[生物——选修1：生物技术实践]

牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况,也影响奶制品的运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况,做如下图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复2次。请回答下列有关问题:

（1）巴氏消毒的方法是_______________,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是______________________________。

（2）取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上进行涂布,应选择的涂布工具是下图中的_______________。

（3）图中所示方法为稀释培养法,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为_______________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值_______________(填“偏大”或“偏小”),原因是_______________。

（4）消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量,则在操作步骤上应做什么改动? _______________。

（5）从生牛奶取样培养得到的菌落中,混有各种杂菌,从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加人_______________,菌落具有_____________特征的可以认定为大肠杆菌。

[生物——选修1：生物技术实践]

金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性，在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。下面是某研究小组测定自来水中金黄色葡萄球菌浓度的实验操作。请回答下列问题：

（1）金黄色葡萄球菌的培养基为7.5％NaCl牛肉膏蛋白胨培养基，此培养基能为金黄色葡萄球菌的生长提供碳源、氮源及水和无机盐。培养基中加入7.5％NaCl利于金黄色葡萄球菌的筛选，原因是_____________________________________________。

（2）上述培养基的灭菌方法是_____________。在制作血平板时需等平板冷却后，方可加入血液，以防止___________。血平板在使用前，需置于恒温培养箱中一段时间的目的是________________。

（3）取10mL自来水样，加入_____mL无菌水稀释成10^-1稀释自来水样，依次操作，制作10^-2、10^-3、10^-4稀释自来水样。

（4）将0.1 mL 10^-l～10^-4的四个稀释样液，分别接种到4组(每组3个)血平板上的方法是__________。在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现___________。若在10^-3组的3个血平板上，金黄色葡萄球菌菌落数分别为39、38和37，则每升自来水中的活菌数约为____________。  

[生物——生物技术实践]

幽门螺杆菌是栖息在胃粘膜的革兰氏阴性螺旋状杆菌，具有强的脲酶（能降解尿素）活性，其代谢类型属于异养厌氧型（氧气浓度在5％～8％左右适合，完全无氧或空气环境中无法生存），这种细菌是慢性胃炎、甚至胃癌发生的元凶。

（1）为了对胃炎患者的胃粘膜提取物稀释样液中幽门螺杆菌进行分离，应将样品稀释液接种于以________为唯一氮源的固体选择培养基上，接种后的培养皿在________条件下，倒置于37℃的恒温培养箱中培养。

（2）分离培养幽门螺杆菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，培养基常用的灭菌方法有________。

（3）欲检测上述培养基中是否具有幽门螺杆菌这类细菌的存在，向培养基中添加酚红指示剂，培养基中菌落周围显示红色环带，即表明这类细菌的存在，这种检测过程的机理是________。

（4）采用液体培养基培养幽门螺杆菌，为了测定菌液中的菌体数量，一般采用________法将一定量的菌液接种到固体培养基上，统计________的数量来代表菌体数，这种检测方法测得的结果一般偏________（填“大”或“小”），原因是________。

利用微生物分解淀粉生产糖浆具广阔的应用前景。某同学为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌，进行如下实验：

(1)实验步骤：

①配制以           为碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是               。

②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上出现        。

③将接种针用                   法灭菌后，从②中的培养基上挑取一定量细菌，接种入          （固体、液体）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖。

④配制与①相同的培养基，并加入少量碘液，使培养基呈蓝紫色。用                  法将上一步大量繁殖后的细菌接种到已灭菌的培养基上。

⑤培养一段时间后，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现较大的          现象的菌落即为初选菌落，经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。

(2)上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于             培养基，⑤所用培养基属于             培养基。