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            • 1． 泡菜是一种历史悠久的大众喜爱的发酵蔬菜制品．研究发现，乳酸菌是泡菜生产中的主要生产菌种，但不同乳酸菌的繁殖周期不同．蔬菜在腌制过程的某些阶段也会产生较多的亚硝酸盐．为了获得生产周期短、亚硝酸盐含量低的泡菜，某兴趣小组进行了菌种的筛选（过程如图所示）和相关研究．（假设不同乳酸菌在一个繁殖周期中产生酸量相近．）
              筛选优良的乳酸菌菌种过程图（选取6种泡菜老液）：
              泡菜老液→梯度稀释→初筛→复筛→斜面保藏→增殖培养→繁殖周期等性能测定
              （1）乳酸菌的培养条件除了适宜的温度、pH之外，还必须保证    条件．初筛、复筛宜选择    （固体或液体）培养基．将乳酸菌接种培养时常采用    方法．
              （2）当复筛的培养基中出现    即可接种到斜面保藏．增殖培养易选择    （固体或液体）培养基．
              （3）从实验的目的分析，性能测定主要是测量确定乳酸菌的    和蔬菜腌制过程中    ．
              （4）在腌制过程中，坛中会出现溶液量增多现象，主要原因是    ．
              （5）封坛一段时间后，开坛测定亚硝酸盐含量的变化，并进行实验数据的记录筛选合适的乳酸菌作为菌种来制作泡菜．最佳食用泡菜的时间，应该选择    时间段食用．
              难度：中等
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            • 2． 某些细菌产生的脂酶可分解脂肪为游离脂肪酸．加在培养基中的维多利亚蓝可与脂肪结合成为无色化合物，如果脂肪被细菌产生的脂肪酶分解，则维多利亚蓝释出，呈现深蓝色．现有被检细菌，要检验其是否能产生脂酶．
              培养基名称：脂酶培养基
              蛋白胨：10g         酵母浸膏：3g
              氯化钠：5g          琼 脂：20g      
              维多利亚蓝（1：1500水溶液）：100ml            
              玉米油：50ml        蒸馏水：900ml        
              pH 值：7.8
              方法：将被检细菌接种于脂酶培养基上，于35～37℃无菌培养24小时．观察检验结果．    
              （1）固体培养基的制备一般包括    、    、    灭菌和倒平板等步骤．    
              （2）被检细菌培养通常包括配制培养基→灭菌消毒→接种→培养．配制的培养基一般都含有水、    、    和无机盐，还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求．    
              （3）进行无菌操作的目的是    ．常用的灭菌的方法有    灭菌、干热灭菌和    灭菌．对培养基进行灭菌的方法是    ．微生物接种最常用的方法有    和    ．    
              （4）请你预计检验结果和结论     若检验结果    ，则结论为被检细菌    ．若检验结果    ，则结论为被检细菌    ．
              难度：中等
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            • 3． 根据微生物分离和培养的知识，回答下列问题：
              （1）分离纯化大肠杆菌的关键步骤是    ，该步骤常用的方法有两种：    和    ，其中一种方法是将菌液进行一系列的    ，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固定培养基的表面进行培养．
              （2）在微生物的实验室培养过程中，获得纯净培养物的关键是    ，因此需要对培养基和培养皿进行    处理，操作者的双手需要进行清洁和    ．
              （3）分离分解尿素的细菌的培养基中要以尿素为唯一    （填“碳源”或“氮源”）．
              难度：中等
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            • 4． （2016•宜宾县一模）（1）反刍动物瘤胃内栖息着许多以尿素为唯一氮源的微生物，这些微生物能分解尿素是因为它们能合成    ．从瘤胃中分离这些微生物必须先制备以    为唯一碳源的培养基，采用    灭菌，采用    法接种，在适宜条件下培养一段时间后观察其中一个平板的菌落分布如图所示，推测该同学接种时可能的操作失误是    ，如果发现每个平板中菌落形态多样，其原因可能是    ．
              （2）由霉菌发酵生产果胶酶是食品工业中使用量最大的酶制剂之一，果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括    、果胶分解酶、果胶酯酶等；在探究果胶酶的用量实验中，因变量是    ．
              （3）无菌技术是影响植物组织培养能否成功的重要因素．用    和质量分数为0．l%的氯化汞对外植体消毒，用    清洗，接种时每次使用器械后都需要    灭菌；接种3-4d后，观察外植体的生长情况，若发现外植体被污染，分析其原因可能是    ．（至少答出两点）
              难度：中等
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            • 5． 回答下列有关微生物的问题．
              如图1显示微生物的接种实验中的一些步骤．

              （1）图中的接种工具的名称是    ．
              （2）解释步骤①和②的操作：
              步骤①中，为何要将接种工具灼烧至变红？    
              步骤②中，为何要将接种工具冷却？    
              （3）图示接种方法的目的是    ．
              分别用三个平板培养三种细菌（E．coli、S．albus、B．subtilis），然后在培养基上打出直径为3mm的孔，并在孔中加入一定浓度的甲抗生素，经过一定时间培养后，可以在孔的周围观察到一圈清晰区，此乃抑制细菌生长所致．测量清晰区的直径（如图2所示），数据如表．
              细菌不同浓度甲抗生素条件下清晰区直径（mm）
              5μg/mL甲7.5μg/mL甲10μg/mL甲15μg/mL甲20μg/mL甲
              E．coli710141616
              S．albus-581317
              B．subtilis5791419
              （4）比较10μg/mL甲抗生素和20μg/mL甲抗生素在控制E．coli和S．albus方面的效用．    
              （5）在控制S．albus方面，甲抗生素具有抑菌作用的最低浓度是多少？    
              （6）有人感染B．subtilis而患病．举出三项理由，解释为什么用25μg/mL甲抗生素治疗该病人是不明智的做法．
              ①    ；②    ；③    ．
              难度：中等
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            • 6． 据报道，三分之一的缺血性心脏疾病是由于高胆固醇造成的．研究发现某种乳酸菌能降低胆固醇，科研人员利用微生物分离培养技术来获得能高效降低胆固醇的乳酸菌．回答下列问题：
              （1）乳酸菌是一种原核生物，其发酵过程会以胆固醇作为    ．取适量发酵的酸肉，剪碎、研磨然后加入无菌水稀释，目的是    ．
              （2）对乳酸菌的选择培养基进行的灭菌方法是．刚刚制作好的平板培养基需冷却后并倒立放置，目的是    ．
              （3）将选择的菌株接种到高胆固醇培养液中，一段时间后离心，测定    （填“上清液”或“下清液”）中的胆固醇含量，并通过与    比较，测定菌株降低胆固醇的能力．对利用胆固醇的乳酸菌菌种长期保存的方法是    ．
              难度：中等
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            • 7． 从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物实验过程如图所示，请据图回答下列问题．

              （1）本实验用到的培养基为    ，碳源为    ．
              （2）实验原理是    ．
              （3）①～③重复培养的目的是    ．
              （4）⑤的菌落中大部分是降解    的微生物．
              （5）⑥为    组，⑦为    组，设置⑥的目的是    ．
              （6）⑤～⑥采用    法接种到⑥的培养基中，在操作过程中为防止杂菌污染应注意的事项是    ．
              难度：中等
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            • 8． 农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，长期使用会污染土壤．为修复被污染的土壤，可按图示程序选育出能降解该除草剂的细菌．已知该除草剂（含氮有机物）在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明．
              （1）微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作技术，该技术的核心是    ，应该在    旁完成．图1中B、C所示操作的目的是将聚集的菌种逐步    ．
              （2）在选育过程中，应将土壤浸出液接种于以    为唯一氮源的固体培养基上．为了筛选出高效的目的菌，可比较单菌落周围透明圈的大小．实验结果如图2显示的A～E五种菌株中，    是最理想菌株．
              （3）若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是    ．对分离的细菌数目统计时，统计的菌落数目往往比活菌的实际数目    ．
              （4）操作过程中有三种材料或用具需要消毒或灭菌：①培养细菌用的培养基与培养皿；②操作者的双手；③玻棒、试管、烧瓶和吸管．其中需要灭菌的是    ．（填序号）
              难度：中等
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            • 9． 塑料袋造成的“白色污染”早已成为地球公害，塑料袋的自然分解需要20-1000年不等．科学工作者从土壤中找到了一类假单胞杆菌，能将聚乙烯塑料的自然降解过程缩短至3个月，而且分解产物只有水和二氧化碳．从土壤中分离出聚乙烯降解菌的大致过程如图：

              （1）图中“…”表示对土壤悬浮液进行一系列的    ，目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在I号培养基表面形成单个    ．
              （2）从功能方面看，I号培养基属于      培养基，其作用是使目的菌能“脱颖而出”．如图采用的接种方法为    ．使用Ⅱ号培养基的目的是使目的菌数目增多，培养基中必须包含水、无机盐、    、    等基本营养成分．
              （3）为避免杂菌污染培养物和环境，微生物培养的培养基在接种前和完成实验后都要进行    ；接种时要在    附近操作．
              难度：中等
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            • 10． （2016春•枣阳市校级期中）醋酸菌是食品工业中常用的微生物，不仅可用于生产醋酸，某些类型还可用于生产细菌纤维素．回答下列问题：
              （1）醋酸菌在缺少糖源的情况下，可将乙醇氧化为    ，进而生成醋酸．进行醋酸发酵时，为了维持醋酸发酵培养液pH的相对稳定，可向培养液中加入    ．
              （2）筛选接种时，为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在    附近进行；某同学采用平板划线法进行接种，在适宜条件下培养一段时间后．发现一个培养皿中某部位的菌落分布呈沟槽状，与其他部位的菌落分布有明显差异，其原因最可能是划线时该部位    ．
              （3）鉴定菌种的依据通常包括菌落的形状、大小    等菌落特征．将鉴定的菌种进行临时保存时，可在低温下使用试管斜面保存，但该方法除保存时间短外，菌种还易    ；若需较长时间保存菌种，可用的方法是    ．
              （4）利用筛选出的优质菌种进行生产时．研究人员测得培养过程中的细菌纤维素产量、培养液中的残糖量和残氮量如图所示．图中代表培养液中残氮量的是    曲线．与B曲线相比，A曲绂下降更快的主要原因是    ．
              难度：中等
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