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            • 1． 请回答下列现代生物科技问题：
              （1）基因工程的工具之一限制酶主要是从    中分离纯化出来的．将目的基因导入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为    ，从分子水平检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是    ．
              （2）将目的基因导人动物细胞培育转基因动物常用的受体细胞是    ，经早期胚胎培养和    ，使其发育成具有新性状个体．
              （3）胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，在功能上具有    ，在    细胞上或在添加抑制因子的培养液中培养可以增殖而不发生分化．
              （4）转基因产品的安全性问题一直是争论的焦点，原因之一是由于科学发展水平的限制，目前科学家对基因的    、基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解的相当有限．
              难度：中等
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            • 2． 回答下列有关基因工程和遗传表达的问题：
              图1所示的酶M和酶N是两种限制酶，图中DNA片段只注明了黏性末端处的碱基种类，其它碱基的种类未作注明．

              （1）限制酶是基因工程必需的工具酶，其特性是    ．
              （2）酶M特异性剪切的DNA片段是，则酶N的识别序列是    ．
              （3）图2的A和B分别表示两段DNA序列．表格分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点．

              据图2：假设位于某基因两侧的DNA序列均如图A所示，则应选择表格中酶    进行酶切；若位于某基因两侧的DNA序列分别如图A和B所示，则应选择表中酶    进行酶切．
              （4）图3质粒中不能和图2中片段B发生重组的是    （多选）

              （5）下列关于质粒运载体的说法正确的是    （多选）．
              A．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
              B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞
              C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
              D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则
              E．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DNA中才能表达
              F．没有限制酶就无法使用质粒运载体
              基因工程除改造微生物外，还可以改造动植物细胞，图4显示是一种外源基因导入受体细胞的方法．

              （6）基因工程中图4所示的导入方法称为    ．
              （7）若想在山羊的乳汁中收获人的生长激素，则需将人生长激素基因导入至山羊受精卵的    中．
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            • 3． Bt毒蛋白基因是从苏云金芽孢杆菌中分离出来的抗虫基因，因其表达产物Bt毒蛋白具有杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的基因．请回答下列有关转基因抗虫植物的问题：
              （1）要从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因，可根据Bt毒蛋白基因的部分已知序列，设计特异性    ，再利用    技术扩增出Bt毒蛋白基因．
              （2）构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有    ，它能把目的基因整合到受体细胞（植株细胞）的    上．这种将基因表达载体导入受体细胞的方法是    法．
              （3）要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做    实验；若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白，在分子水平上可利用    方法进行检测．
              （4）目前，转基因植物的安全性问题是社会争论的热点．如有些人认为转基因植物的种植会威胁环境安全；但也有人认为转基因植物的种植减少了    的使用，有利于减轻污染．面对转基因技术的利弊，我们应持有的正确做法是    ．
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            • 4． 下列关于转基因植物的叙述，正确的是（　　）
              A．动物的基因转入植物后都不能表达
              B．转入并表达抗虫基因的植物，不但会导致昆虫死亡还会对人体造成毒害
              C．如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题
              D．转入到油菜线粒体中的外源基因，不会通过花粉传入到环境植物中
              难度：中等
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            • 5． 在基因工程中，作为基因运输工具的运载体，必须具备的条件有（　　）
              ①能够在宿主细胞中复制，并稳定地保存 ②具有多个限制酶切点
              ③必须是细菌的质粒或噬菌体 ④具有某些标记基因．
              A．①②③④
              B．①②④
              C．①②③
              D．①③④
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            • 6． 最早完成体外DNA重组的科学家是（　　）
              A．伯格
              B．帕米特
              C．科恩
              D．博耶
              难度：中等
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            • 7． 下列关于基因工程载体的叙述中，正确的是（　　）
              A．构建基因文库时不需要载体
              B．都是环状DNA分子
              C．只来自于原核细胞
              D．有一至多个限制酶切割位点
              难度：中等
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            • 8． 如图表示利用乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的流程示意图，请分析回答：

              （1）中A、B分别表示    、    ．由A得到的基因编码区的脱氧核苷酸序列有     （答“一种”或“多种”），这是因为    ．
              （2）常用的方法是    ．通常将    时期的早期胚胎移植到受体内，为提高培育成功率，进行‚过程之前，对早期胚胎的处理是取其部分细胞用目的基因探针进行    检测．
              （3）要一次获得大量基因型相同的子代，可对早期胚胎进行    ，操作时需注意    ．
              （4）蛋白质工程中，需对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质，原因是    ．
              （5）请说明转基因技术的利：    ，弊：    ．（各答出一点即可）
              难度：中等
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            • 9． （1）在植物基因工程中，构建重组Ti质粒时，通常要用    分别切割    和Ti质粒，再用    进行连接．
              （2）动物细胞体外培养时，要保证被培养的细胞处于    的环境，在营养方面最终需在培养基中加入    等天然成分．细胞培养需在适宜的理化条件下进行，此外还需要一定的气体环境，其中C02的主要作用是    ．
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            • 10． 下列叙述，错误的是（　　）
              A．通过培养植物细胞可获取大量的细胞代谢产物
              B．依据基因突变原理可用射线处理愈伤组织获得作物新品种
              C．体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清和抗生素
              D．作为运载体必备的条件之一是具有多个相同的限制酶切割位点
              难度：中等
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