“创卫”是创建卫生城市的简称。“卫生城市”是一个城市综合功能和文明程度的重要标志。某同学欲利用所学习的微生物培养知识，通过实验证明痰液中含有细菌，来倡导同学们不要随地吐痰，为“创卫”添一份力。请回答下列问题：

(1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物，该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl________、H₂O等；该培养基中微生物所需的氮源来自________，制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，其中灭菌常用的方法是_______________________________________________；培养基灭菌后，需要冷却到________ ℃左右才能倒平板，等平板冷凝后，还需要将平板倒置，主要目的是___________________________________________。

(2)为了使实验更有说服力，某同学设置空白对照组和若干实验组，其中对照组的作用是____________________________________________________________。若在某次调查中，某一实验组平板上的平均菌落数为39个，而空白对照组的平板上出现了9个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

(3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目，统计结果往往比实际细菌的数目要低，主要原因是：____________________________________。

下面的图甲表示硝化细菌、酵母菌和乳酸菌在半固体培养基中的生长情况，图乙表示这三种菌的增殖速度与氧气浓度之间的关系，请据图回答：

(1)图乙中a、b、c三条曲线依次表示图甲中__________号试管中微生物在不同氧气浓度中的增殖速度。

(2)研究发现，青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用。如果培养基中混杂了这三类微生物，请设计实验，利用改变培养基成分等培养条件，将酵母菌和硝化细菌分离出来。

①主要步骤：

A．分别配制不含__________的培养基(A)和加入________的培养基(B)，分别灭菌。

B．分别接种混合液放在适宜条件下培养。

C．观察结果。

②结果：在A培养基上生存的是____________，在B培养基上生存的是____________。

(3)微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是________________。

石油是人类重要的化工原料之一，其在给人类生产生活带来便利的同时也对陆地和海洋造成污染，下图是科研工作者分离能分解石油污染物的假单孢杆菌的过程。请根据流程图回答下列问题：

土壤取样→A→梯度稀释→涂布到培养基上→筛选目的菌株（假单孢杆菌）

（1）A过程为___________，目的是增加假单孢杆菌的浓度，该培养基中应当以___________为唯一碳源。该实验过程中需要设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显___________（填“多于”或“少于”）选择培养基上的菌落数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

（2）实验中需要用___________对菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同浓度的菌液分别滴加到固体培养基的表面，用___________（器具）涂布均匀并进行培养，以便获得单个菌落。

（3）若实验中用10³倍的0.1mL的稀释液分别涂布三个平板，培养后分别形成了98、100和102个菌落，则每毫升原样液中含有假单胞杆菌___________个，实际值一般要比该测量值偏大的原因是___________。

如图表示微生物的接种实验中的一些步骤。请回答下列有关问题：

（1）步骤①前的一步操作是________。，该操作用到的主要仪器是________。

（2）实验步骤②的目的是________，步骤②、③之间还需要将接种环________。

（3）指出步骤④操作不当的地方________。

（4）分别用三个平板培养三种细菌（E.coli、S.albus、B.subtilis），然后在培养基上打出直径为3mm的孔，并在孔中加入一定浓度的甲抗生素，经过一定时间培养后，可以在孔的周围观察到一圈清晰区，此乃抑制细菌生长所致。测量清晰区的直径（如图所示），数据如下表。

①s.albus和B.subtilis对甲抗生素敏感的区别是________。

②有人感染E.eoli而患病，医生使用20μg／mL甲抗生素给予治疗，试用生物进化理论解释这种不明智的做法________。

③采养殖池中的水样1mL稀释100倍，吸取稀释后的水样1mL，接种于E.coli选择性培养基上培养。一段时间后观察菌落并计数，重复三次实验结果如图。该养殖池每mL水含有E.coli________个。

根据下面的实验装置图（图甲、乙）和果酒的生产工艺流程简图（图丙）回答问题：

（1） 图甲所示装置可用于提取________（填“橘皮精油”、“玫瑰精油”或“胡萝卜素”）。

（2） 制作果酒时可选用图乙的装置。为适当提高果酒的生产速率，进气口应_________；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是_____________。

（1）按细胞结构分类，金黄色葡萄球菌属于_________生物，从培养过程分析，金黄色葡萄球菌可进行____________呼吸。

（2）用质量分数为7.5%的NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是_________________。

（3）操作中在血平板上的接种方法是______________，接种操作前后需要对接种工具进行_____灭菌。

（4）在制备血平板时需将pH调节至________（填“微酸性”或“微碱性”）后灭菌，待培养基____________后，再加入适量血液。按培养基功能分类，血平板属于________培养基。

（5）经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现______________________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，要对本操作进行完善，完善的方案是________________________________________________。

下列是与微生物培养有关的问题，请回答：

⑴某细菌固体培养基的组成成分是、、、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中碳源是＿＿＿＿＿，氮源是＿＿＿＿＿。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，该培养基属于＿＿＿＿＿培养基。按照化学成分分类，该培养基属于＿＿＿＿＿培养基。从同化作用类型看，用该培养的细菌属于＿＿＿＿＿。

乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为：

  玉米秸秆糖液酒精

 (1)玉米秸秆经预处理后，应该选用        酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。

 (2)（多选）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？            。

   A．酿制果醋的醋酸菌   B．生长在腐木上的霉菌   C．制作酸奶的乳酸菌   

   D．生产味精的谷氨酸棒状杆菌                        E．反刍动物瘤胃中生存的某些微生物

 (3)若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为         （按功能分），培养基中的碳源为            。

 (4)从生物体提取出的酶首先要检测           ，以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用固定化酶技术。

(5)发酵阶段需要的菌种是           ，在产生酒精时要控制的必要条件是           。

临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本（如痰液、粪便等），然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：

⑴为了从样本中分离并获取某种致病菌单菌落，可用             法或             法将人体样本接种于固体培养基表面，再经过选择培养、鉴别等步骤实现。

⑵为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板的不同位置，培养一段时间后，在四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A＞C＞D＞B。由此推断，该病人目前适合使用的是抗生素        。含D的滤纸片周围的透明圈比含A、C的小，但透明圈中出现了一个菌落，这种菌落的出现可能是由于杂菌污染导致的，也可能是由于该致病菌发生了突变；若发生了基因突变，这种突变一般是否由抗生素诱发的？         ，若要证明这种致病菌发生了基因突变，可检测和比较这类细菌细胞中        （“DNA 的碱基组成”“mRNA 的含量”“ DNA 的碱基序列”）。

⑶为防止杂菌污染，培养基的灭菌方法是         灭菌，接种环的灭菌方法是         灭菌，接种过程应该在               旁进行。