能分解纤维素的细菌,实验室中获取纯净菌的常用方法有___________和__________。虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、________________。

            • 8. 微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油,增大石油的乳化度,降低石油粘度的原理,通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术.以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作.请回答下列问题:
              (1)土壤是微生物的大本营,该类微生物应取自            的土壤。
              (2)为筛选和纯化该类微生物,如何培养基营养成分特点是            
              (3)接种后需密封培养,由此推测该类微生物的异化作用类型是            ,培养一段时间后在培养基上形成降油圈,此时选取            就可获得高效菌株。
            • 9. (14分)生物乙醇是汽油的良好替代品,美国主要以玉米为原料生产燃料乙醇。我国则坚持“不与人争粮,不与粮争地”的原则,利用农作物废弃物——秸秆代替粮食作为原料,其主要技术流程为:秸秆→秸秆颗粒①反应罐水解②压滤出渣③酒精发酵④蒸馏。

              (1)过程①加入了微生物,其作用是把秸秆颗粒分解。从土壤中获取①所需微生物的过程称为微生物的_________,选择培养基应以__________为唯一碳源。纯化菌种时,将筛选获得的菌液用______________法或______________法接种到培养基上。

              (2)酒精发酵阶段接种的微生物是             ,生产酒精要控制的必要条件是            

              (3)在培养微生物的过程中,对培养基和接种环采用的灭菌方法分别是___________(1分)、________________(1分)。

            • 10.
              人和哺乳动物的尿中含有尿素,大量尿素的存在会对环境造成污染.土壤中有些细菌含有脲酶,可通过降解尿素作为其生长的氮源.现对土壤中的这类细菌进行分离实验,请回答下列问题:
              (1)分离培养细菌时必须进行无菌操作,包括培养基和各种器皿都必须是无菌的,常用的灭菌方法有 ______ 、 ______ 和 ______ .
              (2)将样液进行一系列的梯度稀释,然后接种培养.在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在 ______ 旁进行操作.接种后的培养皿倒置于37℃的 ______ 中培养.
              (3)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌,从功能上划分该培养基属于 ______ 培养基.若培养基中存在有分解尿素的细菌,其菌落周围会出现红色环带,这是由于尿素被分解产生的 ______ 使pH升高,酚红指示剂产生的颜色变化,从而证明这一菌株可以尿素为氮源.变色区域越大,表明该菌株利用尿素的能力 ______ .
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