[生物——选修1：生物技术实践]

生活中，部分食品或饮料与微生物的发酵密不可分。回答下列关于微生物的培养及其运用的问题：

（1）不同微生物对营养的需求存在一定差异，但都能归纳为4类营养，即水、________、氮源和________。

（2）为增加分泌高效果胶酶的微生物的浓度，应该用________（填写物理状态）培养基。探究不同微生物分泌的果胶酶的活性实验，所用材料是果汁，那么该实验的自变量是________。

（3）制备果酒时，发酵菌为________，该发酵菌能将葡萄糖转化成酒精和CO₂，如图是某同学设计的发酵装置，该装置的优点有________。

（4）制备果醋时，发酵菌在________（填“有氧、无糖”“无氧、有糖”或“有氧、有糖”）条件下，能将乙醇转化成________，进而转化成乙酸。

[生物——选修1：生物技术实践]

   β—胡萝卜素可在人体的小肠、肝脏等器官转化成维生素A，因此β—胡萝卜素可用于治疗因缺乏维生素A而引起的疾病。回答下列有关制备β—胡萝卜素和纯化三孢布拉霉的问题：

（1）工业生产上，提取天然β—胡萝卜素的方法主要有三种，一是从植物中提取，二是从大面积养殖的________中获得，三是利用微生物的发酵生产。

（2）胡萝卜中富含β—胡萝卜素，从胡萝卜提取β—胡萝卜素的方法为________。影响该方法的主要因素是________，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、________等条件的影响。

（3）三孢布拉霉是一种可用于生产β—胡萝卜素的霉菌，培养三孢布拉霉时，培养基中一定要含有水________、________和无机盐等营养成分。

（4）纯化兰孢布拉霉时，固体培养基上菌落的分布情况如下图1、图2所示，则图1、图2分别是采用________法和________法接种的。

[生物——选修1：生物技术实践]

生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。请分析回答问题：

（2）实验需要振荡培养，原因是                  。转为固体培养时，常采用              的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

（3）在实验过程中：①培养基、培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶、吸管；③瘤胃中液体．其中需要灭菌是    填序号）．

（4）分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．甲同学实验结果差异的原因可能有       （填序号）①取样不同②培养基污染③操作失误④没有设置对照

（5）以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后，加入指示剂后变红色，说明“目的菌”能分解尿素．理由是                                       。

一、[生物——选修1：生物技术实践]

大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。下面是其培养基配方：

回答下列问题：

（1）该培养中，蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养有________和维生素。从物理性质来看，该培养基属于________培养基。

（2）对该培养基进行灭菌时，可采用________法。在接种大肠杆菌前，需先将灭菌后的空白培养基放在恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成，其目的是________。

（3）为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为________的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是________。

二、[生物——选修3：现代生物科技专题]  

据报道，尽管存在巨大争议，世界上首例“三亲婴儿”仍然于2016年4月在墨西哥诞生。三亲婴儿的培育技术路线如下。

回答下列问题：

（1）三亲婴儿培育技术中，过程A使用的技术是________；在体外受精前需对精子进行________处理；由“受精卵→三亲婴儿”过程中，需用到的胚胎工程技术有早期胚胎培养和________。

（2）利用三亲婴儿培育技术可以避免三亲中________（填“捐献者”、“母亲”或“父亲”）中的________（填“常染色体上”、“性染色体上”或“线粒体中”）的基因缺陷传给孩子。

（3）三亲婴儿与体细胞克隆动物多利羊在遗传物质来源上的主要区别是________。

【生物——选修1生物技术实践】

  人们希望能借助纤维素酶将地球上最丰富、最廉价的可再生资源纤维素转化为能直接利用的能源和资源。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取．某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→（      ）→鉴别培养。

（1）请补充题干“（ ）”中的实验流程： ；找不到合适的取样环境，可采取的办法是                                                。

（2）选择培养的目的是                              ；研究人员用纤维素、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基进行培养，其中加入的纤维素为微生物的生长提供 。

（3）为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以培养基上加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用 法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生                            的菌落作为菌种进行扩大培养。

（4）扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是180、200、160。则样品中微生物的数量为                       个/mL。该统计结果                  (低于、高于)实际值。

[生物——选1生物技术与实践]某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后，对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌，当培养基温度下降到50℃时，在酒精灯火焰附近倒平板，待培养基冷却至室温，按下表处理：

将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2～3天，观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题：

（1）上述实验的实验目的是          。若E组的培养基表面有菌落生长，说明了               。

（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长提供          和      。在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了                 。

（3）实验过程特别强调温度控制，请简要说明下列温控措施的目的：                                         

①“待培养基冷却至室温”的目的有                                             。

②“将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是                                   。

（4）培养微生物时将培养皿倒置的目的是                                            。实验结束后，对使用过的培养基应进行                      处理。

[生物—选修3：现代生物科技专题]

略

【生物——选修1：生物技术实践】

科研人员以秸秆为原料进行酒精的制备，大致流程如图所示。回答下列问题：

（1）对采集的土样进行稀释的目的是         。有时需要在梯度稀释前进行选择培养，其目的是                     。

（2）常用的微生物接种方法有平板划线法和           。用分离得到的纤维素分解菌培养液进行数量测定，在稀释倍数为10⁵对应的培养基中测定平板上菌落数的平均值为26，则每毫升样品中的纤维素分解菌个数是（接种液的体积为0.2mL）        。

（3）经过③的培养，可以得到多种纤维素分解菌，应该在鉴别培养基上选取         的菌落进行扩大培养，从中提取的纤维素酶活性高。

（4）经⑤、⑥步骤后得到的糖液中的糖是             ，⑦过程常用的微生物是           

        ，⑦过程的气体条件是                    。

[生物——选修1：生物技术实践]

已知尿素分解菌合成的脲酶能将尿素分解成氨。回答下列问题：

(1)从土壤中分离尿素分解菌时，首先要进行选择培养，该过程使用的培养基中要添加____________作为唯一氮源；制备上述培养基时，在倒平板之前要进行灭菌处理，常用的灭菌方法是____________；而对接种环等金属用具常用的灭菌方法则是____________。

(2)接种尿素分解菌后的培养基需要倒置培养，原因是____________。若采用稀释涂布平板法检测土壤样液中的尿素分解菌含量，在涂布接种前，应随机选取若干个灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是____________；然后，将1mL样液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和60，据此可得出每升土壤样液中的活菌数为____________。

(3)鉴别培养基中是否存在尿素分解菌时，可在培养基中加入____________指示剂；如果有尿素分解菌存在，则培养基中该菌落的周围会出现红色。

[生物—选修1 生物技术实践]

   某生物兴趣小组的同学，利用洗衣机内桶背面的污垢进行了相关实验。下图是某同学分离和培养洗衣机中微生物的部分操作步骤和实验结果示意图。

（1）图1所示的是制各固体培养基时的实验操作步骤之一，该操作称为________。

（2）在培养洗衣机中细菌的实验中，应在接种前检测固体培养基是否被污染，具体检测的方法是________。

（3）图2是平板划线法接种操作示意图，操作顺序是A→B→________（用字母和箭头表示）；以上操作中存在错误的步骤是________（用字母表示）。

（4）将以上接种后的平板置于培养箱中培养时需倒置，原因是________。

（5）在检测洗衣机的污垢中是否含微生物时，也有同学先将污垢制成一定浓度的水样溶液，然后用移液枪取0.1ml菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固体培养基的表面进行培养，这种方法称为________。经一段时间培养后，图3中发现有纤维素分解菌，筛选纤维素分解菌的方法是________。