人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：

(1)分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有                   、                    (至少答2种)。

(2)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于     培养基。若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的         使pH升高，使酚红指示剂产生颜色变化，从而证明这一菌株以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力              。

(3)与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数           。

A．多        B．少      C．相等      D．几乎为零

(4)将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在              旁进行操作。接种后的培养皿            于37℃的                中培养。

[生物——选修1生物技术实践]

请回答下列与微生物培养相关的问题：

（1）土壤中具有分解尿素的细菌，此类细菌能产生________酶，该酶能将尿素分解成____________。

（2）某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000ml，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中能分解尿素的细菌？__________（填“能”或“不能”），原因是____________

（3）某小组采用平板划线法分离某样品的细菌时，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是_______________________________。使用稀释涂布平板法检测土样中细菌含量时，在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养一段时间，这样做的目的是___________。

（4）在分离尿素分解菌的实验中，大部分同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而有一个同学从培养基上筛选出大约150个菌落，这种实验结果差异产生的原因可能是______________、_____________。

下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

（1）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是_______________，因此需对培养基和培养皿进行_______，操作者的双手需要进行清洗和消毒。

（2）根据用途划分，该培养基属于_______培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中__________换成尿素，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成__________。

（3）若要统计大肠杆菌活菌数目，常用的方法是____________。统计结果往往比实际值偏___。原因是___________________________________。

下列关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述中，不正确的是

【生物——选修1：生物技术实践】

某研究小组从牛的瘤胃中采集样本，进行分解尿素的微生物的分离与计数。实验基本步骤如下：

（1）分解尿素的微生物含有_______________，因此，配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成_________使培养基的碱性增强。

（2）配制培养基时，需添加琼脂，琼脂起________________作用；培养基中添加___________作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。

（3）对尿素溶液进行灭菌的最适方法是___________灭菌。

  A.高压蒸汽  B.干热   C.添加抗生素  D.过滤   E.紫外线照射    F. 70﹪酒精浸泡

（4）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________；然后将1mL瘤胃样液稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为49、47和45。据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为__________，理论上，统计的菌落数往往_____（低、等、高）于接种的实际活菌数目。

[生物—选修1：生物技术实践]

请回答有关物质提取、微生物培养与应用的问题：

（1）实验室分离叶绿体中的色素常用的方法是________，从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是________法。

（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是________。常用的对培养皿进行灭菌的方法是________。

（3）从土壤中分离尿素分解菌的过程中，应向以________为唯一氮源的培养基中加入________指示剂。

（4）纯化菌种和统计某活菌的数目时，宜采用的接种方法是________，用这种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，其原因是________。

请回答下列有关的问题：

（1）鉴定尿素分解菌需在培养基中加入        指示剂。纤维素分解菌的筛选方法                              

（2）制作泡菜时，所用盐水使用前，盐水需要         。为了缩短制作时间，有人还会在盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是         。

（3）在采用平板划线法分离硅酸盐细菌时，第二次及之后的划线，总是在上一次划线末端开始，这样做的目的是                                。

（4）水中蒸馏的方法对于有些原料不适用。这是因为水中蒸馏会导致                   、和                 等问题。

（5）萃取的效率主要取决于                     和                ，同时还要受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。

第三步：微生物的培养与观察。将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上，并在适宜的条件下培养。分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖，而                       则不能生长繁殖。（注：实验中所用的培养基经检测符合要求，且均在无菌条件下操作）

若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定，需在上表培养基配方中添加的物质是__________________。若分离得到的是尿素分解菌，则培养基中pH升高使酚红指示剂变为_____色（1分），pH升高的原因是______。

（4）细菌的数目可以通过滤膜法来测定，例如测定饮用水中大肠杆菌的数目。将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养，在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现__________，根据培养基菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。