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            • 1. 创卫”是创建卫生城市的简称。“卫生城市”是一个城市综合功能和文明程度的重要标志。某同学欲利用所学习的微生物培养知识,通过实验证明痰液中含有细菌,来倡导同学们不要随地吐痰,为“创卫”添一份力。请回答下列问题:

              (1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物,该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl________、H2O等;该培养基中微生物所需的氮源来自________,制备该培养基的步骤是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板,其中灭菌常用的方法是_______________________________________________;培养基灭菌后,需要冷却到________ ℃左右才能倒平板,等平板冷凝后,还需要将平板倒置,主要目的是___________________________________________________________________________。

              (2)为了使实验更有说服力,某同学设置空白对照组和若干实验组,其中对照组的作用是____________________________________________________。若在某次调查中,某一实验组平板上的平均菌落数为39个,而空白对照组的平板上出现了9个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

              (3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目,统计结果往往比实际细菌的数目要低,主要原因是:_________________________________。

            • 2. 木聚糖酶系可以将半纤维素(一种多糖)转化为单细胞蛋白和其他有用物质。有些嗜热菌能产生耐热木聚糖酶,在食品工业上具有较高的潜在应用价值。现欲从温泉中分离能分解半纤维素的嗜热菌,并从中筛选木聚糖酶高产菌株,获得耐热木聚糖酶。回答下列问题:
              (1)实验中配制好的培养基灭菌通常使用______________________,牛奶常用巴氏消毒法,该方法的操作是_______________________________。 
              (2)取适量体积的样品涂布在富含__________且其为唯一碳源的固体培养基上,置于恒温培养箱中培养,菌落长出后,挑取单个菌落并进行一系列操作,然后在培养基上用__________法接种培养,进行菌株的__________。最后将得到的菌株接种到__________(填“固体”或“液体”)培养基中富集。 
              (3)将富集后的菌株接种于固体培养基上,待菌落长出后用0.1%的__________染色1h,再用1mol/LNaCl脱色。菌落周围会出现__________,筛选__________的菌落即为木聚糖酶高产菌株。
            • 3. 红梨醋饮属于绿色健康饮品,其制作流程如图:

              请回答:
              (1)可在酸性条件下用 ______ 与发酵产物反应,检测①过程是否成功.
              (2)在①过程进行旺盛时,②过程往往不能进行,原因是 ______
              (3)对②过程所用的微生物进行分离和纯化时,常用的划线工具是 ______ .在固体培养基上划线4次,至少需要灼烧划线工具 ______ 次.
              (4)为检测生产用水中的大肠杆菌含量,每次将200ml水样过滤后,取滤膜放在伊红美蓝培养基上,重复三次.将3个平板置于37℃恒温箱中培养24h后挑选 ______ 色的菌落进行计数.平板上目的菌菌落数分别为32、292和36,据此可计算出每升水样中的大肠杆菌数为 ______ 个.若采用显微镜直接计数法,计数结果会偏高,原因是 ______
              (5)桉树油对大肠杆菌有抑制作用,也可作为食品添加剂,其挥发性强,难溶于水,用桉叶提取桉树油常用
              ______ 法.
            • 4.
              红梨醋饮属于绿色健康饮品,其制作流程如图:

              请回答:
              (1)可在酸性条件下用 ______ 与发酵产物反应,检测①过程是否成功.
              (2)在①过程进行旺盛时,②过程往往不能进行,原因是 ______ .
              (3)对②过程所用的微生物进行分离和纯化时,常用的划线工具是 ______ .在固体培养基上划线4次,至少需要灼烧划线工具 ______ 次.
              (4)为检测生产用水中的大肠杆菌含量,每次将200ml水样过滤后,取滤膜放在伊红美蓝培养基上,重复三次.将3个平板置于37℃恒温箱中培养24h后挑选 ______ 色的菌落进行计数.平板上目的菌菌落数分别为32、292和36,据此可计算出每升水样中的大肠杆菌数为 ______ 个.若采用显微镜直接计数法,计数结果会偏高,原因是 ______ .
              (5)桉树油对大肠杆菌有抑制作用,也可作为食品添加剂,其挥发性强,难溶于水,用桉叶提取桉树油常用
              ______ 法.
            • 5.

              (一)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题。

              (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于________培养基。

              (2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即________和________。

              (3)筛选高效菌株时,可比较单菌落周围________________,____________说明该菌株的降解能力________。

              (4)细菌种群进化过程中,其主要作用的变异来源是_________________。


              (二)富集培养是微生物学中的最强有力的技术手段之一。主要是利用不同微生物生命活动特点的不同,制定环境条件,使仅适应该条件的微生物旺盛生长,从而使其数量大大增加。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物——对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。请分析回答下列问题。

              (1)①→③重复培养的目的是_____________________________。

              (2)⑤的菌落中大部分是降解________微生物。设置⑥的目______________。

              (3)⑤→⑥采用单细胞挑取法,将所选菌种接种到⑥的培养基中,在此操作过程中如何防止杂菌污染(至少写出两点)。_____________________________________________________。

            • 6. 幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素,在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下:请回答:

              (1)在生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生物的培养基,称做________。

              (2)配制培养基时,要加入尿素和________指示剂,这是因为Hp含有________,它能以尿素作为________源;若有Hp,则菌落周围会出现________色环带。

              (3)步骤X表示________。在无菌条件下操作时,先将菌液稀释,然后将菌液________到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得________菌落。

              (4)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原理是Hp能将14C标记的________分解为NH314CO2

            • 7.

              在日常生活中,一提到细菌、真菌及病毒这些微生物,人们往往首先想到它们的害处,其实,很多微生物对人类是有益的,它们与我们人类的关系非常密切,而且人类巳经应用微生物造福于我们的生活。请回答下列问题。

              (1)从自然界获得纯种酿酒酵母菌的基本程序:配制培养基→接种→培养→观察记录→纯化培养。

              ①采用平板划线法接种,开始接种时要灼烧接种环,目的是________________________。

              ②若葡萄汁中含有醋酸菌,在葡萄酒发酵旺盛时,醋酸菌能否将酒精转变成醋酸?____________________,原因是____________________。

              (2)在腐乳的制作过程中,有多种微生物参与了豆腐的发酵,其中起主要作用的是_____________。产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的_____________,_________可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

              (3)利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中选择出能分解纤维素的细菌,经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。土壤中富含各种微生物,将土壤浸出液接种到           培养基上,可得到能分解纤维素的细菌,实验室中获取纯净菌的常用方法有___________和__________。虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、________________。

            • 8. 在农业用地中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物 )在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度一定,该除草剂的培养基不透明)。



              (1)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是________,有透明带菌落利用的氮源主要是________,据此可筛选出目的菌。

              (2)若要统计某土壤样品中该活菌数目,宜采用__________________法。一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每毫升样品中的菌落数是__________个(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)。用这种方法测定的大肠杆菌菌落数比实际活菌数量_________,因为_                 _。

              (3)要鉴定分离得到的微生物,常需要借助生物化学的方法.如在以尿素为唯一碳源的培养基中加入______ ,可用来鉴定分解尿素的细菌;在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入______ ,可用来鉴定纤维素分解菌.如果观察到产生______ 的菌落,说明可能获得了纤维素分解菌.为了确定是纤维素分解菌,还需要进行_____ 的实验.

            • 9. 由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种,过程如图.
              (1)筛选可高效利用淀粉的工程酵母菌种需要配制 ______ 培养基,为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以 ______ 作为唯一碳源对培养基进行灭菌,应该采用的方法是 ______
              (2)②、③过程需要重复几次,目的是 ______ .为筛选出可高效利用淀粉的菌种,过程③最好采用的接种方法是 ______
              (3)在固体培养基上形成菌后滴加碘液,可以根据菌落周围产生 ______ 的大小来筛选可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种.
              (4)以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,接种 ______ 菌的发酵罐所产气体量较大,其原因是 ______
            • 10. 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性.研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示.

              (1)进行①过程的目的是 ______ ;②过程所使用的接种方法是 ______ 法.
              (2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于 ______ 培养基,仅以淀粉作为 ______ 源;从物理状态上来说,Ⅱ号培养基属于固体培养基,配制时应加入 ______ 作为凝固剂.
              (3)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是 ______ ;一般对配制的培养基采用 ______ 法灭菌.
              (4)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放 ______ 分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈;应挑出透明圈 ______ (大或小)的菌落,接种到Ⅱ号培养基.
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