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            • 1.
              尿素是一种重要的农业肥料,经微生物分解后能更好的被植物利用.某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌(目的菌).培养基成分如下表所示.
              KH2PO4 NaHPO4 MgSO4•7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
              1.4g 2.1g 0.2g 10g lg 15g
              将表中物质溶解后,用蒸馏水定容到100mL.实验过程如图所示:
              回答下列问题:
              (1)该培养基能筛选出目的菌的原因是______.
              (2)图中将细菌转到固体培养基上接种时,可采用的方法是______.初步筛选出来的菌种还需要进一步的鉴定:在培养基中加入______指示剂,接种并培养初步筛选的菌种,若指示剂变成______色,则可说明该菌种能够分解尿素.
              (3)在实验中,下列材料或用具需要灭菌的是______,需要消毒的是______(填序号).
              ①培养细菌的培养基与培养皿
              ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管
              ③实验操作者的双手
              (4)在进行分离分解尿素的细菌实验时,A同学从培养基上筛选出大约50个菌落,而其他同学只选择出大约20个菌落.A同学的实验结果产生的原因可能有______(填序号).
              ①所取土样不同 ②培养基被污染 ③接种操作错误 ④没有设置对照实验
              (5)实验结束后,使用过的培养基应该进行______处理后,才能倒掉.
            • 2. 红梨醋饮属于绿色健康饮品,其制作流程如图:

              请回答:
              (1)可在酸性条件下用 ______ 与发酵产物反应,检测①过程是否成功.
              (2)在①过程进行旺盛时,②过程往往不能进行,原因是 ______
              (3)对②过程所用的微生物进行分离和纯化时,常用的划线工具是 ______ .在固体培养基上划线4次,至少需要灼烧划线工具 ______ 次.
              (4)为检测生产用水中的大肠杆菌含量,每次将200ml水样过滤后,取滤膜放在伊红美蓝培养基上,重复三次.将3个平板置于37℃恒温箱中培养24h后挑选 ______ 色的菌落进行计数.平板上目的菌菌落数分别为32、292和36,据此可计算出每升水样中的大肠杆菌数为 ______ 个.若采用显微镜直接计数法,计数结果会偏高,原因是 ______
              (5)桉树油对大肠杆菌有抑制作用,也可作为食品添加剂,其挥发性强,难溶于水,用桉叶提取桉树油常用
              ______ 法.
            • 3.
              红梨醋饮属于绿色健康饮品,其制作流程如图:

              请回答:
              (1)可在酸性条件下用 ______ 与发酵产物反应,检测①过程是否成功.
              (2)在①过程进行旺盛时,②过程往往不能进行,原因是 ______ .
              (3)对②过程所用的微生物进行分离和纯化时,常用的划线工具是 ______ .在固体培养基上划线4次,至少需要灼烧划线工具 ______ 次.
              (4)为检测生产用水中的大肠杆菌含量,每次将200ml水样过滤后,取滤膜放在伊红美蓝培养基上,重复三次.将3个平板置于37℃恒温箱中培养24h后挑选 ______ 色的菌落进行计数.平板上目的菌菌落数分别为32、292和36,据此可计算出每升水样中的大肠杆菌数为 ______ 个.若采用显微镜直接计数法,计数结果会偏高,原因是 ______ .
              (5)桉树油对大肠杆菌有抑制作用,也可作为食品添加剂,其挥发性强,难溶于水,用桉叶提取桉树油常用
              ______ 法.
            • 4. 井冈霉素是我国目前防治水稻纹枯病的主导农药,由于多年的单一使用,部分地区纹枯病菌对其产生了不同程度的抗药性,迫切需要研发有类似效果的新型替代生物农药.从细菌M18中提取的申嗪霉素能有效抑制水稻纹枯菌,与其它农药相比对人体和动物安全性高.为了开发更稳定、高产的新型菌株,科研人员进行了以下研究.请回答下列问题:
              (1)筛选菌株选择 (健康/患纹枯病)的水稻植株的根切成小段放入液体培养基中培养24h后,取适量培养液涂布于琼脂平板上,培养5天后,挑选形态不同的  , 对其进行编号.然后挑取少许菌株分别接种于长满水稻纹枯菌的琼脂平板上,培养3天后,观察纹枯菌的生长,根据 选出编号为P12的理想菌株.
              (2)鉴定菌株P12所属的细菌类型提取P12基因组DNA,扩增其16S rDNA(能体现不同菌属之间的差异),扩增过程需要的酶有 ,还需要特定的  . 对其测序后确定该菌株所属细菌类型.
              (3)检测P12的细胞毒性
              用人肺癌细胞系A549作为指示株系,在37℃恒温培养箱中培养.通入的空气应含 ,培养液中含少量胎牛血清,目的是 .2h后分别将相同浓度的P12、M18和DH5α(人体肠道内共生的大肠杆菌)菌液5μL加入A549细胞培养液中,4h后测定吸光值,以表示乳酸脱氢酶(LDH)的释放量.LDH是活细胞内含有的酶,当细胞受到细菌攻击时,细胞膜的 改变,LDH释放至细胞外.测定结果显示,P12对A549细胞的毒性 
              (4)部分地区的纹枯菌对井冈霉素产生抗药性的原因,是由于 对细菌进行长期的选择,使细菌的 发生了改变的结果.
            • 5. MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”,对青霉素等多种抗生素有抗性.为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响,某兴趣小组的实验设计及结果如表.
              组别培养基中的添加物MRSA菌
              1100µg/mL蛋白质H生长正常
              22µg/mL青霉素生长正常
              32 µ g/mL青霉素+100lµ g/mL蛋白质H死亡
              请回答下列问题:
              (1)青霉素的用量是该实验的 变量.应保持 ,目的是 
              (2)第2组和第3组对比表明MRSA菌对有抗性, 能杀死MRSA菌.
              (3)蛋自质H不是新型抗生素,理由是 .
              (4)测定培养液中MRSA菌的活菌数量,不宜在显微镜下用直接计数,适合选用 法进行计数,原因是直接计数获得的结果包含活的MRSA菌和死的RSA菌的总数,而用涂布法进行计数,计数的是菌落数,一个菌落一般来源于稀释液中的一个活菌.
            • 6. 一研究小组测定了某河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作来调查其水质状况.回答下列问题:
              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量.在涂布接种前,随机取若干 后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目是
              (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌.操作时,接种环通过灼烧灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线.这样做的目的是 
              (3)示意图A和B中, 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果.

              (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养.结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快.分析其原因是:振荡培养能提高培养液的 的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触,提高 的利用率.
            • 7. 由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种,过程如图.
              (1)筛选可高效利用淀粉的工程酵母菌种需要配制 ______ 培养基,为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以 ______ 作为唯一碳源对培养基进行灭菌,应该采用的方法是 ______
              (2)②、③过程需要重复几次,目的是 ______ .为筛选出可高效利用淀粉的菌种,过程③最好采用的接种方法是 ______
              (3)在固体培养基上形成菌后滴加碘液,可以根据菌落周围产生 ______ 的大小来筛选可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种.
              (4)以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,接种 ______ 菌的发酵罐所产气体量较大,其原因是 ______
            • 8. [生物-选修1:生物技术实践]
              一种广泛使用的除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解,长期使用可污染土壤.为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明).

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行稀释处理.现有一升土壤浸出液,用无菌吸管吸取1mL液样至盛有9mL无菌水的试管中,依次稀释103稀释度.各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55、56、57,则每升原土壤浸出液样中菌体数为 ______
              (2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从用途方面来看,上述培养皿中培养基的特点是 ______
              (3)接种技术的核心是 ______ .在划线接种时,连续划线的目的是将聚集的菌种逐步 ______ ,培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 ______ 或有氧条件抑制了这些细菌的生长.
              (4)在培养基上形成的菌落中,无透明圈菌落利用的氮源主要是 ______ ,有透明圈菌落利用的氮源主要是 ______ ,据此可筛选出目的菌.实验结果如图显示的A~E五种菌株中, ______ 是最理想菌株.
            • 9. 请回答下列与微生物有关的问题:
              (1)微生物的分布:纤维素分解菌主要分布在富含 ______ 的土壤表层.
              (2)微生物的消毒和灭菌:在菊花组织培养中,对外植体常用 ______ 和氯化汞进行消毒;在微生物培养中,对培养基常用 ______ 法进行灭菌.
              (3)微生物的应用:在葡萄酒的自然发酵过程中,运用吸附在葡萄皮上的野生型 ______ 发酵产生酒精.
              (4)微生物的接种:微生物接种的方法很多,最常用的是 ______ 和稀释涂布平板法.
              (5)微生物的计数:运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,原因是 ______
              (6)微生物的鉴定:为筛选出纤维素分解菌,应向培养基中加入 ______ 染料,将呈红色反应,再依据培养基中是否产生 ______ 来筛选纤维素分解菌.
            • 10. 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性.研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示.

              (1)进行①过程的目的是 ______ ;②过程所使用的接种方法是 ______ 法.
              (2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于 ______ 培养基,仅以淀粉作为 ______ 源;从物理状态上来说,Ⅱ号培养基属于固体培养基,配制时应加入 ______ 作为凝固剂.
              (3)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是 ______ ;一般对配制的培养基采用 ______ 法灭菌.
              (4)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放 ______ 分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈;应挑出透明圈 ______ (大或小)的菌落,接种到Ⅱ号培养基.
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