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            • 1.

              “创卫”是创建卫生城市的简称。“卫生城市”是一个城市综合功能和文明程度的重要标志。某同学欲利用所学习的微生物培养知识,通过实验证明痰液中含有细菌,来倡导同学们不要随地吐痰,为“创卫”添一份力。请回答下列问题:

              (1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物,该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl________、H2O等;该培养基中微生物所需的氮源来自________,制备该培养基的步骤是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板,其中灭菌常用的方法是_______________________________________________;培养基灭菌后,需要冷却到________ ℃左右才能倒平板,等平板冷凝后,还需要将平板倒置,主要目的是___________________________________________。

              (2)为了使实验更有说服力,某同学设置空白对照组和若干实验组,其中对照组的作用是____________________________________________________________。若在某次调查中,某一实验组平板上的平均菌落数为39个,而空白对照组的平板上出现了9个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

              (3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目,统计结果往往比实际细菌的数目要低,主要原因是:____________________________________。

            • 2. 请回答下列与玉米秸杆处理有关的问题:
              (1)秸杆的主要成分是纤维素,牛本身没有相应的消化酶,但胃内有一种微生物可以帮助其分解,这种微生物与牛的种间关系为______.尿素并不是牛马的必须营养,过多甚至有害,但有经验的农民常在其草料内喷少量尿素,据此题的信息你认为尿素的作用是______.
              (2)分离纯化能分解秸秆的微生物时,需对培养基和接种针进行灭菌处理,常用的方法依次是______.
              (3)将玉米秸秆人工收获后,将其铡碎、压实、密封储藏.秸杆经此处理后,气味微酸芳香(主要由乳酸菌代谢产物造成).上述“压实密封”的目的是:人为造就一个______环境,利于乳酸菌的______.用这样处理后的秸杆饲喂牲畜的好处是______.
              (4)下面是分离分解纤维素的微生物的实验流程图:

              步骤(二)中选择培养基的营养物质的特点是______,步骤(三)中稀释的目的是______.
            • 3. 用稀释涂布平板法统计细菌菌落数时,一般选择如图中哪几支试管中的稀释液来涂布平板(  )
              A.试管1、2、3
              B.试管2、3、4
              C.试管3、4、5
              D.试管4、5、6
            • 4.

              酸奶是以牛奶为原料,经过巴氏杀菌后再向牛奶中添加有益菌,经发酵制成。家庭自制酸奶的安全隐患是有害菌污染问题,为检测自制酸奶是否被杂菌污染,进行如图所示操作。回答下列问题。


              (1)制备牛肉膏蛋白胨培养基,倒平板待其冷却后将平板倒置的主要原因是________。

              (2)取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布,涂布前要将涂布器________才能涂布。如果培养基上出现________的菌落,说明自制酸奶已被杂菌污染。

              (3)在恒温培养箱中培养一段时间后,3个平板上菌落数分别为65个、63个、64个,则可以推测酸奶中每毫升含菌数为________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小,原因是________。

              (4)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌,进一步分离纯化乳酸菌的方法是________,该操作中常使用的接种工具是________。若培养后获得的某个平板,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落,造成第一条线上无菌落的可能操作失误有________、________。

            • 5. 农作物收获后,燃烧秸秆会造成大气污染,如何回收利用是我国面临的一个重要问题.某同学设计从土壤中分离纤维素分解菌→分解秸秆,获得糖液→发酵生产乙醇,从而实现再次利用,请回答以下问题:
              (1)将从土壤中获得的微生物培养在以 ______ 为碳源,并在加入 ______ 的培养基上筛选周围有 ______ 的菌落.
              (2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即 ______ 和 ______ .采用固体平板培养细菌时,需要倒置培养,其原因是 ______ .
              (3)发酵阶段需要的菌种是 ______ ,在产生乙醇时要控制的必要条件是 ______ .
            • 6. 反刍动物,如牛和山羊,具有特殊的器官--瘤胃,在瘤胃中含有多种微生物,其中许多微生物能以尿素作唯一氮源.以下示意图是从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物流程.

              (1)进行①过程的目的是 ______ ;②过程所使用的接种方法是 ______ .用该接种方法对微生物进行计数时,统计的菌落数往往比活菌的实际数目,原因是 ______ .
              (2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于 ______ 培养基,制备该培养基的步骤是:计算→ ______ →灭菌→倒平板.由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌,接触空气后会死亡,因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备Ⅰ号培养基外,还要提供 ______ 的条件.
              (3)酶对化学反应的催化效率称为酶活性,图示的酶活性的高低可用 ______ 中 ______ 的减少量来表示.
              (4)萃取胡萝卜素的过程应避免明火加热,采用水浴加热的原因是 ______ .
              (5)如果要对具有优良性状的植物进行大规模种植可采用 ______ 方法,在对外植体进行接种前,需要进行制备MS 固体培养基和 ______ 两项工作.培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值 ______ (填“高”或“低”)时,有利于芽的分化.
            • 7.
              下列有关平板划线操作的叙述,错误的是(  )
              A.在操作的第一步以及每次划线之前都要将接种环放在火焰上灼烧
              B.将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液
              C.蘸取菌液和划线要在火焰旁进行
              D.划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连
            • 8. 回答下列关于微生物和酶的问题.
              高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性.研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图1所示.

              (1)①过程为梯度稀释其目的是将聚集在一起的微生物分散成 ______ 细胞,②过程的接种方法为 ______ .
              (2)Ⅰ号培养基属于 ______ (按功能分),该培养基中除了加入淀粉外.还需加入另一种重要的营养成分 ______ (选择序号)
              A.琼脂 B.葡萄糖   C.硝酸铵D.碳酸氢钠
              (3)一般对配制的培养基采用 ______ 灭菌.灭菌是为了杀死体内外所有微生物,包括 ______ .
              (4)从Ⅰ号培养基挑出菌落接种到Ⅱ号培养基时,向Ⅰ号培养基加入碘液,选择菌落周围蓝色浅而且范围 ______ 的菌落挑出.
              在高温淀粉酶运用到工业生产前,需对该酶的最佳温度范围进行测定.图2中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比.将酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最适温度下测其残余酶活性,由此得到的数据为酶的热稳定性数据,即图2中的曲线②.

              (5)根据图中的数据,判断该酶使用的最佳温度范围是 ______ .
              A.40~50℃B.50~60℃C.60~70℃D.70~80℃
            • 9. [选修1:生物技术实践](15分)

              临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本(如痰液、粪便等),然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题:

              ⑴为了从样本中分离并获取某种致病菌单菌落,可用             法或             法将人体样本接种于固体培养基表面,再经过选择培养、鉴别等步骤实现。

              ⑵为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,取该单菌落适当稀释,接种于固体培养基表面,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板。将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板的不同位置,培养一段时间后,在四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A>C>D>B。由此推断,该病人目前适合使用的是抗生素        。含D的滤纸片周围的透明圈比含A、C的小,但透明圈中出现了一个菌落,这种菌落的出现可能是由于杂菌污染导致的,也可能是由于该致病菌发生了突变;若发生了基因突变,这种突变一般是否由抗生素诱发的?         ,若要证明这种致病菌发生了基因突变,可检测和比较这类细菌细胞中        (“DNA 的碱基组成”“mRNA 的含量”“ DNA 的碱基序列”)。

              ⑶为防止杂菌污染,培养基的灭菌方法是         灭菌,接种环的灭菌方法是         灭菌,接种过程应该在               旁进行。

            • 10. 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤.为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明).

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行 ______ 处理.
              (2)要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从物理性质、用途方面来看,上述培养皿中的培养基应具有的特点是:在 ______  的培养基中加入 ______ .
              (3)在划线培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 ______ .
              (4)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,有透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,据此可筛选出目的菌.
              (5)若实验接种时用的是稀释涂布平板法,在统计菌落数目时得到4个平板,统计的数目分别为21、213、257、278,则对数据处理后取平均值计数为 ______ ,该方法往往比活菌的实际数目偏 ______ (高/低).
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