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            • 1. 2015年,屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获奖.工业上青蒿素一般从青蒿植株中提取,产量低,价格高.基因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路.科学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗后,偶然发现一株高产植株.通过基因测序发现该高产植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变.
              (1)提取了高产植株的全部DNA后,要想快速大量获得该突变基因可以采用PCR技术,该技术的原理是    
              (2)如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段,用该双链cDNA进行PCR扩增,进行了30个循环后,理论上可以产生约为    个DNA分子,该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫做青蒿的    ,获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列    (填“相同”或“不同”).
              (3)将获得的突变基因导入普通青蒿之前,先构建基因表达载体,图l、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点.请回答:

              用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是    ,构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是    识别结合位点.
              (4)检测目的基因是否表达出相应蛋白质,应采取    技术.目的基因导入组织细胞后,通过    技术培育出青蒿幼苗.
            • 2. 如图是某转基因抗虫棉培育流程图,下列有关分析错误的是(  )
              A.①过程是在体外进行的
              B.毒蛋白基因的获取需要限制酶
              C.④过程依据的原理是植物细胞的全能性
              D.只要抗虫基因进入受体细胞,棉花就会表现出抗虫性状
            • 3. 目前通过基因工程,科学家把兔子的血红蛋白的信使RNA加入到大肠杆菌的提取液中能合成兔子的血红蛋白,这一事实证明(  )
              A.所有生物共用一套遗传密码
              B.蛋白质合成并不复杂
              C.兔血红蛋白基因进入大肠杆菌使之出现合成系统
              D.兔子与大肠杆菌的亲缘关系较远
            • 4. 请根据所学知识回答下列现代生物科技专题中的有关问题:
              (1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤,其中的核心步骤是    ;PCR技术扩增目的基因是基因工程中常用的技术手段,这一技术的原理是    
              (2)目前在生产中应用较多的胚胎工程技术是        和体外生产胚胎技术.大量的研究已经证明,受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生    反应,这为胚胎在受体内的存活提供了可能.
              (3)克隆动物实际上是用    方法得到的动物,该方法是将一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的    细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,最终发育为动物个体.
              (4)生态工程是实现循环经济最重要的手段之一,它所遵循的基本原理是    、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统学和工程学原理等.
            • 5. 为加快优良种牛的繁殖速度,科学家采用了以下两种方法:

              请据图的信息回答:
              (1)试管牛与克隆牛的培育过程中均用到的胚胎工程技术有    
              (2)方法一中用来促进B牛多排卵的激素是    ,体外受精时精子需先经    处理.
              (3)通过方法二生产F牛的生殖方式属于    
              (4)要培养高产奶率的转基因牛,一般将目的基因导入的受体细胞是    ;导入目的基因常用的方法是    ,转基因奶牛的乳腺细胞中含有大量与分泌物加工有关的细胞器有:    等.
              (5)在目前现有技术条件下,还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体,而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体,你认为原因最可能是    
              A.卵细胞大,便于操作
              B.卵细胞含有的营养物质多
              C.卵细胞的细胞质可使体细胞细胞核的全能性得到表达
              D.重组细胞才具有全能性.
            • 6. 回答下列关于基因工程的问题.
              外源基因需要导入受体细胞才能实现其表达功能.下图示一种外源基因导入受体细胞的方法,请据图分析回答:

              (1)图所示的导入方法称为    .在动物基因工程中,受体细胞通常采用    
              基因工程操作步骤中,需要从受体细胞群中筛选出已获得目的基因的细胞,下图①-③示一种筛选方法的过程.
              pBR322质粒含有两个抗性基因,分别是Amp(氨苄青霉素)抗性基因和Tet(四环素)抗性基因,其中在Tet抗性基因上有下列目的基因的插入位点(插入将导致Tet抗性基因功能性失活),请据图分析回答:

              (2)图中①过程所需的酶是    
              (3)经过①过程,pBR322质粒可能出现的两种结果A是        
              (4)②过程表示用含四环素(使细胞停止生长,但不致死)和环丝氨酸(使生长的细胞致死)的培养基中培养细菌甲,则培养结果C表示在培养基中可能存活的细菌包括    
              (5)若要进一步筛选出符合要求的受体细胞D,则③过程需要做的处理是(请参照过程②的方法)    
              基因工程中使用的Ⅱ型限制性核酸内切酶通常可以识别长度为4-8个核苷酸的特异序列.下列图示限制酶Sau3AⅠ对DNA片段切割的结果.

              (6)请据图分析,Sau3AⅠ的识别序列以及切割位点(用“↓”表示)是    
              下表列出了几种限制酶的识别序列及其切割位点,图1(含两个抗性基因的质粒)和图2(含目的基因的外源DNA)中箭头表示相关限制酶的酶切位点,请据图分析回答:
              限制酶XhoⅠBclⅠSalⅠBamHⅠXbaⅠ
              识别序列及酶切位点C↓TCGAGT↓GATCAG↓TCGACG↓GATCCT↓CTAGA

              (7)为了使目的基因和质粒实现定向连接和便于受体细胞的筛选,切割质粒的限制酶应选用    ,切割含目的基因的外源DNA的酶应选用    
            • 7. 若婴幼儿生长激素分泌不足会导致侏儒症,某科学团队利用多种现代生物技术通过奶牛乳腺生物反应器来生产人的生长激素.请回答下列问题.
              (1)鉴别受体细胞中是否含有目的基因,需借助基因表达载体中的    筛选受体细胞.   若要检测牛奶中是否含有生长激素可通过    技术检测.
              (2)若将人的生长激素基因导入牛的精子中,通常采用    法使精子获能,与发育到    期的卵母细胞进行受精作用.在胚胎的培养液中添加一定量的    ,可以防止培养过程中的细菌污染.
              (3)当胚胎发育到囊胚阶段,选取囊胚的    细胞做DNA分析,进行性别鉴定,筛选出    胚胎.为了提高胚胎的利用率,可将所选胚胎的    均等分割,再进行胚胎移植.
            • 8. 下列关于构建基因表达载体的相关叙述中,错误的是(  )
              A.需用限制性核酸内切酶和DNA连接酶
              B.必须在细胞内进行
              C.终止子是一段有特殊结构的DNA片段
              D.启动子位于目的基因的首端
            • 9. 毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关.获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图.

              (1)过程①中最常用的运载工具是    ,所需要的酶是    
              (2)在过程②中,用    处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞.在培养过程中,将成纤维细胞置于5% CO2的气体环境中,CO2的作用是    
              (3)在过程③中,用    处理以获取更多的卵(母)细胞.
              (4)在过程④中,对成熟卵(母)细胞进行    处理.
              (5)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是    .在胚胎移植前,通过    技术可获得较多胚胎.
            • 10. 目前,精子载体法逐渐成为具有诱惑力的制备转基因动物方法之一,该方法以精子作为外源基因的载体,使精子携带外源基因进入卵细胞受精.如图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程.请据图回答:

              (1)精子载体法过程中外源基因能够整合到精子的    上是提高转化率的关键,因为受精时只有精子的    才能进入卵细胞中.
              (2)过程②采用的是    技术.
              (3)利用转基因动物分泌的乳汁来生产药物的    反应器是科学家用药用蛋白基因与    的启动子等调控组件重组在一起,然后导入哺乳动物的受精卵中,最终生长发育成转基因动物.
              (4)过程③需要在    (至少写出两点)等条件下进行.
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