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            • 1． 尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：
              KH2PO41.4g
              Na2HPO42.1g
              MgSO4•7H2O0.2g
              葡萄糖10g
              尿素1g
              琼脂15g
              将上述物质溶解后，用自来水定容到1000m3
              （1）此培养基能否用于植物组织培养？    ，理由是    ．
              （2）培养基中氮源是    ，这种培养基在功能上属于    培养基，目的是只允许能合成的微生物生长，其他微生物均不能生长．
              （3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用    法进行接种．
              （4）在以尿素为唯一碳源的培养基中加入    ，使指示剂变红色，而筛选纤维素分解菌的方法是    法．
              难度：中等
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            • 2． （2016秋•成都校级月考）微生物的分离、培养和计数是现代生物工程应用中的重要环节．图为大肠杆菌分离和培养过程中部分操作示意图．请分析回答下列问题：
              （1）实验过程中对培养基、培养皿、实验操作者的双手所采用的灭菌、消毒方法依次是    、    、    ．
              （2）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是    ．
              （3）图示是利用    法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步    分散到培养基的表面．在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的原因是    ．
              （4）关于图示的操作方法和结果，叙述正确的是    ．
              A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌．
              B．划线操作须在火焰上进行．
              C．在5 区域中才可以提到所需菌落．
              D．在1、2、3、4、5 区域中划线前后都要对接种环灭菌．
              （5）植物组织培养所用的MS培养基和微生物培养所配制的培养基的主要区别是    ．某同学在进行组织培养过程中，发现只分裂而不分化出芽和根，可能原因是    ．
              难度：中等
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            • 3． 生物技术的广泛应用，不仅带来了较好的经济效益和社会效益，更使人们的生活变得更加丰富多彩．
              （1）工业生产上通常采用微生物发酵技术获得果胶酶，选用的微生物通常是    ，在提取果胶酶后，首先要检测    ，以便将其更好的应用与生产实践和科学研究．
              （2）微生物在果酒、果醋、腐乳、泡菜等食品加工方面应用广泛，其中与泡菜制作有关的微生物是    ．在果酒基础上酿制果醋的过程中，除需接种     （微生物）外，还必须保持    条件．
              （3）配制固体培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行    ，接种前要进行    ，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在    条件下进行．
              难度：较难
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            • 4． 已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶，脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产．回答有关问题：
              （1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用    染色．微生物A产生的油脂不易挥发，可选用    （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取．
              （2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以    为碳源的固体培养基进行培养．
              （3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用    直接计数，若要测定其活菌数量，可选用    法进行计数．
              （4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，    ℃条件下该酶活力最小，为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕    ℃设计后续实验．
              难度：较难
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            • 5． 尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：

              KH2PO41.4g
              Na2HPO42.1g
              MgSO4•7H2O0.2g
              葡萄糖10g
              尿素1g
              琼脂15g
              将上述物质溶解后，用自来水定容到1000m3
              （1）此培养基能否用于植物组织培养？    ，理由是    ．
              （2）培养基中氮源是    ，这种培养基在功能上属于    培养基，目的是只允许能合成    的微生物生长，其他微生物均不能生长．
              （3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用    法进行接种．
              （4）在以尿素为唯一碳源的培养基中加入    ，使指示剂变红色，而筛选纤维素分解菌的方法是    法．
              难度：较难
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            • 6． 运用所学知识回答下列与生物技术实践相关的问题．

              （1）自古酒就与人类生活息息相关．在图甲所示两发酵瓶中装入等量的葡萄汁进行果酒制作实验，若在A装置的通气口补充无菌空气，那么一段时间后，能获得葡萄酒的是    装置，发酵是否成功可用    对发酵产物进行检验确认．
              （2）图乙是胡萝卜素提取粗品鉴定结果示意图．点加提取样品的是    点，点加标准样品的是    点，该鉴定实验的方法叫做    ．
              （3）微生物培养时，如果想让培养基内只生长真菌，则可用含    的培养基；后期进行菌落统计时，一般选择菌落数在    间的平板进行计数．
              （4）与微生物培养相比，植物组织培养的培养基常需添加的植物激素是    ．
              难度：较难
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            • 7． 利用紫外线诱变选育高产β━胡萝卜素的三孢布拉霉负菌（单细胞真菌），未突变菌不能在含有浓度为10-5M的β━紫罗酮的培养基上生长．菌体随β━胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色．图甲为选育及提取获得β━胡萝卜素流程．

              （1）三孢布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是    ．
              （2）培养基中的葡萄糖为菌体生长提供    ；为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加    ．
              （3）进行③过程时，应选取    色的菌落接种至液体培养基．为筛选纯化β━胡萝卜素产量高的菌种，采取重复    （填图甲中数字）过程．
              （4）固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示．该同学的接种方法是    ；只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是    ．
              （5）过程⑥是    ，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品，结果发现颜色较浅，导致该现象的原因可能是萃取时，萃取剂使用量    ，提取的色素少．
              难度：中等
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            • 8． 为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制了如表培养基配方：
              蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水pH
              10g5g5g2g0.4g0.065g100mL7.2
              （1）该培养基所含的碳源有    ，其功能是    ．
              （2）该培养基所含的氮源有    ，其功能是    ．
              （3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是    ．
              （4）该细菌的同化作用类型是    ．
              （5）该培养基可用来鉴别哪种细菌？    
              A．霉菌        B．大肠杆菌        C．酵母菌        D．乳酸菌．
              难度：中等
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            • 9． 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．

              （1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行    处理．
              （2）要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中的培养基应具有的特点是：在     的培养基中加入    ．
              （3）在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是    ．
              （4）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是    ，有透明带菌落利用的氮源主要是    ，据此可筛选出目的菌．
              （5）若实验接种时用的是稀释涂布平板法，在统计菌落数目时得到4个平板，统计的数目分别为21、213、257、278，则对数据处理后取平均值计数为    ，该方法往往比活菌的实际数目偏    （高/低）．
              难度：中等
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            • 10． 胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：

              （1）筛选产胡萝卜素的酵母菌菌R时，可选用    或平板划线法接种．采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是    ．
              （2）培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供    和    ．
              （3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好    和    以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用    方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是    ．
              （4）纸层析法可用于鉴定所提取胡萝卜素，鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为    ．
              难度：中等
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