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            • 1. 人和哺乳动物的尿中含有尿素,大量尿素的存在会对环境造成污染.土壤中有些细菌含有脲酶,可通过降解尿素作为其生长的氮源.现对土壤中的这类细菌进行分离实验,请回答下列问题:
              (1)分离培养细菌时必须进行无菌操作,包括培养基和各种器皿都必须是无菌的,培养基常用的灭菌方法有    
              (2)将样液进行一系列的梯度稀释,然后接种培养.在稀释土壤溶液的过程 每一步都要在    旁进行操作.接种后的培养皿    于37℃的    中培养.
              (3)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌,从功能上划分该培养基属于      培养基.若培养基中存在有分解尿素的细菌,其菌落周围会出现红色环带,这是由于尿素被分解产生的    使pH升高,酚红指示剂产生的颜色变化,从而证明这一菌株可以尿素为氮源.变色区域越大,表明该菌株利用尿素的能力    
              (4)与全营养培养基中的菌落相比,以尿素为氮源的培养基中菌落数    
              A.多        B.少        C.相等        D.几乎为零.
            • 2. 工厂废水的妥善处理是减轻现代化工业水污染的重要举措.如图所示为筛选某种高效分解某化工厂的污水中有机化合物A的菌种的实验流程.请分析回答下列问题:
              (1)图中所配制的培养基应以    为唯一碳源,该培养基在功能上属于    培养基.
              (2)实验过程中,“振荡”的目的是    ,由此推断该目的菌的呼吸类型与乳酸菌的呼吸类型    (填“不同”或“相同”).
              (3)转为固体培养基时,常采用平板划线法或    进行接种,两种方法在此过程中所用的接种工具分别是        ,操作时对接种工具采用的灭菌方法是    灭菌.
            • 3. 请回答“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”有关问题
              (1)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有水、碳源、     和无机盐.
              (2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是        两种.在接种过程中,接种针或涂布器的灭菌方法是    
              (3)可以通过    来判断细菌是否分解尿素.土壤中的细菌之所以能够分解尿素,是因为它们能合成    
              (4)对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养,则大肠杆菌的增长呈现    型曲线增长.
            • 4. 纤维素分子不能进入酵母细胞.为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精,构建了含3种不同基因片段的重组质粒.下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图1.

              据图回答:
              (1)本研究构建重组质粒时可选用四种限制酶,其识别序列如图2.为防止酶切片段的自身连接,可选用的限制酶组合是        

              A.①②B.①③C.②④D.③④
              (2)设置菌株Ⅰ为对照,是为了验证    不携带纤维素酶基因.
              (3)纤维素酶基因的表达包括        过程.与菌株Ⅱ相比,在菌株Ⅲ、Ⅳ中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有    
              (4)在以纤维素为唯一碳源的培养基上分别培养菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ,菌株    不能存活,原因是    
              (5)酵母菌生成酒精的细胞部位是    ,产生酒精时细胞的呼吸方式是    .在利用纤维素生产酒精时,菌株Ⅳ更具优势,因为导入的重组质粒含有    ,使分泌的纤维素酶固定于细胞壁,减少因培养液更新而造成的酶的流失,提高酶的利用率.
            • 5. (2016•荆门模拟)为从土壤中筛选能有效降解有机化合物X的细菌,研究人员用化合物X、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选出能高效降解化合物X的细菌(目的菌).下图是从土壤中筛选出该细菌的过程示意图,下表是分离纯化的结果.请回答下列问题:
              记录项目:透明圈直径/菌落直径
              菌落编号123
              48小时1.62.83.0
              72小时2.21.25.0
              96小时2.31.24.2
              (1)培养基中的有机化合物X主要为目的菌提供    等营养要素.从土壤中富集能有效降解有机化合物X的细菌时,应选用    (填“固体”或“液体”)培养基.
              (2)配制成10-1浓度稀释液时,用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL,移人盛有     mL无菌水的试管中,并依次配制10 -2~10 -10的梯度稀释液.
              (3)在分离、纯化过程中,图中②、③过程接种的方法分别为    在倒平板前,应对玻璃器皿和培养基灭菌,灭菌方法是    
              (4)分析菌种的分离纯化结果,应选择为    号菌落进行扩大生产,原因是    
              (5)实验过程中还需配制空白培养基作为对照,其目的是    
            • 6. 当今社会大力提倡无纸化办公,但是每年仍然不可避免地产生大量废纸,其主要成分是木质纤维,人类正努力将其转化为一种新型能源-乙醇.如图是工业上利用微生物分解纤维素生产乙醇的基本操作流程.请回答相关问题:

              (1)图中①环节所需的微生物大多分布在富含    的土壤中,筛选该微生物的方法常用    ,为了筛选出较为“浓缩”的该种微生物,常用    (填“选择”或“鉴别”)培养基.
              (2)图中②环节获得的酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种成分,即C1酶、Cx酶和    ,前两种酶将纤维素分解成    
              (3)④过程要注意对接种器材进行    ,⑤环节利用的微生物是    ,在产生酒精的过程中发酵装置必须保持    
            • 7. 玉米(2N=20)是重要的粮食作物,经深加工可生产酒精、玉米胚芽油等产品.下面图甲表示玉米深加工流程,图乙表示为了获得玉米新品种常采用的一种育种方式,请回答下列问题.
              (1)玉米秸秆中的纤维素在纤维素酶的作用下最终被水解成葡萄糖才能供给酵母菌利用,纤维素酶是由3种组分组成的复合酶,其中的    可将纤维二糖分解成葡萄糖.纤维素分解菌能合成纤维素酶,人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌.分离纤维素分解菌常用的方法是    ;其实验流程是:土壤取样→选择培养→    →将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落.
              (2)使用选择培养基从土壤中分离纤维素分解菌,对培养基的要求是    .如果还要对土壤中该类微生物进行计数,则接种方法是    
              (3)玉米胚芽油不易挥发,宜选用压榨法或    法从玉米胚芽中提取.
              (4)在育种过程中,若改变图乙‚过程所使用的培养基中的    ,则可能不会形成愈伤组织,而是形成胚状体.若愈伤组织没有形成根,但分化了芽,其原因可能是    
            • 8. 反刍动物,如牛和山羊,具有特殊的器官--瘤胃,在瘤胃中含有多种微生物,其中许多微生物能以尿素作唯一氮源.以下示意图是从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物流程.

              (1)进行①过程的目的是    ;②过程所使用的接种方法是    .用该接种方法对微生物进行计数时,统计的菌落数往往比活菌的实际数目,原因是    
              (2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于    培养基,制备该培养基的步骤是:计算→    →灭菌→倒平板.由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌,接触空气后会死亡,因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备Ⅰ号培养基外,还要提供    的条件.
              (3)酶对化学反应的催化效率称为酶活性,图示的酶活性的高低可用        的减少量来表示.
              (4)萃取胡萝卜素的过程应避免明火加热,采用水浴加热的原因是    
              (5)如果要对具有优良性状的植物进行大规模种植可采用    方法,在对外植体进行接种前,需要进行制备MS 固体培养基和    两项工作.培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值    (填“高”或“低”)时,有利于芽的分化.
            • 9. 下列关于应用生物技术获得生物产品的过程,请回答下列问题:
              (1)酿酒时某同学尝试用罐头瓶制作果酒,在培养过程中,每隔12h左右将瓶盖拧松一次,此后再拧紧,这样做的主要目的,一是    ,二是避免氧气进入和杂菌污染.在酸性条件下,可用    来检测果酒发酵是否成功.如下图是采用纯化酵母菌培养的两种接种方法接种后培养的效果图.

              判断图A所用接种方法的依据是    ,图B的接种方法是    
              (2)大量扩增DNA时可用PCR技术,该技术利用了DNA的    原理,通过控制    来控制双链的解聚与结合.PCR扩增得到的DNA序列长度是固定的,原因是    
              (3)玫瑰在人们生活中具有多种用途.某同学在进行玫瑰组织培养时,可以选取生长旺盛的嫩枝做    ,并要进行    处理.
              (4)在玫瑰精油的提取实验中用    (方法)提取,收集的乳浊液水油分层,需向其中加入    . 要除去分液得到的油层中的水分,还需向其中加入无水    
            • 10. 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性.研究者从热泉嗜热菌样品中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示:

              (1)进行①过程的目的是    ,②过程所使用的接种方法是    法.
              (2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于    培养基,配制时仅以    作为唯一碳源;从物理状态上来说,Ⅱ号培养基属于固体培养基,配制时应加入    作为凝固剂.
              (3)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是    .一般对配制的培养基采用    法灭菌.
              (4)培养一段时间后,应从Ⅰ号培养基上挑出    的菌落,接种到Ⅱ号培养基上.
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