完成下列相关填空

（一）某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂，开展了产该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下图所示。

（1）土壤悬液先经80℃处理15分钟，其目的是筛选出             。

（2）在无菌条件下，将经过处理的土壤悬液进行            ，然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到单菌落，其周围出现透明水解圈，圈的直径大小与           强弱相关。

（3）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中         的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高                的利用率。

（4）利用物理或化学方法将植酸酶固定在          的介质上称为固定化酶。实验过程涉及两次蒸馏水洗涤反应柱的操作，其中第一次洗涤的目的是除去             。

（二）下图为绵羊多莉克隆过程，请回答有关问题。

（5）步骤1中若要获得较多数量的卵细胞，通常对母羊注射相关激素使其超数排卵。步骤2可通过降低           浓度，实现对乳腺细胞的营养限制性培养，可以得到大量的          期细胞，从而实现细胞分裂同步化。

（6）步骤3中科研人员采用         技术进行细胞融合，步骤4通过胚胎体外培养获得胚胎，待发育至              胚胎时进行移植，通常移植至代孕母羊的          部位。

（7）若要将目的基因导入乳腺细胞中，在扩增目的基因时，除利用PCR技术外，还可将目的基因所在的重组载体导入大肠杆菌中，利用大肠杆菌  ▲ 使其扩增。

（8）为获得大量的上述克隆羊，可用胚胎成纤维细胞进行体细胞克隆。因为胚胎成纤维细胞可进行           培养，理论上可获得无限只克隆羊。

【选修1 生物技术实践】

酵母菌与人类的关系密切，是一种单细胞真菌，在有氧和无氧环境下都能生存，属于兼性厌氧菌，是工业上最重要，应用最广泛的一类微生物，在酿造、食品、医药工业等方面占有重要地位。

（1）在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。酒精发酵时，一般将温度控制在＿＿＿＿＿；在＿＿＿＿＿＿＿＿的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物无法适应这一环境而受到抑制。

（2）野生酵母菌制酒效率低，为了筛选出高产酒精的酵母菌株，某生物兴趣小组设计了实验方案（略），请回答有关问题：

①培养基的配制：常用马铃薯葡萄糖培养基，培养基中需添加了青霉素，其目的是＿＿＿＿＿；培养基灭菌前要将pH调至＿＿＿。

②酵母菌的液体培养与计数：对培养液中的酵母菌逐个计数是非常困难的，常采用＿＿＿＿＿的方法；发酵过程中检测酵母菌数量可采用＿＿＿＿＿＿法或稀释涂布平板法计数。

③酵母菌的分离纯化：分离纯化的方法很多，除稀释涂布平板法外，＿＿＿＿＿＿也是一种常用的接种方法，通过这种方法得到的菌落数不能用来表示一定样品中的酵母菌数，因为＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（3）胡萝卜素是一种常用的食用色素，可从产胡萝卜素的酵母菌菌体中提取获得，流程如下：

　　萃取的效率主要取决于＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响；将提取的胡萝卜素粗品通过＿＿＿＿进行鉴定。

选料→？→粉碎→灭菌→接种→发酵→？→果酒

(6)果酒制作是否成功，需发酵后用____________来鉴定，在______条件下，该物质与酒精反应呈现______色。

关于传统发酵技术在生产生活中的广泛的应用，请回答下列问题：

（1）苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的。酵母菌的呼吸代谢途径如下图所示。

①图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的_______中进行，其产物乙醇与________反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的_________中进行。与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度________。

②第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在_________条件下才能完成。

（2）豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并在32 h内定期取样观测发酵效果。回答下列问题：
①该实验的自变量是_________________、____________________。
②若发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好，说明该发酵菌的代谢类型是_____。
③如果在实验后，发现32 h内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵的最佳时间；若要确定最佳发酵时间，还需要做的事情是___________。

④从大豆到豆豉，大豆中的成分会发生一定的变化，其中，蛋白质转变为___________，脂肪转变为_____________。

（3）回答下列有关泡菜制作的问题：

①制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其主要目的是____________。

②泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有食盐用量、________和________等。

③从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是______________。

回答下列有关传统发酵技术的问题：

（1）酵母菌的酒精发酵过程一般控制在_____________温度范围，最适合酵母菌繁殖。果醋制作过程中出现的白沫原因是________________________。

（2）民间制作腐乳时，豆腐块上生长的毛霉来自____________________。制作腐乳的卤汤中通常要加入料酒、黄酒等，含量一般控制在12%左右，其目的是________________。

（3）影响泡菜制作的因素有__________________。从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是_______________。

回答下列与果酒、果醋、腐乳制作有关的问题：

（1）果酒的制作需要以______作为菌种，与醋酸发酵的醋酸菌相比，该生物在代谢方式上的区别是_________________________________。

（2）在果醋制作过程中．醋酸菌将果酒制作的产物乙醇先变为_________，再将其变为醋酸，上述过程需在氧气充足，但__________的条件下完成。

（3）豆腐中蛋白质占38%左右，脂肪含量约占8%．与豆腐相比，腐乳更易于消化吸收、味道更鲜美，这是由于起发酵作用的毛霉等微生物能产生____________酶和_____________酶。

（4）毛霉等的生长需要豆腐提供水、无机盐、_____________和____________等四大类基本营养物质。腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤。卤汤具有一定的________________作用外，还能使腐乳具有独特的风味。

（5）现代工业生产腐乳，必须严格控制无菌条件，将经过筛选的优良毛霉菌种直接接种在豆腐上，对豆腐灭菌宜采用的方法是___________。

A.某生物兴趣小组积极参加当地盛产苹果的乡镇生产苹果酒、苹果醋的调研项目。下面是他们调查之后发现的一系列问题，请帮助回答：

（1）制备高产果酒的酵母菌菌株：

①在秋季的葡萄园中，在________的周围土壤中酵母菌大量生长繁殖。

②为测定土壤中酵母菌的数量，一般选用________倍稀释，用________法接种上述所得酵母菌稀释液。

③在________的发酵液中，酵母菌能大量生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。

（2）苹果酒、苹果醋的生产：

①小组同学在制作果酒的发酵阶段，发酵瓶的瓶盖应________。

A．一直打开

B．打开并盖上一层纱布

C．定时拧松

D．始终拧紧

②苹果醋生产可在苹果酒生产基础上改变________进行，其发酵温度应________（填“低于”或“高于”）苹果酒的生产。

③在果醋的制作中，提供碳源的物质主要是________。

B．胡萝卜素可以用来治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病，也可以作为食用色素。请回答下列问题：

（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，在干燥过程中要控制好温度和时间，原因是温度过高、干燥时间过长会导致________；萃取液在浓缩前需进行过滤，其目的是________。

（2）培养产胡萝卜素的酵母菌时，所用的培养基一般含________等成分，有氧及温度为________左右条件最适合该酵母菌生长、繁殖。

（3）筛选产胡萝卜素的酵母菌时，接种过程需要在酒精灯火焰附近进行，其目的________。

（4）所获得的胡萝卜素粗品可通过纸层析法进行鉴定，该过程中的对照材料为________。