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            • 1． 5～40%的甲醛水溶液（福尔马林）可作为防腐剂，其防腐的原理是使蛋白质变性．自然界中有能分解甲醛的细菌和真菌．图甲为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程．请分析回答：

              （1）②过程的目的是    ，③过程筛选出的是    ．
              （2）上述实验中，不需要进行灭菌处理的是    ，培养基灭菌的常用方法为    ．
              （3）由③→④的接种可选用    法，通过培养能获得由    繁殖形成的肉眼可见的    ，也就是菌落．经过⑤过程后，取样测定甲醛浓度，选出甲醛浓度    （最低或最高）的培养瓶，再分离、培养菌株．
              （4）为研究甲醛初始浓度对菌株降解甲醛能力的影响，进行了相应实验并得到如下结果．由图乙可知，当甲醛的初始浓度小于1200㎎/L时，菌株    ；当甲醛的初始浓度增高至1600㎎/L时，48小时后菌株对甲醛的降解能力很弱，甚至失去降解能力，其原因可能是    ．
              难度：较难
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            • 2． 普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的a-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）．

              （1）图甲中，过程①需要的酶有    ．为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以    作为唯一碳源．②、③过程需重复几次，目的是    ．
              （2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示．该同学的接种方法是    ；推测该同学接种时可能的操作失误是    ．
              （3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种菌的发酵罐需要先排气，其原因是    ．
              难度：中等
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            • 3． 已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶，脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产．回答有关问题：
              （1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用    染色．微生物A产生的油脂不易挥发，可选用    （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取．
              （2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以    为碳源的固体培养基进行培养．
              （3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用    直接计数，若要测定其活菌数量，可选用    法进行计数．
              （4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，    ℃条件下该酶活力最小，为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕    ℃设计后续实验．
              难度：较难
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            • 4． 尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：

              KH2PO41.4g
              Na2HPO42.1g
              MgSO4•7H2O0.2g
              葡萄糖10g
              尿素1g
              琼脂15g
              将上述物质溶解后，用自来水定容到1000m3
              （1）此培养基能否用于植物组织培养？    ，理由是    ．
              （2）培养基中氮源是    ，这种培养基在功能上属于    培养基，目的是只允许能合成    的微生物生长，其他微生物均不能生长．
              （3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用    法进行接种．
              （4）在以尿素为唯一碳源的培养基中加入    ，使指示剂变红色，而筛选纤维素分解菌的方法是    法．
              难度：较难
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            • 5． 运用所学知识回答下列与生物技术实践相关的问题．

              （1）自古酒就与人类生活息息相关．在图甲所示两发酵瓶中装入等量的葡萄汁进行果酒制作实验，若在A装置的通气口补充无菌空气，那么一段时间后，能获得葡萄酒的是    装置，发酵是否成功可用    对发酵产物进行检验确认．
              （2）图乙是胡萝卜素提取粗品鉴定结果示意图．点加提取样品的是    点，点加标准样品的是    点，该鉴定实验的方法叫做    ．
              （3）微生物培养时，如果想让培养基内只生长真菌，则可用含    的培养基；后期进行菌落统计时，一般选择菌落数在    间的平板进行计数．
              （4）与微生物培养相比，植物组织培养的培养基常需添加的植物激素是    ．
              难度：较难
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            • 6． 利用紫外线诱变选育高产β━胡萝卜素的三孢布拉霉负菌（单细胞真菌），未突变菌不能在含有浓度为10-5M的β━紫罗酮的培养基上生长．菌体随β━胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色．图甲为选育及提取获得β━胡萝卜素流程．

              （1）三孢布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是    ．
              （2）培养基中的葡萄糖为菌体生长提供    ；为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加    ．
              （3）进行③过程时，应选取    色的菌落接种至液体培养基．为筛选纯化β━胡萝卜素产量高的菌种，采取重复    （填图甲中数字）过程．
              （4）固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示．该同学的接种方法是    ；只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是    ．
              （5）过程⑥是    ，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品，结果发现颜色较浅，导致该现象的原因可能是萃取时，萃取剂使用量    ，提取的色素少．
              难度：中等
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            • 7． 为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制了如表培养基配方：
              蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水pH
              10g5g5g2g0.4g0.065g100mL7.2
              （1）该培养基所含的碳源有    ，其功能是    ．
              （2）该培养基所含的氮源有    ，其功能是    ．
              （3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是    ．
              （4）该细菌的同化作用类型是    ．
              （5）该培养基可用来鉴别哪种细菌？    
              A．霉菌        B．大肠杆菌        C．酵母菌        D．乳酸菌．
              难度：中等
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            • 8． 细菌对各种抗生素的药敏程度实验方法如下：在固体培养基中培养着状况相同的某种细菌，将含有一定浓度不同抗生素的滤纸片放置在不同固体培养基的表面，抗生素向周围扩散，如果抑制生长，则在滤纸片周围出现抑菌圈（图中里面的圈），结果如图所示．

              （1）衡量本实验结果的指标是    ．
              （2）上述图中最有效的是    培养皿中的抗生素．
              （3）用上述最有效的抗生素对细菌进行处理，并测定细菌数量变化，如图所示：
              ①向培养基中加抗生素的时刻为    点．
              ②细菌种群进化是定向的，而变异是    ，细菌的抗药性产生于环境变化之    （填“前”“中”或“后”），抗生素对细菌变异的作用不是“诱导”，而是    ．
              ③尽管有抗药性基因存在，但使用抗生素仍然能治疗由细菌引起的感染，原因在于细菌种群中    ．
              难度：较难
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            • 9． 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．

              （1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行    处理．
              （2）要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中的培养基应具有的特点是：在     的培养基中加入    ．
              （3）在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是    ．
              （4）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是    ，有透明带菌落利用的氮源主要是    ，据此可筛选出目的菌．
              （5）若实验接种时用的是稀释涂布平板法，在统计菌落数目时得到4个平板，统计的数目分别为21、213、257、278，则对数据处理后取平均值计数为    ，该方法往往比活菌的实际数目偏    （高/低）．
              难度：中等
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            • 10． 胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：

              （1）筛选产胡萝卜素的酵母菌菌R时，可选用    或平板划线法接种．采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是    ．
              （2）培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供    和    ．
              （3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好    和    以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用    方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是    ．
              （4）纸层析法可用于鉴定所提取胡萝卜素，鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为    ．
              难度：中等
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