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            • 1． 回答有关微生物的问题．
              Ⅰ、凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶．培育产高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向．图1为产高酶活力凝乳酶的枯草芽孢杆菌培育过程．

              （1）枯草芽孢杆菌的芽孢是    ．
              A．休眠体    B．营养繁殖体    C．孢子        D．营养体
              （2）图1所示的b过程的目的是为    ，接种用的平板培养基在制备时需注意的是    （多选）．
              A．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板
              B．倒好的培养基和培养皿要进行高压灭菌处理
              C．等到平板培养基冷却凝固后才可以盖上培养皿的皿盖
              D．待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置
              Ⅱ、在35℃、40分钟内能凝固1mL10%奶粉所需的酶量为一个酶活力单位（U）．图2表示图1中提取得到的各种凝乳酶活力检测结果．
              （3）据图2所示，酶催化能力最强的是    组，而各组酶催化能力存在差异的原因是    ．
              （4）A2、A5组酶活力与A0组芽孢杆菌相同，两位同学对此做出了推测：
              ①同学甲：A2、A5组芽孢杆菌可能未发生基因突变，用    技术检测即可证实．
              ②同学乙：A2、A5组与A0组酶活力虽然相同，但也可能存在不同的基因突变，理论上的解释是    ．
              难度：较难
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            • 2． 分析有关微生物的资料，回答问题．
              烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染．比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物．临床使用时，有时需要做细菌耐药实验．实验时，从病人身上获取少量样本，按下列一定的实验步骤操作，以确定病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性．获取绿脓杆菌单菌落
              （1）配制培养基．主要步骤是计算→称量→溶化→    →分装→倒平板．可用牛肉膏蛋白胨培养基培养绿脓杆菌，其培养基中的是否还需加入生长因子？理由是    ．
              固体培养基中常用琼脂作凝固剂，理想的凝固剂应具有的特点是    ．（多选）
              A．含有某些特殊的营养物质
              B．消毒灭菌不会改变其特性
              C．能被微生物分解和利用
              D．微生物生长温度范围内保持固体状态
              E．配制方便且有良好的透明性
              （2）图2所示接种方法为    法，这种方法的主要目的是使接种物    ．在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是    ．   检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感度
              （3）分析图3中的实验结果，说明绿脓杆菌对    类抗生素敏感，判断的理由是    ．如果你是医生，建议患者最好选用    抗生素．
              难度：较难
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            • 3． 下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法中，错误的是（　　）
              A．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离
              B．测定土壤中细菌总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同
              C．如果得到了2个以上菌落数目在30～300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数
              D．牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落
              难度：较难
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            • 4． （2016•宝山区一模）植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解．刚果红（CR溶液）可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应．用含有CR的培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的透明圈．
              为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了如下培养基（成分见下表）：注：“+”表示有，“-”表示无．
              酵母膏无机盐纤维素粉琼脂CR溶液水
              培养基+++-++
              （1）据表判断，培养基    （“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是    ；配制培养基时，在各种成分都熔化后灭菌前，要进行的是    ．实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是    ．
              （2）在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是     （多选）．
              A．酒精灯        B．培养皿          C．显微镜         D．无菌水
              E．无菌滴管      F．接种环          G．玻璃刮铲
              （3）有同学在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落如图1． 图中降解纤维素能力最强的菌株是    ．
              （4）教师用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4，在不同温度条件进行纤维素分解发酵，测得发酵液中酶活性的结果见图2，推测菌株    更适合夏季分解植物桔杆，理由是    ．
              难度：较难
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            • 5． 酿酒过程中若操作不慎，所酿的酒可能变酸．分析回答：
              （1）酿酒所需的微生物是    ，产生的酒精可以与     （试剂）发生显色反应．
              （2）在变酸的酒的表面观察到的菌膜是    在液面大量繁殖而形成的．若要对该菌进行初步分离纯化，比较便捷的操作是：采用    法（填“平板划线”或“稀释涂布平板”）把它们接种到    （填“固体”或“液体”）培养基上，经培养得到肉眼可见的    ．
              （3）实验室中常用    法对培养基及器皿进行灭菌．不同培养基的具体配方不同，但一般都含有水、    、    和无机盐．
              难度：较难
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            • 6． （2016•奉贤区一模）I．培养基的配制与培养是微生物实验中的一个重要环节．
              （1）图1所示的是制备固体培养基时的实验操作步
              骤之一，一般称为    ．配制培养基时各种成分在熔化后分装前必须进行    ，培养基在接种前要进行    灭菌，灭菌是否彻底或是否被污染需要检测，方法是    ．
              Ⅱ．从自然菌样中筛选理想菌种的步骤是：采集菌样    富集培养    纯种分离．
              （2）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．培养嗜盐菌的菌样应从    环境采集．
              （3）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择    的培养基，并在    条件下培养．
              （4）图2和图3是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，获得图2效果的接种方法是    ，获得图3效果的接种方法是    ．
              难度：较难
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            • 7． （2016•嘉定区一模）Ⅰ．细菌常被应用于生产生活中，如有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的细菌．
              （1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以    为唯一碳源的固体培养基上．为筛选出高效菌株，可比较单菌落周围清晰区域的大小．一般情况下，如图中清晰区域越大说明    ．
              Ⅱ．另一同学将第一步筛选得到的甲、乙、丙三种细菌分别接种到A、B、C三种培养液中，经培养后分别测得它们繁殖一代所需的时间，结果如表所示：
              培养液成分繁殖一代所需的时间（分钟）
              甲乙丙
              A．葡萄糖、NaCl、PO43-、MgSO443100-
              B．葡萄糖、NaCl、PO43-、MgSO4、8种氨基酸2840-
              C．葡萄糖、NaCl、PO43-、MgSO4、19种氨基酸252580
              注：“-”表示细菌没有生长．
              （2）在A培养基中增殖较快的细菌是    ．丙细菌可以在C培养液中繁殖却无法在B培养液中繁殖，原因是    ．
              （3）由于微生物的营养类型复杂，不同的微生物对营养物质的需求是不同的．如果培养能进行光合作用的微生物，培养基中的营养物质是    （多选题），
              A．碳源    B．氮源    C．生长因子    D．无机盐     E．水
              Ⅲ．下面是有关某细菌G的四项实验：
              实验1：将G接种于一般培养基上，结果出现菌落．
              实验2：用一定剂量的紫外线处理G，产生突变种g1．将g1接种于一般培养基后，不出现菌落；但在培养基内添加营养物质甲后，就出现菌落．
              实验3：用另一剂量的紫外线处理G，得突变种g2，将g2接种于一般培养基后，也不出现菌落；但在培养基内添加营养物质乙后，就出现菌落．
              实验4：将g1和g2一起接种于一般培养基上，数日后出现菌落．
              （4）细菌g1和g2分别接种于一般培养基，均不能生长．其原因是用紫外线处理导致细菌G发生了    ，从而缺乏合成营养物质甲或乙的酶．
              A．基因突变     B．基因重组     C．染色体畸变     D．不可遗传变异
              （5）实验1至3表明，物质甲和乙均是细菌G在代谢过程中产生的代谢产物．在实验2和3 中，它们是作为    加入一般培养基的．
              A．碳源     B．氮源        C．生长因子      D．无机盐
              （6）实验4中出现菌落的原因可能是    ．
              难度：较难
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            • 8． 硝化细菌包括亚硝酸菌和硝酸菌，广泛存在于通气性较好的土壤中，在自然界氮循环中具有重要作用．土壤或水体中的有机物（如动物的排泄物或动植物的尸体）在分解过程会产生对动物毒性很强的氨，硝化细菌可将氨或铵盐氧化为易被植物吸收的硝酸盐．具体过程如图1：

              （1）根据上述材料可知，硝化细菌在生态系统中的营养类型是    ．
              A．自养需氧型   B．自养厌氧型   C．异养需氧型   D．异养厌氧型
              （2）硝化细菌通常以    方式增殖，当水体过于纯净时，硝化细菌会形成休眠体，这种休眠体被称为    ．
              （3）对于混有硝化细菌、蓝细菌和大肠杆菌的悬浮液，可利用选择培养基进行微生物筛选．在筛选硝化细菌时，其培养基成份包括    ．
              （以下材料供选择：H2O、葡萄糖、纤维素、牛肉膏、（NH4）2SO4、KNO3、无机盐、琼脂、伊红-美蓝染料），接种后并培养．制备培养基时，灭菌与调pH值的先后顺序是    ．如利用上述培养基筛选大肠杆菌菌落，则应另外添加的成份是    ，菌落特征为    ．
              （4）将采集自养殖池中的水样1ml稀释100倍，然选取稀释后的水样1ml，接种于上述硝化细菌选择培养基上培养．该实验接种所使用的工具是    ．一段时间后观察菌落并计数，实验重复三次结果如图2，则该养殖池每毫升水含有硝化细菌    个．
              难度：较难
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            • 9． 1中含有链霉素，其它培养基中不含链霉素．请据实验回答：

              （1）将原始对链霉素敏感大肠杆菌K12菌种涂布在培养皿1的表面培养，接着通过右图“印章”将培养皿1中的菌群“印”在培养皿2、3上培养．“印章”位置保持不变．培养皿2、3根据其功能，分别称为    培养基、    培养基．
              （2）培养基3的A点处有菌落生长，将培养基2中相应的A点位置的菌落上挑出少量移入培养基4中．如图反复几次实验．请根据实验现象解释“微生物的突变是自发的还是环境因素导致的”：    ．
              （3）要分离出单个菌落，除了本实验中的涂布法外，还可以用    法．
              （4）上述不含链霉素培养基通常使用的是    ，下表是另一种培养基配方，该培养基具有    作用．
              成分KH2PO4Na2PO4MgSO4•7H2O葡萄糖尿素琼脂
              含量1.4g2.1g0.2g0.0g1.0g15.0g
              （5）现有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响，结果如下表所示．根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是    ．
              物质
              突变体              		培养基中加入的物质
              ABCDEF
              1---+-+
              2-+-+-+
              3-----+
              4-+++-+
              5++++-+
              难度：较难
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            • 10． 阅读资料，完成后面的问题．
              资料一：单细胞蛋白（ single cell protein，SCP）是指通过培养大量细菌、酵母、真菌或藻类，从中提取出的蛋白质或生物菌体，可直接作为一种人和动物的蛋白来源添加到人类食品 和动物饲料中．
              资料二：对柑橘果实加工后剩下的新鲜皮渣处理成为许多加工厂亟需解决的问题，柑橘皮渣含大量果胶、纤维素和半纤维素，并且可能作为一种发酵基质．
              资料三：有科学家设想可以柑橘皮渣为原料，筛选合适的微生物和提供适宜发酵条件，生产单细胞蛋白质来作为动物饲料使用．
              （1）单细胞蛋白可直接作为蛋白质来源添加到动物饲料的原因是蛋白质是细胞    （干重，鲜重）中含量最高的物质．
              （2）柑橘皮渣中的纤维素可以为微生物的培养提供    ．
              （3）我们分别使用四种类型的酵母进行发酵，并测定发酵前后的粗蛋白和真蛋白含量得到下表：

              从表中来看，有3种酵母均可显著提高发酵产物的粗蛋白质和真蛋白质含量，从粗蛋白质提高程度看，以    （填单株酵母菌株编号）效果最好，但以真蛋白质来看，则以    最好．
              （4）进一步研究表明，使用酵母和霉菌混合发酵的效果更好，其原因可能是混合发酵时，霉菌  产生的    酶和    酶可以分解发酵原料中细胞壁成分，其分解产物  除了可以保障自身生长外，还可促进酵母生长．
              （5）以下为研究发酵条件的部分实验，在这三组实验中，自变量为    ，无关变量是    
              难度：较难
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