8.
有人尝试制备始旋链霉菌(能生产普那霉素的一种原核放线菌)的原生质体,并利用其孢子和原生质体进行选育普那霉素高产菌株的实验.采用酶解法制备始旋链霉菌原生质体时,先要明确酶解时间与原生质体制备效果间的关联.探究步骤如下:
第1步:取生长旺盛的始旋链霉菌菌丝,酶解后用一定量的缓冲液稀释后涂布在平板上,30℃培养7天后,统计菌落数.
第2步:计算时间对原生质体制备和再生的影响,绘制成下图1所示曲线.
请据图回答:
(1)本实验所用的酶,不适用于制备
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的原生质体.
A.大肠杆菌细胞 B.番茄叶肉细胞 C.酵母菌
(2)鉴定原生质体制备效果的常见方法是将部分原生质体放在
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(“等渗”、“高渗”或“低渗”)溶液中,观察其形态变化.而原生质体的计数统计常借助光学显微镜、盖玻片和
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等光学仪器.
(3)上述实验的第1步中,酶解后的稀释必须用缓冲液的原因是
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,若未经稀释,直接涂布可能造成的结果是
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(4)根据上图1可见,随着酶解时间增加,原生质体的再生率变化趋势是
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.结合酶解时间对原生质体制备率和再生率的影响,应当选择的最佳酶解时间约为
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min.
(5)用紫外线分别处理始旋链霉菌孢子、原生质体后,统计各组菌株的普那霉素产量,结果如上图2.诱变后效果最好的是丙组,可能的原因是
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