下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

(1)从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于____________。

(2)若根据用途划分，该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分必需怎样更改？_____________。

(3)在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基进行________。

(4)图1和图2是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是：________和_________，

(5)以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有________。

A．制作果酒　　B．由果酒制作果醋    C．制作泡菜     D．制作腐乳

酸菜，古称菹，《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答：

（3）在实验室中可采用下图所示的________法进行菌种纯化，在下图中 ______（填图中序号）区域更易获得单菌落．

（I）大肠杆菌是与我们日常生活联系非常密切的细菌，请回答有关检测饮用水中大肠杆菌的问题：

（1）检测饮用水中大肠杆菌的含量时，通常将样品进行一系列的梯度稀释，将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，然后记录菌落数量，这种方法称为_____________。判断下面所示的4个菌落分布图中，不可能是用该方法得到的是__________________。

（2）用上述方法统计样本中菌落数时是否需要设置对照组？__________（填“需要”或“不需要”），其原因是需要判断培养基___________，对于固体培养基应采用的检测方法是将________________的培养基在适宜的温度下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。

（3）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行________（填“消毒”或“灭菌”）处理；操作者的双手需要进行清洗和________________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使其内蛋白质变性，还能损伤它的____________的结构。

（4）检测大肠杆菌实验结束后，使用过的培养基及其培养物必须经过________________处理才能丢弃，以防止培养物的扩散。

35.（II）   根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

（1）限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________和________。

AATTC……G

G……CTTAA

为使载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性核酸内切酶切割，该酶必须具有的特点是________。

（3）反转录作用的模板是____________，产物是__________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术。

（4）基因工程中除质粒外，________和______也可作为载体。

（5）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是_________________________。

土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验：

实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈(如右图)，透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值( D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。

实验步骤：

步骤1　取某地区土样5 g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1 mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72 h。

步骤2　在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3～4 d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株(如下表)。

分析回答：

(1)从物理形态看，培养基A属于________培养基。培养基中磷源应该是________。

(2)步骤1中接种方法是________，步骤2中接种环的灭菌方法是________。

(3)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是________。

(4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37℃、200 r·min^－1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到如图所示曲线。  

①用摇床进行培养的好处是__________________。

②结果表明最优良的解磷菌株是________。

（1）Ⅰ号培养基中应加入     ，以便挑选出能产生高温淀粉酶的嗜热菌。从Ⅰ号培养基中挑选     菌落接种到Ⅱ号培养基中。

（2）②过程所使用的接种方法是      。如果不经过①过程，直接将采集的样品进行接种培养，可能出现的结果是      。

（3）Ⅰ、Ⅱ号培养基中接种菌种后，应该置于     的恒温培养箱中培养，培养皿要倒置的原因是     。

（4）在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该酶的最佳温度范围进行测定。下图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到的数据为酶的热稳定性数据，如曲线②。根据实验结果分析：80℃并不是该酶使用的最佳温度，原因      。曲线②35℃数据点是在     ℃时测得的。

(一)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题。

(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。

(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和________。

(3)筛选高效菌株时，可比较单菌落周围________________，____________说明该菌株的降解能力________。

(4)细菌种群进化过程中，其主要作用的变异来源是_________________。

(二)富集培养是微生物学中的最强有力的技术手段之一。主要是利用不同微生物生命活动特点的不同，制定环境条件，使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其数量大大增加。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物——对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。请分析回答下列问题。

(1)①→③重复培养的目的是_____________________________。

(2)⑤的菌落中大部分是降解________微生物。设置⑥的目______________。

(3)⑤→⑥采用单细胞挑取法，将所选菌种接种到⑥的培养基中，在此操作过程中如何防止杂菌污染(至少写出两点)。_____________________________________________________。

下图表示微生物培养与利用的相关实验技术，请回答下列问题：

 (1)在培养基的制备过程中，A表示      ，B表示灭菌，常用的方法是      。

（1）D是微生物接种最常用的方法之一，它包括         和         两步操作。

（2）在筛选土壤中分解尿素的细菌时，所用培养基以尿素作为       ；在统计菌落数目时，一般选择菌落数在       的平板进行计数。若要对分离的菌种作进一步的鉴定，可在选择培养基中加入       指示剂，若指示剂变       ，则可初步鉴定该种细菌能够合成       ，分解尿素。

（3）在纤维素分解菌的筛选实验流程中，F表示        。

（1）微生物的消毒和灭菌：在微生物培养中，对培养基常用              法进行灭菌；如果要检测培养基灭菌是否彻底，可以采用的方法是                       观察培养基上是否有菌落产生。

（2）微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精，请写出该过程的化学反应式：                    。在果醋制作时，运用醋酸菌在         和糖源充足时，将葡萄糖分解成醋酸。

（3）微生物的接种：微生物的接种方法很多，最常见的是          和            。

→→→→

(1)在生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生物的培养基，称做________。

(2)配制培养基时，要加入尿素和________指示剂，这是因为Hp含有________，它能以尿素作为________源；若有Hp，则菌落周围会出现________色环带。

(3)步骤X表示________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液________到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得________菌落。

(4)临床上用¹⁴C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴C标记的________分解为NH₃和¹⁴CO₂。

某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物 A 。研究人员用化合物 A 、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物 A 的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。

（1）培养基中加入化合物 A 的目的是             ，这种培养基属于       培养基。 

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的           。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是               。

（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是                 。 

（4）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是__________，操作时采用       灭菌的方法。 

（5）某同学计划统计污水池中 “ 目的菌 ” 的活菌总数，应用             方法统计，他选用 10^-4 、 10^-5 、 10^-6 稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了 3 个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是                ，此对照实验的目的是                              。