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            • 1.

              人们的日常生活与传统发酵技术密切相关。请回答下列相关问题:

              (1)腐乳制作中主要利用了微生物产生的________酶和脂肪酶。

              (2)在制作果醋、腐乳、泡菜的过程中需要提供氧气的是_____________。在发酵产物制作过程中都需要培养微生物,为防止杂菌污染,需要对培养基和培养器皿进行灭菌,其中对培养基灭菌常用的方法是__________________法。

              (3)利用酵母菌酿酒时,一开始持续通入空气,导致酵母菌数量________(填“增多”、“不变”或“减少”),然后再密封,使酒精________(填“增产”、“减产”或“不产生”).

              (4)果酒发酵后是否有酒精产生,可以用________来检验,在_____条件下呈现______色。

              (5)纯化果酒制作的菌种时,利用________(填“固体”或“液体”)培养基。接种时常用的方法有____________法和稀释涂布平板法。

            • 2.

              回答下列有关微生物培养的相关问题:

              Ⅰ.已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可以用于生物柴油的生产。回答下列问题:

              (1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用____________染色。微生物A产生的油脂不易挥发,可用____________(填"萃取法"或"水蒸气蒸馏法")从菌体中提取。

              (2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以_______为碳源的______(物理状态)培养基进行培养。培养的结果发现没有得到微生物B的菌落或者数量极少,可在此操作之前增加____________这一操作步骤。

              (3)若要测定微生物B的菌体数,可在显微镜下用____________直接计数,若要测定活菌数量,可选用____________法进行计数。

              Ⅱ.某医院有一个罕见的细菌感染患者,医生想通过抑菌实验,从常用的抗生素一青霉素(A),氨苄青霉素(B),庆大霉素(C),氯霉素(D),环丙沙星(E)中寻找对病人最有效的一种.部分实验步骤如下:

              第一步:按下方所列配方配置培养基:

              牛肉膏

              蛋白胨

              NaCl

              H2O

              5.0g

              10.0g

              5.0g

              1000mL

              第二步:取单菌落适当稀释,用3支无菌滴管吸取从此病人体内分离到的细菌悬浮液2滴,滴于3个平板培养基表面,然后分别用3个无菌涂布棒涂匀,37℃恒温箱中培养,使细菌长满平板表面。

              (4)上述培养基配方中作为蛋白胨为微生物的生长提供了____________________。

              (5)如图圆环表示一个培养皿平面,用浸有不同抗生素的圆纸片间隔放到培养基土,如下图所示。

              培养2d后,A滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对青霉素____________;B滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对氨苄青霉素____________;C滤纸片周围的透明圈比A滤纸片周围的透明圈小,说明____________;D滤纸片周围的透明圈比A滤纸片的也小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是氯霉素的____________。

              (6)经测量透明圈大小,得到如下结果(单位mm):

              A

              B

              C

              D

              E

              7

              0

              3

              5

              10

              那么,你建议医生使用哪一种抗生素?____________.

            • 3.

              回答下列与酵母菌有关的问题:

              (1)培养酵母菌的培养基应采用________法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后会观察到菌落,菌落的含义是_______________。

              (2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,可促进_______(填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培养,可促进______(填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”)。

              (3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的原因是___________。

              (4)为筛选和纯化酵母菌,根据用途应选用 ____________培养基,常用的接种方法____________和____________.扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数,取0.2mL样品,用固体培养基对其培养,最后统计了三个平板,菌落数分别是200、180、220.则样品中微生物的数量为__________个/mL.该统计结果_____________(低于、高于)实际值。

            • 4.

              某生物兴趣小组按下图所示过程从土壤中筛选能降解纤维素的细菌。回答下列问题:

              (1)步骤②是___________。为了筛选目的菌,步骤③的培养基中加入的唯一碳源为___________,这种培养基属于___________(填“鉴别”或“选择”)培养基。

              (2)上述接种等操作都应在酒精灯火焰附近进行的原因是___________。一般在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线,原因是______________________。

              (3)将接种后的培养基和作为对照的______________同时放入恒温培养箱中培养,为了对初步筛选出来的菌种作进一步的鉴定,可在培养基中加入_________________。选取鉴定出的具有较大透明圈的菌种可接种到___________培养基上临时保藏。

            • 5.

              国家生活饮用水卫生标准规定:接种1 mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上,在37℃下经24 h培养,所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定,以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题:

              (1)用无菌三角瓶取水样前,取样器(玻璃制品)需使用_____________法灭菌。取水前的这种无菌操作的目的是____________________________。

              (2)牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后,需要冷却到50℃才能用来进行_________操作,冷凝后倒置培养。

              (3)该小组通过滤膜法测定细菌总数,将30 mL水样平均分成3份进行过滤,再将3份滤膜分别放在牛肉膏蛋白胨培养基上培养。在培养过程中,不同时间所观察到的平板上菌落特征的差异有____________(至少写出两点)。为保证可信度,应进行对照实验,对照组与实验组的区别之处是_________________ 。

              (4)在37℃下经24 h培养,结果如下表:

               

              平板1

              平板2

              平板3

              菌落数(个)

              370

              350

              380

              据上表结果判断,所取水样测定结果_____(填“符合”或“不符合”)饮用水的标准。

              (5)该小组若想检测水样中大肠杆菌的数目,可将滤膜放在含__________培养基上,计算培养基上______(颜色)菌落的数目。

            • 6.

              高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性.研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示.

                    (1)②过程所使用的接种方法是 ______ 法.①和②步骤中,下列选项需要用到的是      (填序号,多选)。

                  ①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水

                    (2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于 ______ 培养基,从物理状态上来说,Ⅱ号培养基属于固体培养基,配制时应加入 ______ 作为凝固剂.

                    (3)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是 ______ ;一般对配制的培养基采用 ______ 法灭菌.

                    (4)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放淀粉酶分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈;应挑出透明圈 ______ (大或小)的菌落,接种到Ⅱ号培养基.

                    (5)写出两点避免杂菌污染的措施①                   ②        。 

            • 7.

              某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后,对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌,当培养基温度下降到50℃时,在酒精灯火焰附近倒平板,待培养基冷却至室温,按下表处理。将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2~3天,观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题:


              (1)上述实验的实验目的是             。若E组的培养基表面有菌落生长,说明了         
              (2)培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长提供             。 “在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了         
              (3)实验过程特别强调温度控制,请简要说明下列温控措施的目的:
                ①“待培养基冷却至室温”的目的有         
                ②“将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是         
              (4)培养微生物时将培养皿倒置的目的是           。实验结束后,对使用过的培养基应进行     处理。
            • 8. 某实验小组对酸奶中乳酸菌的数量进行了测定,取6支灭菌的试管,分别加入9 mL无菌水,标号A1、A2、A3、A4、A5、A6,吸取1 mL酸奶样液加入试管A1中,然后另取一支吸管从A1中吸取1 mL溶液,加入A2中,依此类推,最后从试管A6中取0.1 mL样液进行涂布计数,涂布三个平板,其菌落数分别为251、265、276个。请回答下列问题:

              (1)配制乳酸杆菌的培养基时,除了几种主要的营养物质外,还需要在培养基中添加________________。

              (2)制备乳酸菌的培养基过程中,对培养皿灭菌的常用方法是__________________。倒平板时培养基的温度不能太低,原因是________________________________;待平板冷凝后,要将平板倒置,其目的是____________________________________________________。
              (3)该实验小组对乳酸菌接种所采用的方法是________________。根据三个平板中菌落数,可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为______个/mL,该方法测定的乳酸菌的含量和实际值相比,一般会________(填“偏大”或“偏小”)。

              (4)为了使测量结果更加准确,该实验对照组的设置是________________________________。

            • 9. 做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是(  )
              A.高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖
              B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上
              C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
              D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上
            • 10.

              下图是生物兴趣小组为研究“XXX牌酸奶中乳酸菌种类及其耐药情况”而制定的流程图。请分析回答:

              —→—→

              (1)与酵母菌相比,乳酸菌在结构上的主要区别是________________________,________(填“有”或“无”)染色体。

              (2)本研究使用的细菌培养基中特别加入了一定量的碳酸钙,乳酸菌在________(生理过程)中产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙生成可溶性的乳酸钙,从而在菌落周围形成溶钙圈。从物理形态分析,本研究使用的培养基属于________(类型)。

              (3)在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时,把锅内水加热煮沸,必须将锅内冷空气彻底排除后,将锅密闭,继续加热以保证锅内气压上升,达到121℃。灭菌后的培养基应适当冷却后,在________附近倒平板。

              (4)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”实验操作步骤:

              步骤1:分别取__________________加入三组无菌培养皿中,再加入灭菌并冷却到50℃左右的培养基,立即混匀,静置凝固成平板。

              步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

              步骤3:将接种后的三组培养基和一个__________都置于适宜温度等条件下培养若干天,观察比较培养基中菌落生长情况。

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