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            • 1． 反刍动物，如牛和山羊，具有特殊的器官--瘤胃，在瘤胃中含有多种微生物，其中许多微生物能以尿素作唯一氮源．以下示意图是从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物流程．

              （1）进行①过程的目的是    ；②过程所使用的接种方法是    ．用该接种方法对微生物进行计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目，原因是    ．
              （2）从用途上来说，Ⅰ号培养基属于    培养基，制备该培养基的步骤是：计算→    →灭菌→倒平板．由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌，接触空气后会死亡，因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备Ⅰ号培养基外，还要提供    的条件．
              （3）酶对化学反应的催化效率称为酶活性，图示的酶活性的高低可用    中    的减少量来表示．
              （4）萃取胡萝卜素的过程应避免明火加热，采用水浴加热的原因是    ．
              （5）如果要对具有优良性状的植物进行大规模种植可采用    方法，在对外植体进行接种前，需要进行制备MS 固体培养基和    两项工作．培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值    （填“高”或“低”）时，有利于芽的分化．
              难度：中等
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            • 2． 常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差．科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母．
              （1）酿酒酵母代谢类型是    无氧呼吸的反应式为    
              （2）将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后将瓶中的液体用    法接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养，获得各种菌落．在葡萄酒酿造过程中，葡萄也需要冲洗，其主要目的是    ．
              （3）将培养基上的酵母菌菌株转接到    的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵．从存活的酵母菌中提取DNA，经PCR技术获得目的基因，PCR技术获得同一种目的基因的原理是    ．
              （4）将目的基因连接到质粒上，该质粒具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因．将重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏    能力的酿酒酵母作为受体菌．
              （5）将上述获得的转基因酿酒酵母接种在以葡萄糖和木糖为碳源的培养基中进行发酵能力测试．随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能    ，即说明所需菌株培育成功．
              难度：中等
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            • 3． 回答有关微生物的问题．
              Ⅰ、凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶．培育产高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向．图1为产高酶活力凝乳酶的枯草芽孢杆菌培育过程．

              （1）枯草芽孢杆菌的芽孢是    ．
              A．休眠体    B．营养繁殖体    C．孢子        D．营养体
              （2）图1所示的b过程的目的是为    ，接种用的平板培养基在制备时需注意的是    （多选）．
              A．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板
              B．倒好的培养基和培养皿要进行高压灭菌处理
              C．等到平板培养基冷却凝固后才可以盖上培养皿的皿盖
              D．待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置
              Ⅱ、在35℃、40分钟内能凝固1mL10%奶粉所需的酶量为一个酶活力单位（U）．图2表示图1中提取得到的各种凝乳酶活力检测结果．
              （3）据图2所示，酶催化能力最强的是    组，而各组酶催化能力存在差异的原因是    ．
              （4）A2、A5组酶活力与A0组芽孢杆菌相同，两位同学对此做出了推测：
              ①同学甲：A2、A5组芽孢杆菌可能未发生基因突变，用    技术检测即可证实．
              ②同学乙：A2、A5组与A0组酶活力虽然相同，但也可能存在不同的基因突变，理论上的解释是    ．
              难度：较难
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            • 4． （2016•奉贤区一模）I．培养基的配制与培养是微生物实验中的一个重要环节．
              （1）图1所示的是制备固体培养基时的实验操作步
              骤之一，一般称为    ．配制培养基时各种成分在熔化后分装前必须进行    ，培养基在接种前要进行    灭菌，灭菌是否彻底或是否被污染需要检测，方法是    ．
              Ⅱ．从自然菌样中筛选理想菌种的步骤是：采集菌样    富集培养    纯种分离．
              （2）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．培养嗜盐菌的菌样应从    环境采集．
              （3）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择    的培养基，并在    条件下培养．
              （4）图2和图3是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，获得图2效果的接种方法是    ，获得图3效果的接种方法是    ．
              难度：较难
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            • 5． 美国科学家发现了一种能将溶解在水中的铀还原成难以溶解的铀的地杆菌，可缩小铀污染的范围，而其他的细菌则不能在含铀的环境中生存．科学家为了研究这种地杆菌的生理特性，需对其进行分离和培养．请回答：
              （1）培养基中一般含细菌生长所需的水、无机盐、    等．制备培养基时常用的灭菌方法是    灭菌．接种时使用的接种环灭菌方法是    灭菌．
              （2）为分离出能够还原铀的地杆菌，可在培养基中加入    ，从用途上看，这种培养基称为    培养基．
              （3）对地杆菌计数时，常采用的方法是    法．在稀释倍数为106倍下涂布了三个平板（每次取0.1mL），统计菌落数分别为240、250、260，则稀释前1mL菌液中所含细菌为    个．
              （4）获取地杆菌后如要临时保存，可将其接种在    培养基上，等长成菌落后放在4℃的冰箱中保存．
              难度：较难
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            • 6． （2016春•遵义期中）某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A．研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）．实验的主要步骤如图所示．请分析回答问题．
              （1）接种前需要对培养基及培养皿等进行灭菌，常用的灭菌方法是    ．培养基中加入化合物A的目的是筛选    ．
              （2）实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是    ．
              （3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量    的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量    ．
              （4）转为固体培养时，为获得单菌落进行继续筛选，常采用平板划线法或    法，接种后，应将培养皿    （填“正放”或“倒置”）．
              （5）实验结束时，使用过的培养基应该进行    处理后，才能倒掉．
              难度：中等
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            • 7． 某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（“目的菌”）．实验的主要步骤如下．请分析回答问题：
              （1）培养基中加入化合物A的目的是筛选    ，这种培养基属于    培养基．
              （2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的    ，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是    ．
              （3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量    的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量    ．
              （4）转为固体培养时，常采用    的方法接种，获得单菌落后继续筛选．
              （5）实验结束时，使用过的培养基应该进行    处理后，才能倒掉．
              难度：中等
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            • 8． 尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：
              KH2PO41.4g
              Na2HPO42.1g
              MgSO4•7H2O0.2g
              葡萄糖10g
              尿素1g
              琼脂15g
              将上述物质溶解后，用自来水定容到1000m3
              （1）此培养基能否用于植物组织培养？    ，理由是    ．
              （2）培养基中氮源是    ，这种培养基在功能上属于    培养基，目的是只允许能合成的微生物生长，其他微生物均不能生长．
              （3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用    法进行接种．
              （4）在以尿素为唯一碳源的培养基中加入    ，使指示剂变红色，而筛选纤维素分解菌的方法是    法．
              难度：中等
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            • 9． （2016秋•成都校级月考）微生物的分离、培养和计数是现代生物工程应用中的重要环节．图为大肠杆菌分离和培养过程中部分操作示意图．请分析回答下列问题：
              （1）实验过程中对培养基、培养皿、实验操作者的双手所采用的灭菌、消毒方法依次是    、    、    ．
              （2）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是    ．
              （3）图示是利用    法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步    分散到培养基的表面．在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的原因是    ．
              （4）关于图示的操作方法和结果，叙述正确的是    ．
              A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌．
              B．划线操作须在火焰上进行．
              C．在5 区域中才可以提到所需菌落．
              D．在1、2、3、4、5 区域中划线前后都要对接种环灭菌．
              （5）植物组织培养所用的MS培养基和微生物培养所配制的培养基的主要区别是    ．某同学在进行组织培养过程中，发现只分裂而不分化出芽和根，可能原因是    ．
              难度：中等
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            • 10． 生物技术的广泛应用，不仅带来了较好的经济效益和社会效益，更使人们的生活变得更加丰富多彩．
              （1）工业生产上通常采用微生物发酵技术获得果胶酶，选用的微生物通常是    ，在提取果胶酶后，首先要检测    ，以便将其更好的应用与生产实践和科学研究．
              （2）微生物在果酒、果醋、腐乳、泡菜等食品加工方面应用广泛，其中与泡菜制作有关的微生物是    ．在果酒基础上酿制果醋的过程中，除需接种     （微生物）外，还必须保持    条件．
              （3）配制固体培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行    ，接种前要进行    ，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在    条件下进行．
              难度：较难
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