[生物——选修1：生物技术实践]

胡萝卜素可以用来治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病，可以作为食用色素。最近还发现天然胡萝卜素具有使癌变细胞恢复为正常细胞的作用。请回答下列问题；

（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程要控制好温度和时间，原因是温度过高、干燥时间过长会导致________；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是________。

（2）培养产胡萝卜素的酵母菌时，在温度及气体环境分别为________条件下最适合其生长、繁殖。

（3）筛选产胡萝卜素的酵母菌时，可选用________法接种。接种过程需要在酒精灯火焰附近进行，其目的是________。

（4）酵母菌菌体裂解后经离心、萃取、浓缩可获得胡萝卜素，可通过________比较不同种类酵母菌的产胡萝卜素能力。所获得胡萝卜素纯度可通过纸层析法进行鉴定，该过程中的对照为________。

[生物·选修1：生物技术实践]

微生物的培养在生物科学史和现代生物工程中都是极其重要的基础技术。下图1是某学生重复艾弗里证明DNA是遗传物质实验的其中一组实验；下图2是基因工程中运用影印法将培养基A上的菌落按原来方向印在培养基B上，以检测重组质粒是否导入大肠杆菌的示意图，请据图回答下列问题。

（1）图1、图2的培养结果显示，两实验中使用的都是         （填物理状态）培养基

     ①酒精灯 ②接种环  ③高压蒸汽灭菌锅  ④培养皿

（3）培养基灭菌是避免杂菌污染的有效途径之一。适用于图1、图2所示培养基的灭菌方法是                        ；接种前还需检测灭菌效果。方法是将                   置于恒温箱中，在适宜温度下培养一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。

（4）实验证明，上述两项实验中R型菌和大肠杆菌的转化率都很低。为获得图1、图2所示的培养结果，一是要设法提高图1中S型菌的                                ；二是要使用恰当的方法接种。两实验都不能用平板划线法和稀释涂布平板法接种，而应采用不加稀释的涂布平板发接种R型菌和大肠杆菌，理由是                                     。接种培养4天后，可通过观察             的形态特征来识别R型菌和大肠杆菌。

手机高温、潮湿的环境非常适合细菌的生长，由大肠杆菌引起的食源性疾病日渐成为社会比较关注的公共卫生问题。为了了解手机上大肠杆菌的种类及分布情况，某兴趣小组进行了如下实验步骤。请进一步完善实验内容并回答相关问题：

（1）实验步骤：

①配制含有________、水、无机盐的固体培养基，并在培养基中加入少量________（使大肠杆菌菌落呈现黑色）；

②从10名学生的手机正、反面采集样品，分别接种至灭菌的培养基上，在37℃恒温培养箱中培养24～48h，选取________的菌落；

③将接种针用________法灭菌后，将②中选取的菌落接种到________（填“固体”或“液体”）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖；

④用________法将③过程所获得的细菌接种到培养基上，分别统计菌落的种类和数目；

⑤根据菌落的特征进一步鉴定大肠杆菌的类型。

（2）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于________培养基。

（3）上述实验步骤④统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是________。

[生物——选修1：生物技术实践]

请回答下列与微生物有关的问题。

（1）土壤中具有分解尿素的细菌，此类细菌能产生脲酶，该酶能将尿素分解成________。

（2）为从富含尿素的土壤中分离获得尿素分解茵的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

（注：“＋”表示有，“－”表示无）

培养基甲________（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别尿素分解菌，原因是________；培养基乙________（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别尿素分解菌，原因是________。

（3）如分别取0.1mL已稀释10²倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到产生脲酶的细菌的菌落数分别为161、155、158、170，则每升原水样中该细菌数为________个。

（4）纯化细菌时使用的培养基一般用________法灭菌，________（填“可”或“不可”）用加入抗生素的方法防止杂菌感染。

（5）某小组采用平板划线法分离某样本的该细菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是________。

（6）尿素分解菌在－20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的________（填“石蜡”“蒸馏水”或“甘油”）。

【生物—选修1：生物技术实践】

请回答下列有关微生物培养的问题：

（1）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，为了获得耐高糖、耐酸特性的酵母菌菌种，可以对野生酵母菌菌种进行诱变处理，然后在__________（培养基的物理状态）培养基上进行培养，该培养基要在基本培养基上额外添加______________________。

（2）若要用酿造果酒的装置酿造果醋，需要改变的环境条件是                      。

（3）分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、KCl、H₂O。若用于培养纤维素分解菌，应加入____________，为检验纤维素分解菌的存在与否，还应加入__________。

（4）安徽怀远盛产石榴，石榴酒也是当地的特产。利用石榴发酵制作石榴酒的过程中，发酵装置内加入石榴汁后要留出约1/3的空间，目的是____________________________。

（5）筛选乳酸菌时可选用平板划线法或______________________接种，培养基中的尿素可为乳酸菌生长提供__________。

[生物——选修1：生物技术实践]

   某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后，对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌，当培养基温度下降到50℃时，在酒精灯火焰附近倒平板，待培养基冷却至室温，按下表处理：

将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2～3天，观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题：

（1）上述实验的实验目的是________。若E组的培养基表面有菌落生长，说明了________。

（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长提供________和________。

（3）实验过程中“待培养基冷却至室温”的目的有________。

（4）实验结束后，对使用过的培养基应进行________灭菌处理。

有关微生物实验室培养的叙述，正确的是

[生物—选修1：生物技术实践]

根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：

（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入________制成选择培养基进行分离。

（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是________，常用________法统计样品中活菌的数量，统计结果一般用培养基中出现的菌落数表示。统计培养液中微生物（如酵母菌）的数量还可采用________的方法，用血细胞计数板计数。

（3）橘皮压榨后得到的糊状液体除去其中的固体物后获得乳状液，从乳状液中分离得到芳香油，要加入无水硫酸钠，其作用是________。

（4）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是________；玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入NaCl，增加盐浓度的目的是________。

（5）某兴趣小组将豆腐块灭菌，接种微生物后培养2天，加入适量食盐，经密封放置10天后制的豆腐乳。在保质期内，豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，其原因是豆腐中蛋白质被微生物产生的蛋白酶分解。最终使________含量增加，因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。

玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用___________法或____法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的__________催化。PCR技术一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______和_______三步。