[生物——选修1：生物技术实践]

谷氨酸钠是味精的主要成分，工业生产中常用谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸。下表是生物兴趣小组探究发酵条件对微生物数量和产物生产的影响。

请分析回答下列问题：

（1）谷氨酸棒状杆菌发酵的培养基中主要营养物质有________，该培养基是一种________培养基。

（2）得到谷氨酸棒状杆菌数目可采用的计数方法是________，用该方法计数过程：取第二组的100倍的稀释液0.1ml滴加到计数板（由25×16＝400个小室组成，容纳液体总体积为0.1mm³）上；记录到5个中方格（80个小室）共有菌体48个，则1ml的第二组发酵液中有菌体________个。用该方法测定的微生物数量大于实际的活菌数，原因是________。

（3）由上述探究可知，要通过发酵得到大量谷氨酸需首先不断向发酵液中通入________，将碳氮比设为________培养一段时间，然后将发酵液中碳氮比改为________继续培养。

［生物——选修1：生物技术实践］据生物技术相关知识回答：

⑴灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括            。以下操作属于灭菌的有        （选代号，不定项），属于消毒的有      （选代号，不定项）。

①用70%的酒精擦拭双手          ②用适宜浓度的氯气处理水源

③将牛奶在70—75℃下煮30分钟  ④将沾有少量酒精的涂布器末端在火焰上引燃

⑤将试管口、接种环通过酒精灯充分燃烧层

⑥将平板倒置（皿盖在下、皿底在上）放入培养箱

⑵若要测定某培养液中的活菌数，既可经染色后在显微镜下用           直接计数，也可不染色直接选用                 法统计活菌数目，一般前者得到的结果           （填“大于”、“等于”、“小于”）后者。

⑶用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是                  。

【生物—选修1：生物技术实践】

回答下列与微生物发酵、培养以及应用相关的问题：

(1)苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用 

              来检验。

(2)严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件不包括   。

 A.温度控制          B.溶氧控制        C．pH控制       D.酶的控制

(3)苹果酒在      的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是                  

(4)腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是           。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于           。

(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加               。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是                                             。

(1)大肠杆菌的同化类型为________，从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________。

(2)在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是________，因此需对培养基和培养皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)，操作者的双手需要进行清洗和________。空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使________，还能破坏DNA的结构。

(3)根据用途划分，该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中________换成________，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红·美蓝换成________。

(4)培养大肠杆菌时，常用的接种方法是________和________。通过上述方法可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，称为________。

(5)使用以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________(多选)。

A．制作果酒    B．由果酒制作果醋    C．制作泡菜    D．制作腐乳

（1）像其他微生物一样，酵母需要适当的营养和合适的环境条件，培养时培养液中的营养物质主要有                     等。(要求回答4种营养物质)

（2）当酵母繁殖时，没有糖转化为酒精，此时酵母菌为                 呼吸．

（3）从含有酵母菌、醋酸菌、蓝藻的培养液中分离出酵母菌，最简单的培养方法是：在              并且                条件下进行培养．

（4）葡萄酒制作是否成功，发酵后需用             来鉴定，在             条件下，该物质与酒精反应呈现            色。

（5）为筛选和纯化酵母菌，根据用途应选用                   培养基，常用的接种方法                和                 ．扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数，取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计了三个平板，菌落数分别是200、180、220．则样品中微生物的数量为               个/mL．该统计结果             （低于、高于）实际值。

（2）制作食醋所用的菌种是        ，根据其对氧气的需求判定，其属于         。

（3）在制作葡萄酒的过程中，应将温度控制在18-25℃，在制作葡萄醋时应严格控制温度在30-35℃，这样做的原因是                                        。

（4）果汁发酵是否产生酒精，可用               检测。

（5）要想在实验室对酵母菌和醋酸菌进行纯化，接种的方法最常用的是            和           。

&;   我国为苹果生产大国，为解决鲜果积压、卖果难的问题，发展苹果深加工，利用苹果来酿果酒、果醋和加工成果汁等是解决这一问题的良好途径。请回答下列问题：

（1）苹果酒具有预防血管硬化等疾病、促进新陈代谢、抗衰老、美容养颜等保健作用，下图是为适合青少年和酒精耐受力的人群而设计的苹果酒的酿制流程：

       发酵菌种活化的过程需加入            并进行搅拌。活化后发酵前 应进行酵母菌的纯化培养，常用方法是             和           。所用培养基从功能上属于               。

（2）苹果醋具有护肤、减肥、营养、解酒和消除疲劳等功效，参与果醋发酵的菌种是           。在果酒发酵后期，如果提供           等环境，即可生产果醋。

    （3）苹果的全身都是宝。苹果的果皮可提取香精油，这种香精油具有天然的香味，是制酒、糕点等的天然保健食用油，一般采用       法。果肉除酿制果酒和果醋外，还可加工成罐头、果汁等。             酶可使果酒、果汁的澄清度高，颜色鲜亮，提高品质。

   （4）某果农发现一苹果树的结实率高、品质好，欲在较短时间内大量繁殖该品种，可采用             方法，该技术所用到的最关键激素是               。

发酵法生产酒精后的废液含有大量有机物，可用于培养、获得白地霉菌体，生产高蛋白饲料。培养、制取白地霉菌体的实验过程示意图：

请据图回答：

（1） 发酵生产酒精的过程中，发酵液会变成酸性，变酸的原因是       。

（2）废液上清液定量分装前，先调节       ，分装后进行高压灭菌处理，请指出下述高压灭菌的不正确的操作，并说明理由       ：

锥形瓶加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，放入高压灭菌锅，锥形瓶应尽量靠紧桶壁，防止滑动；加盖时要同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致；加热时，打开排气阀，等冷空气完全排尽后，关上排气阀；到灭菌时间后，打开排气阀排气，让灭菌锅内压力、温度快速下降，当压力表的压力降到零时，旋松螺旋，打开盖子，取出锥形瓶。

（3）图中①过程称为       ，从甲到丁的培养过程是为了       。

（4）为确定菌体产量，图中②操作之前，应先称量滤纸的质量。过滤后需反复烘干称量，直至         。所获菌体干重等于         。

生产实践中应用的菌种主要来自土壤，从土壤中分离微生物的实验流程如下：

土壤取样—→选择培养—→梯度稀释—→鉴别培养。

请回答下列有关问题：

(1)将土壤浸出液接种到特定培养基上，可以将酵母菌从混杂的微生物群体中分离出来，

获得纯种酵母菌，这一过程叫做          。在培养酵母菌的过程中，对培养基、接种环常采用的灭菌方法分别是                     。

(2)在使用酵母菌发酵生产酒精的过程中，影响酵母菌酒精发酵的主要因素有          ，常使用          的方法从发酵液中提取纯酒精。

(3)从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在          环境中采集土样，所选择的培养基应以          作为唯一碳源。

[生物——选修1：生物技术实践]

下图是工业上利用微生物分解废纸生产乙醇的基本操作流程。回答下列问题：

(1)图中①环节所需的微生物大多分布在富含________的土壤中，为了得到能分解纤维素的微生物，常用以纤维素为唯一碳源的________(填“选择”或“鉴别”)培养基。筛选该微生物常用的方法为________法。

(2)图中通过②环节获得的酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种成分，即C₁酶、C_X酶和________，前两种酶使纤维素分解成________。

(3)④环节要注意对接种器材进行________，⑤环节利用的微生物是________，在产生酒精的过程中发酵装置必须保持________。