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            • 1. 胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得,流程如下:

              (1)筛选产生胡萝卜素的酵母菌R时,可选用_______或平板划线法接种;采用平板划线法接种时需要先灼烧接种环,其目的是____________。

              (2)培养酵母菌R时,培养基中的蔗糖可为酵母菌R提供_____________;作为无机盐的硝酸盐还可提供_____________。

              (3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和________,以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用________方式加热以防止温度过高;萃取液浓缩前需进行过滤,其目的是_______________。

              (4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素,鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作为_________。

            • 2.

              回答下列有关微生物的相关问题:

              (1)在细菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑______、___________和渗透压等条件。细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、___________、___________等优点。

              (2)若用稀释涂布平板法计数某活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的_____________。

              (3)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择_____________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,此培养基属于_____________培养基。

              (4)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有______________________(答出两点即可)。

              (5)培养某细菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是__________________________。

            • 3.

              科学研究表明,氮素是水和土壤中重要的污染因子,氮肥经土壤微生物分解后产生的氨对雾霾的贡献率达20%以上,农业污染逐渐引起科学界和政府的重视。为研究土壤微生物对氮素的分解作用,某研究人员分别对所取土样进行分解尿素的细菌的分离纯化操作(A组)和土壤微生物计数操作(B组),过程如下图一,序号①~⑨表示实验步骤。

              (1)步骤①所用的小铁铲需采用___________法进行灭菌处理,称取土样时通常需在__________________________旁进行。

              (2)分析步骤③④所用的培养基的成分,最大的区别是______(成分)种类不同。

              (3)对分离出的细菌进行长期保存,常采用的方法是_____________。

              (4)图二所示的接种方法可以在图一的步骤_____(填序号)中采用,甲、乙、丙为划线的三个区域,为正确完成接种过程,接种环至少进行_____次灼烧灭菌。

              (5)步骤⑦中,对1 mL菌液进行系列稀释10、100、1000倍,分别经过步骤⑧的接种和培养后,观察到菌落的平均数依次为2860、257、23,则可推测适宜的土样稀释倍数为1000倍。原因是:_____________________________________________________________________________________。

            • 4. 微生物中有些细菌可分解原油,从而消除原油泄漏造成的海洋、土壤污染。下图为某研究小组设计的从土壤中分离原油分解菌的实验方案,请回答:

              ⑴菌样应取自______________环境,培养前需对培养基进行________处理。

              ⑵选择培养时,应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于________培养基。

              ⑶下图是纯化微生物培养后的效果图,请分析接种的具体方法:获得图A效果的接种方法是___________,获得图B效果的接种方法是_________________。


              ⑷该同学在利用图A所采用的接种方法纯化原油分解菌时,发现培养基上的菌落连成一片(不考虑杂菌污染),最可能的原因是____________________,应怎样操作才能得到理想结果?________________________________________。

            • 5.

              长木蜂有在蜂巢内储存蜂粮(主要是长木蜂咀嚼过的花粉)的习性,其储存的蜂粮在蜂室中能长期保存不变质。研究人员为筛选出蜂粮中具有抑菌作用的微生物,开展实验如下:

              (1) 配置培养基。称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl等营养物质,再加入____和适量的水,配置牛肉膏蛋白胨培养基,其中可提供碳源的有________。另配置适于乳酸菌生长的MRS培养基。 

              (2) 系列稀释操作。将一批盛有9 mL水的试管作____处理;从三个蜂巢采集蜂粮各1 g,分别加入含有9 mL水的试管中混匀,再进行梯度稀释处理。在此过程中,为使菌液与水混合均匀,可将移液管上的橡皮头(洗耳球)________;移液管不能重复使用的原因除了需要避免混合上一个稀释浓度的残留液会使稀释不准确外,还有原因是_________________。 

              (3) 涂布、培养和计数。将各稀释浓度的试管,分别吸取0.1 mL,在两种培养基上涂布均匀,并在适宜条件下培养。根据菌落的_______________________(至少写出三项)等特征初步判断微生物的种类。若在牛肉膏蛋白胨培养基上最多发现有51 种微生物生长,在MRS培养基上最多有17种微生物生长,则实际蜂粮中的微生物种类____(选填“可能”或“不可能”)大于68种。 

              (4) 筛选具有抑菌作用的微生物。用接种针挑取一种微生物的菌落,分别接种到富含青霉菌(A组)、枯草芽孢杆菌(B组)、啤酒酵母(C组)的培养基中,每组选取一个平板接种三个位点,实验结果见图。其中作为对照的是____组;分析实验结果,对该微生物抑制作用最弱的微生物是____。 

            • 6.

              人们的日常生活与传统发酵技术密切相关。请回答下列相关问题:

              (1)腐乳制作中主要利用了微生物产生的________酶和脂肪酶。

              (2)在制作果醋、腐乳、泡菜的过程中需要提供氧气的是_____________。在发酵产物制作过程中都需要培养微生物,为防止杂菌污染,需要对培养基和培养器皿进行灭菌,其中对培养基灭菌常用的方法是__________________法。

              (3)利用酵母菌酿酒时,一开始持续通入空气,导致酵母菌数量________(填“增多”、“不变”或“减少”),然后再密封,使酒精________(填“增产”、“减产”或“不产生”).

              (4)果酒发酵后是否有酒精产生,可以用________来检验,在_____条件下呈现______色。

              (5)纯化果酒制作的菌种时,利用________(填“固体”或“液体”)培养基。接种时常用的方法有____________法和稀释涂布平板法。

            • 7.

              传统发酵技术包括果酒、腐乳、泡菜的制作等,丰富了餐饮生活,根据下列要求回答问题:

              (1)腐乳制作的流程是:让豆腐上长出_____________→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。配制卤汤时,要将卤汤中酒的含量控制在________左右。把腐乳的制作过程看作是微生物的培养过程,则从物理性质看,制作腐乳的培养基属于____        ______。

              (2)在制作果酒实验中,某同学为研究发酵罐中酵母菌的生长状况,要取样统计分析,并测定pH。判断取样先后顺序的主要依据是_____    _____________。

              (3)制作泡菜时,利用的微生物是________________。制作过程中,若菜坛有裂缝,即使其他操作正确规范,实验也会失败。说明该种微生物的代谢类型是__________           ______。

              (4)传统发酵技术中,都没有接种菌种,也没有严格的灭菌,但都可以得到相应的发酵产物。其菌种来源于______________________________;

              (5)某同学制作果酒时,在发酵后期向发酵液中通入空气,并将发酵液置于适宜温度的环境中,结果发现发酵液中有_________________出现,这类微生物在糖类缺乏时可以使________________转化为___       ________,后者再转化为_________________。

            • 8.
              某研究小组从牛的瘤胃中采集样本,进行分解尿素的微生物的分离与计数.实验基本步骤如下:

              (1)分解尿素的微生物含有 ______ ,因此,配制培养基时以尿素作为唯一氮源,尿素会被分解成 ______ 使培养基的碱性增强.
              (2)配制培养基时,需添加琼脂,琼脂起 ______ 作用;培养基中添加 ______ 作为指示剂,可使目标菌落的周围产生红色环带.
              (3)对尿素溶液进行灭菌的最适方法是 ______ 灭菌.
              A.高压蒸汽 B.干热 C.添加抗生素 D.过滤 E.紫外线照射 F.70%酒精浸泡
              (4)该小组在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是 ______ ;然后将1mL瘤胃样液稀释1000倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板的菌落数分别为49、47和45.据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为 ______ ,理论上,统计的菌落数往往 ______ (低、等、高)于接种的实际活菌数目.
            • 9.

              【加试题】

              为研究某生物制剂(W)具有促进细菌B增殖的作用,请根据以下提供的实验材料,以细胞数变化为检测指标,提出实验思路,并预测实验结果。

              实验材料:培养瓶若干个、液体培养基、W、细菌B、细细胞计数板、显微镜等。

              (要求与说明:不考虑加入W后体积变化等因素;细胞计数的具体操作过程不作要求;培养过程中不更换培养液;培养液成分变化不利于细菌B生长不作要求;实验条件适宜)

              请回答:

              (1)实验思路:

              ①取细菌B,经稀释后得到菌液,在显微镜下用         进行计数,并记录。

              ②取菌液分别接种于以下两组培养瓶中,每组若干瓶。

              甲组:液体培养基

              乙组:         
              ③将上述两组样品培养一段时间后,分别取上述两组中的培养瓶内的菌液,在显微镜下用血细胞计数板分别进行计数,并        
                      
              ⑤对实验数据进行         
              (2)预测实验结果(设计一个坐标,用柱形图表示至少3次的检测结果):

              (3)分析与讨论

              ①培养过程中,细菌B的增长方式为           形增长。
              ②为提取细菌B内的酶,对该菌进行破碎时,应将其        

              A.置于蒸馏水中           B.用纤维素酶水解

              C.置于稀盐酸中           D.冷冻研磨


            • 10. 有病人感染B.subtilis而患病,选用25万单位抗生素X治疗该病人是不明智的做法,理由是 _____

              A.缺乏25万单位抗生素X的实验数据     

              B.避免抗生素滥用

              C.10万单位抗生素X对B.subtilis亦有作用 

              D.25万单位抗生素X会对人体细胞造成损害

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