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            • 1． 图1表示含有目的基因D的DNA片段和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有MspⅠ、
              BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点，分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．请回答下列问题：

              （1）图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个脱氧核苷酸之间由    （填化学键名称）连接．
              （2）若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是    末端，其产物长度为    ．
              （3）若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d．从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有    种不同的DNA片段．
              （4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是    ．在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加了    的培养基进行培养．经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是    ．
              难度：中等
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            • 2． 下列用DNA重组技术生产的人类蛋白药物及其用途错误的是（　　）
              A．胰岛素--降低血糖
              B．干扰素--抗病毒、抗肿瘤
              C．融血栓剂--溶解血细胞
              D．白细胞介素--增强免疫力
              难度：中等
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            • 3． 临床上治疗大面积创伤时，可将经特殊处理的猪皮移植到患者的创面处，并在猪皮上开若干个小口植入患者的自体皮，待其生长并最终替换猪皮．研究表明，导入人P基因的转基因猪提供的“皮肤”可在移植后存活更长时间，能够保证自体皮充分生长．请回答问题：
              （1）如果将P基因通过    法直接导入猪受精卵中，一般情况下，猪不会表达P基因，原因是P基因在猪细胞中不能    ，因此需要构建基因表达载体．
              （2）操作成功的受精卵品要在无菌无毒的环境中培养，如何创造无菌无毒的环境    ．
              （3）通过    技术将早期胚胎移入代孕母猪的子宫内，可获得转基因猪．检测猪体细胞中P基因是否表达，在分子水平上采用的检测方法是    ．
              （4）若应用得到的早期胚胎，并从中分离出    ，用于医学硏究和治疗，则这种方法称为    ．
              难度：中等
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            • 4． 干扰素是动物或人体细胞受病毒感染后产生的一类糖蛋白，具有抗病毒、抑制肿瘤及免疫调节等多种生物活性．回答下列问题：
              （1）干扰素的作用机理是：干扰素作用于宿主细胞膜上的相应受体，激活细胞核中基因表达产生多种抗病毒蛋白，其中有些蛋白可通过激活    使病毒的RNA水解；有些则可与    （细胞器）结合，通过抑制病毒多肽链的合成发挥抗病毒作用．
              （2）利用基因工程生产干扰素的方法之一是：利用    酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件连接在一起构建基因表达载体，采用    的方法导入牛的受精卵细胞中，经胚胎早期培养至    期，移植入母体内发育成熟，即可获得能产生干扰素的转基因牛．
              （3）利用细胞工程也能生产干扰素，其设计思路是：将相应的免疫细胞和瘤细胞利用电激、PEG、    等方法诱导融合，再利用    培养基筛选出杂交瘤细胞，经细胞培养可获得大量干扰素．由于干扰素在体外保存困难，可利用蛋白质工程对干扰素进行改造，基本途径是：预期蛋白质功能→    →推测应有的氨基酸序列→找到对应的脱氧核甘酸序列．
              难度：中等
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            • 5． 下列有关基因工程操作的叙述中，正确的是（　　）
              A．用同种限制酶切割载体与目的基因可获得相同的粘性末端
              B．检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程操作的成功
              C．以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同
              D．用含抗生素抗性基因的质粒作为载体是因为其抗性基因便于与外源基因连接
              难度：中等
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            • 6． 下列生物的培育与生物工程技术应用不正确的组合是（　　）
              A．转基因植物--基因工程、植物组织培养
              B．转基因动物--基因工程、核移植、胚胎移植
              C．克隆动物--核移植、早期胚胎培养、胚胎移植
              D．试管婴儿--体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植
              难度：中等
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            • 7． （2016•盐城二模）用限制酶EcoRⅠ、KpnⅠ和二者的混合物分别降解一个1 000bp（1bp即1个碱基对）的DNA分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，凝胶电泳结果如下图所示．该DNA分子的酶切图谱（单位：bp）正确的是（　　）
              A．
              B．
              C．
              D．
              难度：中等
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            • 8． （2016•江苏二模）如图表示选用具有同一外源目的基因对某品种奶牛进行遗传特性改造的三种途径，下列有关叙述错误的是（　　）
              A．获得奶牛1通常采用显微注射法导入外源基因
              B．奶牛2体内不同组织细胞的基因型可能不同
              C．成功获得奶牛1、2、3表明三个受体细胞都具有全能性
              D．奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养
              难度：中等
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            • 9． 下列关于基因工程技术的叙述，正确的是（　　）
              A．切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列
              B．质粒是细胞内一种结构简单、能自我复制的细菌拟核DNA
              C．PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
              D．抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达
              难度：中等
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            • 10． 若某研究小组用普通绵羊通过转基因技术获得了转基因绵羊甲和乙各1头，具体见下表．
              绵羊性别转入的基因基因整合位置表现型
              普通绵羊♀、♂--白色粗毛
              绵羊甲♂1个A+1号常染色体黑色粗毛
              绵羊乙♂1个B+5号常染色体白色细毛
              注：普通绵羊不含A+，B+基因，基因型用A-A-B-B-表示．
              请回答：
              （1）A+基因转录时，在    的催化下，将游离核苷酸通过    键聚合成RNA分子．翻译时，核糖体移动到mRMA的    ，多肽合成结束．
              （2）为选育黑色细毛的绵羊，以绵羊甲、绵羊乙和普通绵羊为亲本杂交获得F1，选择F1中表现型为    的绵羊和    的绵羊杂交获得F2．用遗传图解表示由F1杂交获得F2的过程．
              （3）为获得稳定遗传的黑色细毛绵羊，从F2中选出合适的1对个体杂交得到F3，再从F3中选出2头黑色细毛绵羊（丙、丁）并分析A+和B+基因的表达产物，结果如图所示．不考虑其他基因对A+和B+基因表达产物量的影响，推测绵羊丙的基因型是    ，理论上绵羊丁在F3中占的比例是    ．
              难度：中等
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