加工橘子罐头，采用酸碱处理脱去中果皮（橘络），会产生严重污染。目前使用酶解法去除橘络，可减少污染。下列生长在特定环境中的4类微生物，不能大量产生上述酶的有（ ）

[生物——选修1：生物技术实践]

新鲜的泡菜滤液中含有乳酸菌，可作为实验材料分离纯化乳酸菌。请回答下列问题：

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行________，这样做的理由是________。

（2）分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，从而使培养基在分离纯化过程中会形成________。

（3）若要长期保存乳酸菌，菌液中常需要加入一定量的________（填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”），且要放置在________（填“－5”“－20”或“－100”）℃的冷冻箱中。若要短期保存乳酸菌，可将菌种接种到试管的________（填“溶液中”“固体培养基表面上”或“固体斜面培养基上”），菌落长成后，将试管放置在________（填“－4”“0”或“4”）℃的冰箱中保藏。

临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本（如痰液、粪便等），然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：

⑴为了从样本中分离并获取某种致病菌单菌落，可用             法或             法将人体样本接种于固体培养基表面，再经过选择培养、鉴别等步骤实现。

⑵为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板的不同位置，培养一段时间后，在四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A＞C＞D＞B。由此推断，该病人目前适合使用的是抗生素        。含D的滤纸片周围的透明圈比含A、C的小，但透明圈中出现了一个菌落，这种菌落的出现可能是由于杂菌污染导致的，也可能是由于该致病菌发生了突变；若发生了基因突变，这种突变一般是否由抗生素诱发的？         ，若要证明这种致病菌发生了基因突变，可检测和比较这类细菌细胞中        （“DNA 的碱基组成”“mRNA 的含量”“ DNA 的碱基序列”）。

⑶为防止杂菌污染，培养基的灭菌方法是         灭菌，接种环的灭菌方法是         灭菌，接种过程应该在               旁进行。

 (1)制作酸奶是利用乳酸菌在            （填“有氧”或“无氧”）条件下，将牛奶中的葡萄糖、乳糖分解成乳酸，同时将奶酪蛋白水解为短肽和     ___     ，不仅容易被人体吸收，也适用于乳糖不耐症人群。若牛奶中含有抗生素，会影响酸奶的制作效果，原因是         _____   ______________          。

(2)纯化乳酸菌时还需要设置未接种乳酸菌的培养基作为对照，若对照组培养基表面没有菌落生长，说明         ______       。

 (3)为探究不同种乳酸菌的抑菌效果，将稀释倍数相同的等量乳酸菌培养液滴加在长满致病菌的平板上，一段时间后，会出现以滴点为中心的抑菌圈，实验结果如下表。    

 ①该实验的自变量是       ___________________________________            。    

 ②由实验结果可知，乳酸菌对     ________________     （填致病菌）的抑菌效果比较突出；在生产应用中，不宜采用  _____  号菌株进行防腐。