酸菜，古称菹，《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答：

（1）酸菜制作起主要作用的微生物是_____________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是_______

______________。 

（2）实验室可采用___________________________法进行菌种纯化，所用培养基一般用___________法进行灭菌。 

（3）为了保持所获得菌种纯净，需要进行菌种的保藏。对获取的菌种通常是在_________条件下短时间保藏，也可以利用____________的方法长期保存。

（4）市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，A同学怀疑是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持___________，理由是____________________。 

某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。

(1)为了缩短泡菜制作时间，可在冷却的盐水中加入少量陈泡菜液，目的是___________________。

(2)泡菜液中的乳酸的产生场所是乳酸菌的___________。在制作泡菜初期，泡菜坛水槽总是有气泡冒出的主要原因是_______________。随着泡制时间的延长，泡菜坛中亚硝酸盐的含量变化趋势为__________

(3)为分离纯化出优质的乳酸菌，应挑选_________________的菌落作为候选菌。

(4)乳酸菌发酵产酸奶，发酵到后期时，发酵速度逐渐变缓甚至停止，主要原因是：___________________。

（1）若分离以尿素为氮源的细菌。在含有___酶的细菌菌落周围会出现，这是由于尿素被分解产生的氨气使PH升高，______指示剂产生颜色变化。采用______法将发酵菌株固定在锯末上制成固定化菌株，可大幅缩短生产周期,降低生产成本和提高生产效率。

(2)亚硝酸盐测定原理:亚硝酸盐可与________________发生重氮化反应.这一产物再与____________________偶联,形成__________色产物。

（3）获得目的基因，获取已知目的基因序列用化学方法合成或_________________

基因工程的核心:通常用_________________分别切割目的基因和载体DNA，然后用________将目的基因和载体DNA连接在一起,形成重组DNA分子。

（4）卵巢经超数排卵处理后，要使用__________________确定卵泡的位置。     

 科研人员单独培养胚胎干细胞，首先需要在培养皿底部制备一层______细胞，称为饲养层。 利用动物细胞培养技术中的细胞具有________________和__________________的特点可用烧伤患者自身的健康皮肤细胞培养出大量自身薄层皮肤细胞，用于移植。

（5）植物克隆和动物克隆共有的培养方法是_______

A.原生质体培养、传代培养     B.贴壁培养、传代培养 

C.器官培养、愈伤组织培养     D.悬浮培养、器官培

四川泡菜是用一定浓度的盐水泡制蔬菜，在泡制过程中涉及到乳酸发酵、酒精发酵等过程，其中以乳酸发酵为主，相关生理过程如下图（①～④代表过程，a代表物质）。

请回答问题：

（1）乳酸菌的呼吸方式是_________，为利于乳酸菌的呼吸作用所以泡菜坛的坛口应_________（敞口/密封）。

（2）图中过程_________是乳酸菌和酵母菌共有的代谢途径，发生场所是_________，a代表_________。

（3）泡菜制作过程中酵母菌的数量先增加后减少，增加的原因是发酵初期坛中有一定量的氧气，使酵母菌细胞能进行过程_________（用图中标号回答），能量供给充足，利于繁殖；减少的主要原因是乳酸菌的呼吸产物使发酵后期坛中的pH下降，导致酵母菌_________的稳定性下降，从而影响对营养物质的吸收，正常生命活动受到抑制。

请回答下列有关微生物及其技术的问题。

 (1)进行酒精发酵的酵母菌与醋酸发酵的醋酸菌在结构上最大的区别是__________________，在代谢方式上的区别是__________________________。

根据所学知识，回答下列有关泡菜制作的问题：

（1）制作泡菜时，要用盐水煮沸，其目的是__________________。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是_____________。 

（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行__________的过程。该过程发生在乳酸菌的_____________中。 

（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有温度、_________和__________等。 

（4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是_________________，原因是_________________________。 

（每空1分，共8分）根据所学知识，回答下列有关泡菜制作的问题：

（1）制作泡菜时，要用盐水煮沸，其目的是__________________。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是_____________。 

（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行__________的过程。该过程发生在乳酸菌的_____________中。 

（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有温度、_________和__________等。 

（4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是_________________，原因是_________________________。 

请回答下列有关“传统发酵技术应用”的问题：

（1）在变酸的酒的表面观察到的菌膜就是________________在液面大量繁殖而形成的，该微生物的新陈代谢类型为________________；在泡菜坛内观察到的白膜就是________________大量繁殖而形成的，该微生物的新陈代谢类型为________________。

（2）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有_____________、____________、___________。

（3）测定亚硝酸盐含量的方法为________________，即在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生__________反应后，与_______________________________结合形成玫瑰红色染料。

[生物——选修1：生物技术实践]

请回答下列有关泡菜制作的问题：

（1）在选泡菜坛时，应选择火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的，其目的是为了________。

（2）制作泡菜时，所用盐水中，食盐的质量分数为________。使用前，盐水需要________。为了缩短制作时间，有人还会在盐水中加入少量陈泡菜液，加人陈泡菜液的目的是________。

（3）泡菜制作过程中，泡菜坛中乳酸菌含量的变化趋势是________。

（4）亚硝酸盐含量受腌制过程中________、________和________等因素的影响。

（5）欲检测泡菜中亚硝酸盐含量，使用对氨基苯磺酸溶液和________溶液检测，泡菜溶液会出现玫瑰红色。为使泡菜汁透明，可加入________。